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荧光钙离子指示剂在活细胞钙利用研究中的应用

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基础医学与临床 1990年第1期10卷 54-59页

作者：关超然龚明萃加拿大McMaster大学卫生科学院生物医学科学系

细胞钙的转运和利用及其与某些疾病发生和发展的关系是当前生理功能微观研究中的重点之一。是生命科学和基础医学研究中的前沿课题。应用荧光钙离子指示剂研究单个活细胞中钙的变化是近年兴起的一门新技术,具有广阔的应用前景。本刊特... 详细信息

细胞钙的转运和利用及其与某些疾病发生和发展的关系是当前生理功能微观研究中的重点之一。是生命科学和基础医学研究中的前沿课题。应用荧光钙离子指示剂研究单个活细胞中钙的变化是近年兴起的一门新技术,具有广阔的应用前景。本刊特请加拿大McMaster大学教授关超然博士撰写此文并译出,以飨读者。

关键词：荧光钙指示剂细胞钙荧光测量技术

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新型细胞钙荧光纳米微胶囊传感器的研究

新型细胞钙荧光纳米微胶囊传感器的研究

作者：刘斌陕西师范大学

学位级别：硕士

细胞内的重要生理活性物质有很多，如钙，锌，铜，氧等。它们广泛分布于人体的细胞和体液之中，对人体的生命活动起着重要的作用。随着人们对胞内重要生理活性物质的重要作用以及他们与某些疾病发生和发展关系的认识越来越深入，胞内重... 详细信息

细胞内的重要生理活性物质有很多，如钙，锌，铜，氧等。它们广泛分布于人体的细胞和体液之中，对人体的生命活动起着重要的作用。随着人们对胞内重要生理活性物质的重要作用以及他们与某些疾病发生和发展关系的认识越来越深入，胞内重要生理活性物质的研究已成为化学，生物学，基础和临床医学等学科的重要前沿热点研究课题。目前胞内重要生理活性物质的研究方法很多。人们常常根据各种方法的特点，按照所进行实验的具体要求而选择不同的测定方法。如生物发光蛋白法、有机显色剂法、离子传感器法、微电极法、核磁共振法，荧光探针法等。其中又以荧光探针法研究居多。传统的荧光探针具有反应迅速、测定灵敏度高、选择性好、线性范围宽等优点，但在生物医学研究应用中也存在一些难以克服的缺陷，如有可能产生的细胞毒副作用、与细胞内物质的螯合作用、与蛋白质的键合、指示剂泄露、光漂白效应等，因而对检测结果存在很大的干扰。另外，传统的荧光分子荧光标记方法，只能在生物分子的活性基团上连接少数的几个荧光分子，分析灵敏度有限。人们经过大量的研究提出了很多的解决方法，如双波长比率法，纳米微胶囊包被法等，尤其是纳米微胶囊包被法可以有效的解决上述问题。在很大程度上克服了传统荧光试剂的缺陷，荧光染料的稳定性显著提高，避免了荧光染料与生物活性物质直接接触所带来的副作用，而且光漂白现象也大大减少。为此，本论文利用我们实验室自行合成的新型Ca荧光探针STDBT和STDIn，采用纳米微胶囊包被法合成了两种细胞钙荧光纳米微胶囊传感器一生物包埋胶囊探针(probe encapsulated by biologicaUy localized embedding，PEBBLEs) STDBT和STDIn，并采用透射电镜、荧光光谱法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪等手段对所制备纳米胶囊探针的形态及粒径分布、光谱性能、对Ca的响应性能、发光稳定性及细胞标记性能等进行了系统的研究，与未包被的探针染料进行了对比。结果表明，所制备纳米胶囊探针粒径小(30nm)，分布均匀，形态规则，表面圆润，发光性质稳定，对Ca响应灵敏，且通过与细胞简单共培育即可有效的进入细胞，其中STDBT纳米胶囊探针主要标记胞核区域，标记后显微镜下至少可观察2h以上。为胞核内Ca的测定研究提供有效的手段。本研究论文主要包括以下两个部分：一、概述论文对纳米微胶囊包被法合成聚合物型荧光纳米微胶囊传感器—生物包埋

关键词：细胞钙荧光纳米微胶囊传感器生物包埋胶囊探针制备 STDBT STDIn 心肌细胞

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细胞钙信息转导与疾病发生发展的关系

动物科学与动物医学 2004年第11期21卷 29-31页

作者：范运峰郑明学梁文涛山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

在动物中提出环磷酸腺苷(cAMP)第二信使概念后,人们在研究中确认了另一种胞内信使--钙离子(Ca2+),二者共同作用,调节机体的各种生命活动。本文从细胞信息转导途径入手,阐述了细胞信息转导过程中的各种调控因子及相关途径,并对一些疾病... 详细信息

在动物中提出环磷酸腺苷(cAMP)第二信使概念后,人们在研究中确认了另一种胞内信使--钙离子(Ca2+),二者共同作用,调节机体的各种生命活动。本文从细胞信息转导途径入手,阐述了细胞信息转导过程中的各种调控因子及相关途径,并对一些疾病的发生发展和Ca2+信息转导的关系做出进一步的论述。

关键词：发生发展信息转导疾病发生细胞钙 Ca^2+ 环磷酸腺苷第二信使生命活动调控因子动物

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细胞钙荧光探针前体的设计合成

细胞钙荧光探针前体的设计合成

肿瘤坏死因子和蛋白激酶C对单个内皮细胞和白细胞钙的影响

中国化学会第二十五届学术年会

作者：韩洁贺怀贞李剑利史真西北大学化学系西北大学化学系西北大学化学系西北大学化学系

Calcium is one of the most vital elements in living cells; the variation of the concentration of calcium has a key relation to many physiological progresses, so to detect the concentration of calcium

关键词：细胞钙荧光探针合成

来源： cnki会议评论

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中国动脉硬化杂志 1995年第1期3卷 1-4页

作者：吴其夏党瑛栾竞李岩中国医学科学院基础医学研究所病理生理室

本实验用激光扫描共聚焦技术发现肿瘤坏死因子（１ＭＩＵ·Ｌ－１）使培养的单个血管内皮细胞胞浆区和核区Ｃａ２＋皆呈现一过性升高，而且核区上升幅度大，下降缓慢。同等剂量的肿瘤坏死因子没有引起单个白细胞Ｃａ２＋水平的明显变化... 详细信息

本实验用激光扫描共聚焦技术发现肿瘤坏死因子（１ＭＩＵ·Ｌ－１）使培养的单个血管内皮细胞胞浆区和核区Ｃａ２＋皆呈现一过性升高，而且核区上升幅度大，下降缓慢。同等剂量的肿瘤坏死因子没有引起单个白细胞Ｃａ２＋水平的明显变化。蛋白激酶Ｃ的活化剂佛波醇酯（３．５ｎｍｏｌ·Ｌ－１）可引起两类细胞Ｃａ２＋水平皆迅速升高，随后下降，低于原水平，最后，内皮细胞核区Ｃａ２＋完全被排空，而白细胞核区仍残留Ｃａ２＋。结果提示肿瘤坏死因子对不同的靶细胞的刺激效应不同；细胞不同区的Ｃａ２＋水平变化效应也不同；蛋白激酶Ｃ的作用主要是排出细胞内Ｃａ２＋。观察单个细胞Ｃａ２＋变化有助于研究Ｃａ２＋参与动脉粥样硬化发病机制。

关键词：动脉粥样硬化细胞钙肿瘤坏死因子蛋白激酶C

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细胞钙对神经细胞基因表达的调控

生理科学进展 1997年第4期28卷 54-54页

作者：宝福凯

细胞钙对神经细胞基因表达的调控钙通过电压或配体门控通道进入神经细胞可诱导神经细胞的活化依赖基因的表达，这对神经系统的适应性改变极为关键。胞质钙的瞬变过程常伴随核钙浓度的升高，但这种空间分布独特的钙信号的功能意义并不清... 详细信息

细胞钙对神经细胞基因表达的调控钙通过电压或配体门控通道进入神经细胞可诱导神经细胞的活化依赖基因的表达，这对神经系统的适应性改变极为关键。胞质钙的瞬变过程常伴随核钙浓度的升高，但这种空间分布独特的钙信号的功能意义并不清楚。ＨａｒｄｉｎｇｈａｍＧＥ等用基...

关键词：神经细胞基因表达细胞钙调控调节控制

小儿体外循环术后低心排综合征与细胞钙超负荷研究

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潍坊医学院学报 2003年第4期25卷 247-249页

作者：李生德王葵亮王涛青岛市妇女儿童医疗保健中心山东青岛266011

目的探讨小儿心内直视术后低心排综合征(低心排)时细胞内外钙的运转机制,并指导临床正确处理。方法对13例心内直视术后低心排患儿及同期20例术后无低心排病儿血浆钙离子、红细胞钙含量、Ca2+-Mg2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性进行测定。结... 详细信息

目的探讨小儿心内直视术后低心排综合征(低心排)时细胞内外钙的运转机制,并指导临床正确处理。方法对13例心内直视术后低心排患儿及同期20例术后无低心排病儿血浆钙离子、红细胞钙含量、Ca2+-Mg2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性进行测定。结果术前两组上述指标差异无显著性(P>0.05),低心排组术后48h内血浆离子钙呈现进行性下降,红细胞钙含量持续升高。Ca2+-Mg2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性降低,术后72h有所恢复。无低心排组血浆钙离子浓度在术后2h,红细胞钙含量与膜ATP酶活性在术后12h恢复。两组比较差异显著(P细胞内外钙运转异常与细胞钙超负荷。且与预后密切相关。

关键词：小儿低心排综合征体外循环细胞钙

Src激酶和血管内皮细胞钙黏蛋白磷酸化在大鼠颅内动脉瘤中的表达

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中华实验外科杂志 2012年第11期29卷 2328-2328页

作者：李关华聂艳良张贤华梁尚栋南昌大学第一附属医院神经外科 330006 南昌大学基础医学院

颅内动脉瘤形成的病因和机制目前仍不清楚，血管内皮细胞钙黏蛋白（VE-cadherin）在保持血管内皮细胞结构的稳定性和完整性、调节内皮细胞之间的通透性中发挥重要作用，而Src激酶参与调控VE-cadherin的磷酸化及各种细胞内信号。本研究... 详细信息

颅内动脉瘤形成的病因和机制目前仍不清楚，血管内皮细胞钙黏蛋白（VE-cadherin）在保持血管内皮细胞结构的稳定性和完整性、调节内皮细胞之间的通透性中发挥重要作用，而Src激酶参与调控VE-cadherin的磷酸化及各种细胞内信号。本研究应用实验性大鼠颅内动脉瘤模型模拟体内颅内动脉瘤形成过程中血管壁的损害，探讨动脉瘤形成过程中Src激酶和VE-cadherin磷酸化的表达。一。

关键词：血管内皮细胞颅内动脉瘤蛋白磷酸化 Src激酶实验性大鼠 VE-cadherin 细胞钙细胞内信号

Nogo-C增加心肌细胞钙渗漏诱导细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1796-1796页

作者：贾石郑铭北京大学医学部生理学与病理生理学系

目的:研究Nogo-C在心脏中的作用及机制。方法:冠脉左前降支结扎建立心梗模型;缺氧孵箱培养乳鼠心肌细胞;感染Nogo-C cD NA或shN ogo-C腺病毒过表达或敲低Nogo-C;TUNEL染色及AnnexinⅤ/PI双标检测细胞凋亡;Fluo-4/Fura-2观察细胞钙离子浓... 详细信息

目的:研究Nogo-C在心脏中的作用及机制。方法:冠脉左前降支结扎建立心梗模型;缺氧孵箱培养乳鼠心肌细胞;感染Nogo-C cD NA或shN ogo-C腺病毒过表达或敲低Nogo-C;TUNEL染色及AnnexinⅤ/PI双标检测细胞凋亡;Fluo-4/Fura-2观察细胞钙离子浓度;蛋白免疫共沉淀检测蛋白相互作用。结果:心梗心肌组织及缺氧心肌细胞Nogo-C蛋白水平显著增高;过表达

关键词：心肌细胞细胞钙细胞凋亡 Nogo-C