检索结果-南通市图书馆

作者：姚天虹厦门大学

学位级别：硕士

细胞外囊泡(EVs)是一类源自细胞,如红细胞、血小板、癌细胞等外膜的仿生药物递送载体。研究表明,不同来源的细胞膜载体继承了不同表面功能特性,加之其具备高稳定性、良好的生物相容性、高度可修饰性及较好的装载、保护、缓释药物等优点... 详细信息

细胞外囊泡(EVs)是一类源自细胞,如红细胞、血小板、癌细胞等外膜的仿生药物递送载体。研究表明,不同来源的细胞膜载体继承了不同表面功能特性,加之其具备高稳定性、良好的生物相容性、高度可修饰性及较好的装载、保护、缓释药物等优点,因此该类药物载体已被广泛用作各类疾病药物运载平台。然而尽管EVs的相关制备方法及应用取得了重大进展,但其现存的不足如制备工艺复杂、疾病靶向性能仍不足以满足现今疾病精准治疗的需求等,阻碍了细胞来源的囊泡载体在临床转化中的进程。随着仿生技术的发展,将药物分子加载到细胞外囊泡脂质层中已成为进一步升级该囊泡性能的最常用及最有效的手段之一。该论文中,我们报告了一种在EVs中加载合适结构表面活性剂用于简便制备EVs及调控其功能的EVs改造策略。本研究在表达有新冠S蛋白的MDCK细胞MDCK-S的细胞膜纳米囊泡体系中展开研究,我们选取结构功能具有代表性的PVP、Triton X-100、Poloxamer 188(也称Pluronic F68)、Tween-20、Tween-80几种表面活性剂展开研究。材料层面实验表明插入Tween-20、Tween-80表面活性剂可简便、快速地将细胞膜纳米囊泡尺寸控制在200 nm左右,且对囊泡的结构、蛋白种类和数量有影响。我们从中筛选出细胞膜插入效率较高、性能最理想的表面活性剂Tween-80作进一步体内外实验研究。细胞实验表明插入Tween-80的细胞膜纳米囊泡与DC细胞有更好的交互作用、提高抗原递呈效果;动物活体成像及抗体检测结果显示插入Tween-80的细胞膜纳米囊泡有更好的淋巴结归巢效果和激发特异性免疫的效果。此外,本研究在B16-OVA细胞膜纳米囊泡体系中展开研究,验证了插入Tween-80 可快速调控细胞膜纳米囊泡的尺寸,提高膜表面抗原递呈效果,证明了表面活性剂的插入在调控细胞膜纳米囊泡结构及充当抗原佐剂方面均具有良好效果。

关键词：表面活性剂细胞膜囊泡抗原递呈

基于细胞膜囊泡的纳米疫苗用于包虫病的免疫治疗

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基于细胞膜囊泡的纳米疫苗用于包虫病的免疫治疗

作者：向韡厦门大学

学位级别：硕士

包虫病作为当今严重危害人类健康的寄生虫病,是一项重大的公共卫生问题。目前临床上治疗包虫病的方法主要是手术治疗联合阿苯达唑药物治疗,因为在复杂的手术过程中原头节杀灭不足,积液散播经常导致复发及并发症,治疗效果不佳;药物治疗... 详细信息

包虫病作为当今严重危害人类健康的寄生虫病,是一项重大的公共卫生问题。目前临床上治疗包虫病的方法主要是手术治疗联合阿苯达唑药物治疗,因为在复杂的手术过程中原头节杀灭不足,积液散播经常导致复发及并发症,治疗效果不佳;药物治疗也存在吸收效率低下以及不可避免的副作用和耐药性问题。因此寻找新型且有效的治疗策略是一项迫切的挑战。免疫疗法作为包虫病治疗最具潜力的策略之一,在世界范围内受到了高度的关注。疫苗治疗是免疫疗法的重要组成部分,因其具有靶向性好,特异性强,安全性高等优点,受到了广泛的应用。因此,研制包虫病疫苗是解决目前包虫病治疗难题的一个重要思路。虽然研究者们在开发抗包虫病疫苗方面取得了一些进展,但大部分往往无法诱导足够的免疫反应,导致最终无法实现临床转化。近年来随着纳米技术的迅猛发展,纳米医学作为一个新兴的研究领域在传染病诊断和防治中展现出了独特的优势,基于纳米医学研制而成的纳米疫苗治疗系统显露出光明的应用前景。受到天然细胞膜性质和结构的启发,研究者们将其作为一种天然仿生载体,用于免疫原的递送等研究,极大提高了疫苗的生物相容性。另外,通过联合基因工程技术,研究者们能够轻松实现将特定功能蛋白表达在细胞膜的表面,从而赋予细胞膜囊泡天然的靶向性、免疫原性、及各种特定生物活性。在本论文中,利用细胞膜定向表达技术,我们研制出一种新型的纳米囊泡功能化平台,在Vero细胞膜的表面表达包虫病T细胞和B细胞表位的特定蛋白,对细胞提取囊泡之后,制备成为细胞膜囊泡纳米疫苗。我们通过实验评估了其治疗包虫病的效果,发现囊泡疫苗能够更有效地被DC细胞所摄取,刺激DC细胞的成熟活化,并且能够更有效地在淋巴结处富集。通过引发强烈的体液免疫和细胞免疫,能够有效抑制包虫在体内的生长,达到对包虫病更有效的治疗效果,同时具备良好的生物安全性。

关键词：包虫病免疫治疗细胞膜囊泡纳米疫苗

基于DNA纳米结构的功能化细胞膜囊泡的构筑及应用研究

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基于DNA纳米结构的功能化细胞膜囊泡的构筑及应用研究

作者：黄惠东湖南大学

学位级别：硕士

细胞来源的细胞膜囊泡由于具有良好的生物相容性和较低的免疫原性,可作为性质优良的仿生载体用于药物递送。然而,细胞膜囊泡本身不具有靶向识别作用,因此,如何提高细胞膜囊泡的特异性识别能力成为开发细胞膜囊泡作为仿生载体亟待解决的... 详细信息

细胞来源的细胞膜囊泡由于具有良好的生物相容性和较低的免疫原性,可作为性质优良的仿生载体用于药物递送。然而,细胞膜囊泡本身不具有靶向识别作用,因此,如何提高细胞膜囊泡的特异性识别能力成为开发细胞膜囊泡作为仿生载体亟待解决的问题。基于DNA分子的可设计性、良好的可编程性等优势,DNA作为一种天然的生物材料已经被广泛应用于生物医学领域。其中,具有识别能力的核酸适体可以特异性结合从离子到蛋白质的各种靶标。基于碱基互补的原理,将核酸适体与DNA纳米结构相结合,可以构建具有识别能力的DNA功能模块并灵活操控DNA功能模块识别性能。基于DNA纳米技术的独特优势,在本论文中,我们构筑了核酸适体修饰的DNA纳米结构并将其修饰在细胞膜囊泡表面,从而提高细胞膜囊泡对靶细胞的识别能力。利用这种细胞膜囊泡作为载体,我们将金碳点(GCDs)装载到细胞膜囊泡中并将其用于监测靶细胞内的氧化还原变化情况,具体工作如下:(1)我们设计了两种具有靶向作用的DNA纳米结构,并将这种纳米结构锚定在细胞膜囊泡表面,从而赋予细胞膜囊泡对靶细胞的特异性识别作用。我们首先构筑了由DNA四面体和I-motif序列以及核酸适体Sgc8组成的DNA的逻辑门结构,这种组合的DNA纳米结构对肿瘤微酸性环境具有响应性。当暴露于酸性p H环境中时,I-motif从逻辑门结构中释放,同时恢复了Sgc8适体的靶向能力。利用DNA杂交链置换反应(HCR)可以产生重复的单元结构,基于这种DNA纳米结构,我们将核酸适体Sgc8与之整合,获得具有多价识别能力的DNA功能单元,可以通过增加囊泡表面连接适体数量来增加其与目标细胞的结合能力。这种基于DNA纳米技术的功能化修饰方法为细胞膜囊泡的功能化修饰提供了新思路,拓展细胞膜囊泡的生物医用应用。(2)我们将金碳点(GCDs)装载到细胞膜囊泡中,利用上述DNA的逻辑门纳米结构修饰细胞膜囊泡,获得可对靶细胞内氧化还原状态具有监测能力的细胞膜囊泡。一方面,细胞膜囊泡表面上修饰的DNA逻辑门可以对环境刺激和生物标记物做出逻辑响应。另一方面,GCDs进入靶细胞后,利用GCDs的荧光特性可以实时监测细胞内氧化还原状态的变化,为实时监测药物对肿瘤细胞的作用效果提供新途径。

关键词：细胞膜囊泡 DNA纳米技术功能核酸核酸适体靶向识别含金碳点

具有穿透及光动力治疗功能的肿瘤细胞膜囊泡的研究

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具有穿透及光动力治疗功能的肿瘤细胞膜囊泡的研究

作者：钟典西南交通大学

学位级别：硕士

目前,抗肿瘤纳米载药体系主要由有机或无机的纳米颗粒构成,对于改善抗肿瘤化疗药物疗效,降低副作用起到了很大帮助。但是人工合成的纳米材料在生物相容性方面始终有所欠缺,因此,天然来源的细胞膜所制成的纳米囊泡引起了越来越多研究者... 详细信息

目前,抗肿瘤纳米载药体系主要由有机或无机的纳米颗粒构成,对于改善抗肿瘤化疗药物疗效,降低副作用起到了很大帮助。但是人工合成的纳米材料在生物相容性方面始终有所欠缺,因此,天然来源的细胞膜所制成的纳米囊泡引起了越来越多研究者的关注。肿瘤细胞膜囊泡具有良好的生物相容性和主动靶向功能,适合作为纳米载药体系。由细胞膜制备的囊泡可以通过其与肿瘤细胞的结合将药物运输到肿瘤细胞。同时,由于细胞膜囊泡具有一定变形性,可以帮助抗肿瘤药物穿透到肿瘤深层,实现更好的抗肿瘤效果。光动力治疗是一种局部可控的非侵入性治疗肿瘤的手段,具有毒性低,普适性强等优势,尤其大多数光敏剂为疏水性物质,因此可以将肿瘤细胞膜构成的纳米载药体系与光动力疗法相结合,构建一个具有肿瘤穿透功能的纳米载体,使其在抗肿瘤的光动力治疗中发挥更好效果。在本论文中,首先合成了具有双亲性结构的大分子(甲氧基封端聚乙二醇-乙二醇化壳聚糖-原卟啉,PGP)并通过核磁共振以及红外光谱等表征了产物的结构。随后,通过PGP材料与细胞共孵育实验验证了PGP能通过亲疏水作用嵌合到细胞膜上。由于PGP与细胞膜的亲疏水相互作用,可以通过双亲性分子与细胞膜的自组装获得有PGP修饰的细胞膜,再经过膜挤出可以获得纳米级细胞膜囊泡PGPM。通过透射电子显微镜(TEM)、动态激光散射纳米粒度仪(DLS)对囊泡的形貌和结构进行表征。所制得的囊泡具有类似胶束中空结构,囊泡粒径大约为220 nm。通过流式细胞术考察PGPM囊泡上光敏剂存在情况,可以看出所制备囊泡上存在原卟啉荧光信号,阳性率高达70%以上,说明PGPM囊泡的成功制备。最后,考察了所制备双亲性分子PGP以及PGPM囊泡的细胞毒性,在非光照条件下PGP分子与PGPM囊泡均具有良好的生物相容性,说明可以用作药物传输体系。体外细胞毒性实验表明,在635 nm激光照射下,PGP分子以及PGPM囊泡都可以通过光动力治疗抑制4T1细胞的增殖,进一步采用多细胞肿瘤球模型,验证了PGPM囊泡能穿透肿瘤细胞球。这些结果表明PGPM有望用于高效治疗肿瘤。

关键词：细胞膜囊泡肿瘤穿透光动力治疗

基于细胞膜囊泡仿生药物载体的构筑及初步应用研究

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基于细胞膜囊泡仿生药物载体的构筑及初步应用研究

作者：毕成湖南大学

学位级别：硕士

仿生药物载体可为疾病的治疗提供有效途径。细胞来源的胞外囊泡(如,外泌体,微囊泡)具有良好的生物相容性和较低的免疫原性,目前已被用于肿瘤治疗、毒素清除等研究并取得了良好的治疗效果。然而,这些天然来源的囊泡存在产量少,需要繁琐... 详细信息

仿生药物载体可为疾病的治疗提供有效途径。细胞来源的胞外囊泡(如,外泌体,微囊泡)具有良好的生物相容性和较低的免疫原性,目前已被用于肿瘤治疗、毒素清除等研究并取得了良好的治疗效果。然而,这些天然来源的囊泡存在产量少,需要繁琐的分离纯化操作等问题,因而限制其应用。针对以上问题,我们课题组发展了制备细胞膜囊泡(MVs)的新方法,可在培养基中高效快速地制备性质优良的MVs,为细胞膜囊泡的生物应用奠定了研究基础。基于这些前期基础,我们探讨了细胞膜囊泡作为药物载体的可行性并对细胞膜囊泡的结构进行调控以期拓展其生物应用范围,具体内容如下:本文第二章利用MVs装载小分子疏水药物姜黄素,考察MVs作为药物载体对肿瘤细胞的治疗效果。采用简单的共孵育法,姜黄素可以有效地被装载到MVs中。利用姜黄素自身的荧光特性,我们对姜黄素的装载量和稳定性进行了考察。通过细胞毒性实验,我们发现,与单独的姜黄素对比,装载姜黄素的MVs对肿瘤细胞的杀伤效果有明显的提升,并且对多耐药性的肿瘤细胞同样显示较好的治疗效果。我们进一步考察MVs装载不同抗肿瘤药物以及采用不同细胞来源MVs作为仿生药物载体的治疗效果。结果显示不同来源的MVs均可以有效携载药物进行抗肿瘤治疗。另外,将不同的抗肿瘤药物装载到细胞膜囊泡后均可有效提高药物的治疗效果,说明利用细胞膜囊泡载药治疗肿瘤具有较好的普适性。我们对MVs作为药物载体与细胞的相互作用机制进行了探讨,初步结果显示MVs可能以膜融合方式将药物递送到肿瘤细胞中并发挥作用。本文第三章利用DNA纳米技术对纳米细胞膜囊泡(nano-MVs)进行组装和结构调控。通过挤压囊泡的方法,我们得到了大小均一的纳米细胞膜囊泡,继而设计了带有A、B两种不同arm链的DNA三棱柱,通过对p H敏感的Linker链的连接,实现了nano-MVs之间的组装与解组装。进一步通过分子自组装的方法,设计构建了不同尺寸和不同结构的纳米囊泡组装体,为基于细胞膜囊泡的多功能肿瘤治疗提供新方法。

关键词：仿生药物载体细胞膜囊泡 DNA纳米结构结构调控肿瘤治疗

杂交细胞膜纳米囊泡可增强巨噬细胞抗癌症复发和转移的免疫反应

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杂交细胞膜纳米囊泡可增强巨噬细胞抗癌症复发和转移的免疫反应

2020年全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会暨中华口腔医学...

作者：饶浪武磊刘志达熊宏刚于光涛陈洪敏孙志军傅阳心陈小元美国国立卫生研究院口腔生物医学教育部重点实验室(武汉大学)及湖北省口腔医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地美国德克萨斯大学厦门大学

研究目的:癌细胞表面表达CD47,即一种"勿吃我"的信号,它与巨噬细胞上的信号调节蛋白α(SIRPα)相互作用,以防止巨噬细胞的吞噬作用。而且,癌细胞能够分泌刺激因子,促进肿瘤相关巨噬细胞从抗肿瘤的M1表型极化为致瘤性的M2表型。因此,有... 详细信息

研究目的:癌细胞表面表达CD47,即一种"勿吃我"的信号,它与巨噬细胞上的信号调节蛋白α(SIRPα)相互作用,以防止巨噬细胞的吞噬作用。而且,癌细胞能够分泌刺激因子,促进肿瘤相关巨噬细胞从抗肿瘤的M1表型极化为致瘤性的M2表型。因此,有效的激活巨噬细胞以达到抗肿瘤免疫效应是有希望的,但是仍然具有挑战性。

关键词：纳米技术癌症免疫疗法细胞膜囊泡基因编辑

来源： cnki会议评论

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核酸调控蛋白相分离行为及其作用机制初探

核酸调控蛋白相分离行为及其作用机制初探

作者：刘学娇湖南大学

学位级别：硕士

细胞中蛋白质、核酸等生物分子可以通过多价相互作用发生液-液相分离,从而提供一种特定的方式让细胞内的特定生物分子发生聚集,形成生物分子凝聚体或者无膜细胞器。这些生物分子凝聚体以及无膜细胞器参与细胞内多种生物过程,在大分子结... 详细信息

细胞中蛋白质、核酸等生物分子可以通过多价相互作用发生液-液相分离,从而提供一种特定的方式让细胞内的特定生物分子发生聚集,形成生物分子凝聚体或者无膜细胞器。这些生物分子凝聚体以及无膜细胞器参与细胞内多种生物过程,在大分子结构组装、功能调控、信号转导等生命活动中发挥重要作用。蛋白质和核酸是参与细胞内液-液相分离的重要组分,其中,核酸在调控生物分子凝聚体的性质中具有重要作用。核酸分子二级结构和序列会影响生物分子凝聚体的结构和性质,进而调控生物分子凝聚体的生物学功能,然而,核酸序列或结构对蛋白相分离的调控规律尚不明确。基于上述研究现状,结合我们课题组在细胞膜囊泡方面的研究基础,我们探索开发基于细胞膜囊泡的细胞仿生模型用于研究核酸调控蛋白相分离,并对核酸与蛋白相互作用机制进行了初步探讨,研究内容如下:（1）开发基于细胞膜囊泡的细胞仿生模型用于研究核酸调控蛋白相分离。目前,利用纯化的蛋白和核酸可以在溶液环境中研究生物分子相分离。虽然这种简化的溶液体系易于表征,但它缺乏类似细胞内部的拥挤环境和限域效应,其研究结果不易类推到复杂的细胞中。我们利用从细胞中提取的细胞膜囊泡为细胞仿生模型,研究核酸的结构和序列对其结合蛋白相分离的影响,结果发现平行G-四链体结构核酸促进细胞膜囊泡内结合蛋白发生相分离。进一步研究发现这种核酸调控的蛋白相分离具有温度依赖的特点,当温度降低时,相分离现象消失,且该相分离行为具有可逆响应温度变化的特点。该工作显示细胞膜囊泡可以作为一种新的仿生模型用于研究核酸调控蛋白相分离,为研究核酸/蛋白相分离提供新途径。（2）初步探讨核酸调控蛋白相分离的作用机制。在课题组前期工作中,我们鉴定了一种核酸结合蛋白SERBP1,这种蛋白可以特异性地与平行G-四链体结构核酸结合。借助蛋白序列分析软件,我们对SERBP1蛋白序列特征进行分析,发现这种蛋白具有典型相分离的多肽序列。其中,蛋白含有的Prion-like结构域是蛋白温度依赖的相分离的潜在因素;蛋白含有的RGG序列是SERBP1蛋白与平行G-四链体结构核酸结合的潜在因素。利用体外纯化的蛋白以及合成的多肽序列,结合常规生化实验技术方法,我们证实SERBP1蛋白为相分离蛋白,并且平行G-四链体结构核酸促进该蛋白的相分离,该工作可为研究SERBP1蛋白的生物学功能调控途径以及核酸调控蛋白相分离的生物学机制提供新思路。

关键词：细胞膜囊泡液-液相分离核酸蛋白生物分子凝聚体