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中国药理学通报 2017年第3期33卷 440-441页

作者：全杰邱德来初春平邴艳华金文哲延边大学附属医院疼痛科吉林延吉133000 延边大学医学部细胞功能研究中心生理学与病理生理学教研室吉林延吉133000

依托咪酯（etomidate,ET）是一种作用强、短效的非巴比妥类静脉麻醉药,常用于麻醉诱导和门诊手术麻醉。研究表明,ET可直接或间接作用于丘脑皮层神经元GABAA受体,产生GABA样的作用,或增强GABA与GABAA受体结合所引起的效应,减少神经元动... 详细信息

依托咪酯（etomidate,ET）是一种作用强、短效的非巴比妥类静脉麻醉药,常用于麻醉诱导和门诊手术麻醉。研究表明,ET可直接或间接作用于丘脑皮层神经元GABAA受体,产生GABA样的作用,或增强GABA与GABAA受体结合所引起的效应,减少神经元动作电位的发生频率。ET明显抑制初级感觉皮层锥体细胞电压门控Na＋通道,减小Na＋电流,提示ET可能通过抑制初级感觉皮层神经元Na＋通道,降低神经元兴奋性,而ET影响小脑皮层神经元功能的文献尚未见报道.

关键词：依托咪酯小脑浦肯野细胞细胞贴附式记录神经药理学小鼠

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戊巴比妥钠对雌性小鼠初级听皮层兴奋性和抑制性神经元的选择性作用

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中国科技论文 2018年第12期13卷 1345-1350页

作者：刘竞鹏肖中举南方医科大学基础医学院广州510515

为比较戊巴比妥钠对雌性小鼠初级听皮层(primary auditory cortex,A1)兴奋性神经元与小清蛋白(parvalbumin,PV)抑制性神经元的影响,采用30只成年雌性C57BL/6J小鼠,通过腹腔注射戊巴比妥钠结合在体细胞贴附式方式,记录A1中两类神经元在... 详细信息

为比较戊巴比妥钠对雌性小鼠初级听皮层(primary auditory cortex,A1)兴奋性神经元与小清蛋白(parvalbumin,PV)抑制性神经元的影响,采用30只成年雌性C57BL/6J小鼠,通过腹腔注射戊巴比妥钠结合在体细胞贴附式方式,记录A1中两类神经元在雌性小鼠麻醉前后声诱发动作电位的变化。结果表明,在戊巴比妥钠麻醉过程中,兴奋性神经元动作电位发放数逐渐减少直至完全消失,随着戊巴比妥钠药力的逐渐消退,动作电位发放数又逐渐恢复。PV抑制性神经元动作电位发放数虽有减少,但并未完全消失。同时,兴奋性神经元平均延时变化量大于PV抑制性神经元平均延时变化量。两类神经元动作电位发放数和延时变化量的不同说明雌性小鼠A1中的兴奋性神经元相对于PV抑制性神经元对戊巴比妥钠的敏感性更强,即戊巴比妥钠对雌性小鼠A1中兴奋性神经元和PV抑制性神经元有选择性作用。

关键词：生理学初级听皮层戊巴比妥钠细胞贴附式记录兴奋性神经元小清蛋白抑制性神经元

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丙泊酚对在体小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发性活动的影响

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中国老年学杂志 2017年第1期37卷 17-19页

作者：吕冰邱德来初春平金日金文哲延边大学附属医院疼痛科吉林延吉133000 吉林省细胞功能与药理重点实验室延边大学医学部生理学与病理生理学教研室延边大学附属医院骨科

目的探讨丙泊酚对在体小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发性单纯性放电活动、自发性复杂峰电位放电特性的影响。方法选用6~8周龄ICR小鼠6只,腹腔注射乌拉坦麻醉,在小脑CrusⅡ小叶行开颅手术,开孔直径为1.0~1.5 mm,去除硬脑膜后,用蠕动泵在脑表... 详细信息

目的探讨丙泊酚对在体小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发性单纯性放电活动、自发性复杂峰电位放电特性的影响。方法选用6~8周龄ICR小鼠6只,腹腔注射乌拉坦麻醉,在小脑CrusⅡ小叶行开颅手术,开孔直径为1.0~1.5 mm,去除硬脑膜后,用蠕动泵在脑表面持续灌流含氧的人工脑脊液,浦肯野细胞贴附式记录使用Multi clamp700B膜片钳放大器,通过D/A转换器1440和Clampfit 10.3软件获取浦肯野细胞自发性活动数据。待自发性活动记录稳定后,给予丙泊酚,观察其对浦肯野细胞自发性单纯峰电位(SS)和复杂峰电位(CS)活动的影响。结果脑表面给予丙泊酚剂量依存地抑制小鼠小脑浦肯野细胞自发性SS放电活动,其半数抑制浓度为143μmol/L,当浓度为500μmol/L时自发性SS放电完全抑制,然而,丙泊酚对自发性复杂峰电位放电频率和波形特征无显著影响。结论在体条件下,脑表面灌流丙泊酚显著抑制浦肯野细胞自发性SS放电活动。

关键词：丙泊酚浦肯野细胞小脑皮层细胞贴附式记录

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小鼠颞叶联合皮层的声反应特性

小鼠颞叶联合皮层的声反应特性

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作者：刘竞鹏南方医科大学

学位级别：硕士

自然界中,人类和动物通过感受器接收各种感觉信息的输入,再经由大脑整合处理这些信息从而可以进一步的认识这个世界,这些感觉信息主要包括了视觉、听觉、触觉、躯体感觉等信息。在这之中,听觉信息被接收后可产生神经冲动,然后通过低级... 详细信息

自然界中,人类和动物通过感受器接收各种感觉信息的输入,再经由大脑整合处理这些信息从而可以进一步的认识这个世界,这些感觉信息主要包括了视觉、听觉、触觉、躯体感觉等信息。在这之中,听觉信息被接收后可产生神经冲动,然后通过低级听觉中枢神经传导至听皮层进行初步的加工处理,再经由联合皮层整合,最终在高级听觉中枢所在脑区产生一系列广泛的听觉感觉,从而对人类和动物的一系列行为进行调控。颞叶联合皮层（temporal association cortex,TeA）作为大脑中一个多感觉整合的核团,既是听觉信息与其他感觉信息传入并进行加工整合的重要中转站之一,同时也是参与多感觉整合过程中的一个重要核团。但是从目前来看,并没有单纯的对TeA声音信息处理的相关研究,而在其多功能研究中有关TeA声音信息处理的研究又不够深入。神经生理学研究证实了多感觉区域加工整合感觉信息至关重要的基础是由单一的神经元活动所建立的,而TeA是否存在声刺激激活的神经元,这些神经元会对哪些声音有反应?TeA是否具有频率拓扑分布、强度反应等频率和强度信息的加工整合?先前已有大量的实验结果表明TeA是恐惧学习记忆的必要核团,那么TeA神经元对声音的反应在听觉条件恐惧训练后是否又有变化呢?本实验将通过C-fos免疫荧光染色及在体膜片钳技术来解决这些问题。本实验主要研究结果如下:（1）噪音和纯音刺激后清醒和麻醉小鼠TeA区域的C-fos蛋白阳性表达通过C-fos免疫荧光染色发现TeA存在声刺激激活神经元,且麻醉状态会影响TeA神经元的激活。（2）TeA对声音信息处理的电生理特性研究①TeA的局部场电位反应特性通过局部场电位记录,确定TeA有声反应,反应幅度随声强的增加而增大,并且反应阈值较高,其在高强度下对全频率有反应。②TeA的动作电位输出反应特性细胞贴附式记录后发现TeA神经元动作电位发放数随声音强度增强而增多,在最高声强处达到最大。反应主要以多频率反应为主,无频率选择性。③A1、A2、TeA三个核团之间存在聚合投射通过细胞贴附式记录,发现A1、A2、TeA三个核团的神经元延时逐渐变长,阈值逐渐变高,同时频率调谐区间由窄逐渐变宽直至对全频率都有反应。（3）TeA神经元的突触输入反应机制全细胞记录到两类突触输入反应,其兴奋性突触后电流（EPSC）和抑制性突触后电流（IPSC）幅度随声刺激强度增强而增大,无频率选择性。（4）听觉条件恐惧训练后TeA神经元的声反应特性改变细胞贴附式记录发现TeA神经元阈值普遍降低,且有部分神经元出现突触可塑性改变。综上所述,可以得到以下结论:在开放声场条件下,①小鼠TeA神经元有声反应,可以编码强度信息,但无频率选择性。②A1-A2-TeA之间存在聚合投射关系。③听觉条件恐惧训练后TeA神经元敏感性增强并产生突触可塑性改变。

关键词：颞叶联合皮层声反应特性局部场电位记录细胞贴附式记录全细胞记录

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CRF对小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发兴奋性谷氨酸能突触传递的影响

CRF对小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发兴奋性谷氨酸能突触传递的影响

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作者：赵婧彤延边大学

学位级别：硕士

目的:哺乳动物的小脑是重要的与运动功能相关的中枢器官,来自外部信息通过攀爬纤维（CF）、苔藓纤维（MF）进入小脑皮层后,经小脑皮层神经元网络整合与计算后,由浦肯野细胞（PC）发出运动调节指令,来完成运动调节的相关功能。促肾上腺... 详细信息

目的:哺乳动物的小脑是重要的与运动功能相关的中枢器官,来自外部信息通过攀爬纤维（CF）、苔藓纤维（MF）进入小脑皮层后,经小脑皮层神经元网络整合与计算后,由浦肯野细胞（PC）发出运动调节指令,来完成运动调节的相关功能。促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）是一种重要神经肽,参与调控哺乳动物应激反应和内脏功能活动,CRF神经纤维大量投射到小脑皮层,影响哺乳动物小脑皮层PCs的自发性放电活动,但其影响机制有待于进一步明确。本研究拟利用乌拉坦麻醉小鼠,采用活体动物电生理记录技术和神经药理学手段,研究CRF对小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发兴奋性谷氨酸能突触传递的影响,探讨CRH对小脑皮层PC自发兴奋性谷氨酸能突触传递影响的受体机制。材料与方法:6-8周龄的成年ICR小鼠,腹腔注射1.3 g/kg乌拉坦麻醉后,在其小脑Vermis区的相应位置开一个直径为1-1.5 mm的孔,轻轻剥除其硬脑膜,并在暴露部位持续灌人工脑脊液（ACSF）。PC自发性放电活动采用细胞外贴附式记录记录方法,通过Axopatch-200B膜片钳放大器及数据采集软件记录小脑皮层PC自发性活动;CRH及受体阻断剂采用小脑表面灌流给药;电生理实验数据分析采用Clampfit 10.3软件。各组数据均用Mean ± S.E.M.表示,记录细胞数用n表示,采用SPSS（Version 21）软件进行数据统计学的分析,使用单因素方差分析进行均数的比较,P＜0.05认为有统计学意义。结果:（1）脑表面灌流CRF（100nM）显著增加PCSS自发性放电频率,SS放电的平均频率为给药前的118.2 ± 3.7%,非选择性CRF-Rs阻断剂可以完全阻断CRF所导致的PC自发性SS放电频率的升高。（2）CRF-R1选择性受体阻断剂BMS-763534明显阻断CRF导致的PC自发性SS放电频率升高。（3）CRF-R2选择性受体阻断剂antisauvagine-30也可以明显抑制CRF导致的PC自发性SS放电频率升高。（4）在antisauvagine-30和BMS两种阻断剂共同存在下,CRF不能诱发PC自发性SS放电频率升高且CRF-R1的作用大于CRF-R2。（5）CRF可显著缩短mEPSCs时间间隔,但对mEPSCs的振幅没有影响。在CRF-R2阻断剂存在条件下,CRF不再缩短mEPSCs时间间隔。（6）PKA抑制剂-H-89可显著增加mEPSCs时间间隔,并显著降低mEPSCs振幅,并完全阻断了 CRF对mEPSCs的频率的影响。结论:本研究结果表明,CRF可通过活化CRF-R2增加PC突触前谷氨酸能递质释放、增加PC的兴奋性传入导致其自发性SS放电频率升高,提示应激刺激可通过突触前CRF受体调节小脑皮层PC自发性活动,进而影响PC的指令输出以及运动调节功能。

关键词：小脑皮层促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）细胞贴附式记录全细胞膜片钳记录小脑浦肯野细胞神经药理学

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促肾上腺皮质激素释放激素对小鼠小脑皮层浦肯野细胞简单峰电位活动的影响

促肾上腺皮质激素释放激素对小鼠小脑皮层浦肯野细胞简单峰电位活...

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作者：苏珊珊延边大学

学位级别：硕士

[目的]小脑是哺乳动物重要的运动中枢,外部信息经攀爬纤维（Climbing fiber,CF）和苔藓纤维（Mossy fiber,MF）传入小脑皮层,经精密运算后,由浦肯野细胞（Purkinje cell,PC）发出各种输出指令,来完成各种生理活动。促肾上腺皮质激素释... 详细信息

[目的]小脑是哺乳动物重要的运动中枢,外部信息经攀爬纤维（Climbing fiber,CF）和苔藓纤维（Mossy fiber,MF）传入小脑皮层,经精密运算后,由浦肯野细胞（Purkinje cell,PC）发出各种输出指令,来完成各种生理活动。促肾上腺皮质激素释放激素（Corticotropin releasing hormone,CRH）是调控应激反应和内脏活动的一种重要神经肽,CRH可通过传入纤维分布于哺乳动物小脑环路,影响PCs的自发性放电和指令输出,但其影响机制尚不明确。本研究拟采用在体的电生理记录技术以及神经药理学手段,在乌拉坦麻醉的状态下,研究不同浓度CRH对小鼠小脑PC自发性单纯峰电位活动的影响,探讨CRH对小脑皮层PC自发性活动影响的受体机制。[实验材料与方法]成年（6-8周龄）ICR小鼠,腹腔注射乌拉坦（1.3 g/kg）麻醉后,于小脑Vermis区的相应部位行一个直径为1-1.5 mm的开颅术,剥除硬脑膜,脑表面的暴露部位持续给予人工脑脊液（Artificial cerebrospinal fluid,ACSF）灌流。PC自发性放电活动采用细胞外贴附式记录记录方法,通过膜片钳放大器（AxopatCh--200B）及数据采集软件记录小脑皮层PC自发性活动;CRH及受体阻断剂采用小脑表面灌流给药;电生理实验数据分析采用Clampfit 10.3软件。各组数据均用Mean 土 S.E.M.表示,记录细胞数用n表示.采用SPSS（Version 21）软件进行数据统计学的分析,使用单因素方差分析进行均数的比较,P＜0.05认为有统计学意义。[结果]（1）脑表面灌流CRH,可导致PC自发性简单峰电位放电即时频率显著减少,峰值左移;简单峰电位放电频率由给药前的24.3 ± 1.6 Hz降低到19.4 ± 2.1 Hz（P＜0.05）,但CRF对简单峰电位放电的变异系数（Coefficient of variation,CV）无显著影响。（2）在GABAA受体阻断剂存在下,CRH可导致PC自发性简单峰电位放电即时频率显著增加,峰值右移。简单峰电位放电频率由25.5 ± 1.8 Hz升高到30.7 ±2.4 Hz（P＜0.05）,表明CRF可能兴奋小脑皮层抑制性中间神经元,导致PC简单峰电位放电频率减少;阻断抑制性中间神经元的抑制性传入后,CRH可兴奋PC导致简单峰电位放电频率升高。（3.）在阻断抑制性中间神经元介导的GABA能突触传递后,CRH对PC自发性简单峰电位放电频率的升高作用具有浓度依存性,引起PC自发性简单峰电位升高的半数有效浓度是53.8 nM,最大浓度是1μ M。（4）阻断GABAA和AMPA受体,CRH可使PC自发性简单峰电位频率升高,即时频率显著升高,峰值右移;CRH对fPC自发性简单峰电位放电CV影响不大,表明CRH兴奋PC导致简单峰电位放电频率升高不是通过增加CF和PF的兴奋性传入来实现的。（5）在非选择性CRH受体阻断剂存在下,CRH对PC自发性简单峰电位放电即时频率影响消失,简单峰电位平均频率不再升高,表明CRH通过CRF受体兴奋小脑皮层PC,导致PC自发性简单峰电位放电频率升高。（6）在CRH-R2阻断剂存在下,CRH对PC自发性简单峰电位放电即时频率的影响依然存在,简单峰电位平均频率显著升高,表明CRH兴奋小脑皮层PC,不依赖于CRH-R2,提示CRH直接作用于PC膜上的CRH-R1而兴奋PC导致自发性简单峰电位频率升高。[结论]本研究结果表明,CRH可兴奋小脑皮层抑制性中间神经元导致PC抑制,阻断MLI-PC间的GABA能突触传递后,CRH通过CRH-R1兴奋PC,导致PC自发性简单峰电位放电频率升高,提示应激刺激可通过CRH受体作用于小脑皮层PC,影响PC的指令输出以及运动调节功能。

关键词：小脑皮层促肾上腺皮质激素释放激素细胞贴附式记录小脑浦肯野细胞神经药理学

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