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纳米Ag-SiO_2聚氨酯的体外细胞毒性评价

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中国组织工程研究 2013年第3期17卷 392-399页

作者：杨六成徐帅李师思吴凯王键俊南方医科大学珠江医院普通外科广东省广州市510282 南方医科大学珠江医院核医学科广东省广州市51028

背景:为改善聚氨酯材料的抗菌性能,前期研究中合成了纳米Ag-SiO2聚氨酯材料。目的:比较7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料的体外细胞毒性。方法:将纳米Ag-SiO2与聚氨酯以熔融共混方式制备成含纳米Ag-SiO2,质量分数分别为0,0.5%,1.... 详细信息

背景:为改善聚氨酯材料的抗菌性能,前期研究中合成了纳米Ag-SiO2聚氨酯材料。目的:比较7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料的体外细胞毒性。方法:将纳米Ag-SiO2与聚氨酯以熔融共混方式制备成含纳米Ag-SiO2,质量分数分别为0,0.5%,1.0%,1.5%,2.0%,2.5%,5.0%的聚氨酯材料。以上述7种聚氨酯材料浸提液、高密度聚乙烯浸提液(阴性对照)、0.1%苯酚液浸提液(阳性对照)分别培养L929细胞24,48,72h后,并设置试剂对照(含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基)和空白对照(不加细胞,只加含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基)。采用MTT比色法定量检测各组细胞相对增殖率,并进行毒性反应分级;同时在显微镜下观察细胞形态。结果与结论:7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料组、试剂对照组、阴性对照组细胞贴壁良好,形态正常,胞体丰满,胞质、核质分布均匀,细胞相对增殖率均大于80%,毒性反应分级均为1级,且随着纳米Ag-SiO2质量分数的降低,体外细胞毒性渐小、生物相容性更好。随培养时间延长,阳性对照组细胞相对增殖率逐渐降低,72h后细胞相对增殖率降至8.7%,与其他组比较差异有显著性意义(P细胞萎缩、变圆、漂浮、片状脱落。表明7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料均具有良好的体外细胞相容性,毒性反应分级均为1级,符合医用材料体外实验要求。

关键词：生物材料纳米生物材料纳米Ag-SiO_2 聚氨酯体外 L929细胞细胞相对增殖率细胞毒性抗菌性能 MTT比色法省级基金生物材料图片文章

TLN-58和hLYZ基因融合表达载体的构建及其细胞毒性研究

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畜牧与兽医 2021年第3期53卷 52-58页

作者：王小月李丹蓝肇煜武静桥范真玮姚景丽何敬文赵微陈婷金天明天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384

为了评价融合表达抗菌肽TLN-58和人溶菌酶hLYZ双基因重组表达质粒的安全性,试验采用基因重组法将TLN-58和hLYZ基因片段克隆至pEGFP-N1载体,利用转染试剂GeneTwin^(TW)将构建好的重组质粒转染HEK293细胞,RT-PCR验证重组真核质粒在细胞中... 详细信息

为了评价融合表达抗菌肽TLN-58和人溶菌酶hLYZ双基因重组表达质粒的安全性,试验采用基因重组法将TLN-58和hLYZ基因片段克隆至pEGFP-N1载体,利用转染试剂GeneTwin^(TW)将构建好的重组质粒转染HEK293细胞,RT-PCR验证重组真核质粒在细胞中表达情况;通过DAPI染色、AO/EB染色、CCK-8检测法和流式细胞术测定并分析hLYZ和TLN-58融合基因表达产物的细胞毒性。结果表明:成功构建重组真核质粒pEGFP-N1-hLYZ-TLN-58,当重组质粒DNA用量为1μg且GeneTwin^(TW)转染试剂用量为3μL时,转染HEK293细胞24 h,为最佳转染条件,重组质粒可成功表达目的基因;DAPI染色和AO/EB染色显示,转染pEGFP-N1-hLYZ-TLN-58质粒组细胞凋亡与对照组相比,无显著性差异;CCK-8试验测定细胞相对增殖率(RGR)为50%~74%,显示重组质粒的细胞毒性较小;流式细胞术检测发现重组质粒转染细胞与对照组细胞在G1、G2和S期所占的比例均差异不显著。结果表明,重组质粒的细胞毒性较小且对细胞周期无显著影响,为抗菌肽TLN-58和hLYZ的安全性及抗菌应用奠定了研究基础。

关键词： TLN-58基因 hLYZ基因融合表达细胞相对增殖率细胞毒性

4种自粘接树脂水门汀对牙周膜成纤维细胞增殖的影响

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福建医科大学学报 2022年第4期56卷 361-367页

作者：罗岚卢巧乔陈成新郑馨回刘世震赵伟福建医科大学附属口腔医院牙周科福州350002 福建省高校口腔医学重点实验室福州350004 福建医科大学附属口腔医院种植科福州350002

目的比较4种自粘接树脂水门汀对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)增殖的影响。方法将4种自粘接树脂水门汀试件(RelyX Unicem、SAC、Duo-Link和PermaCem)分别浸泡1、3、5、7 d,取浸提液培养HPDLFs 48 h,采用CCK-8法测定培养液的光密度(OD),计... 详细信息

目的比较4种自粘接树脂水门汀对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)增殖的影响。方法将4种自粘接树脂水门汀试件(RelyX Unicem、SAC、Duo-Link和PermaCem)分别浸泡1、3、5、7 d,取浸提液培养HPDLFs 48 h,采用CCK-8法测定培养液的光密度(OD),计算细胞相对增殖率(RGR),并结合镜下细胞形态学分析。比较分析在4种自粘接树脂水门汀浸提液的作用下HPDLFs的RGR差异。结果4种自粘接树脂水门汀1 d的浸提液对HPDLFs增殖均无抑制作用,毒性分级为0级。浸提3 d时,Unicem组、SAC组和Duo-Link组抑制细胞增殖,表现为轻中度细胞毒性,其中Unicem组毒性分级为3级、SAC组和Duo-Link组毒性分级为2级。浸提5 d时,除了SAC组为毒性2级,其余3组对细胞均无毒性。光镜下观察细胞形态未见明显异常。随浸泡时间的延长,毒性分级逐渐降低,浸提7 d的树脂水门汀均无细胞毒性。PermaCem组浸泡1、3、5、7 d均对细胞无毒性。结论4种自粘接树脂水门汀浸提液对HPDLFs增殖的抑制作用均表现为3 d达到最强,7 d趋于无细胞毒性、细胞增殖恢复正常。4种水门汀均是良好的可供选择的粘接剂,而PermaCem的生物相容性更好些。

关键词：自粘接树脂水门汀人牙周膜成纤维细胞细胞相对增殖率

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紫芸解毒止痛酊中红花的质量控制及其促骨髓间充质干细胞增殖的作用

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华西药学杂志 2019年第5期34卷 453-457页

作者：韦乐华王思怡敖智广豆荣昆向飞丹州茆灿泉西南交通大学生命科学与工程学院四川成都610031 云南普洱丹州制药股份有限公司云南宁洱665199

目的对紫芸解毒止痛酊(ZYD)中的关键药材红花进行DNA条形码和HPLC化学质量控制,并探究羟基红花黄色素A(HSYA)在促骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖中的作用。方法采用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材红花并分析其与近缘物种的序列差异;HPL... 详细信息

目的对紫芸解毒止痛酊(ZYD)中的关键药材红花进行DNA条形码和HPLC化学质量控制,并探究羟基红花黄色素A(HSYA)在促骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖中的作用。方法采用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材红花并分析其与近缘物种的序列差异;HPLC法测定5个批次的ZYD中HSYA的含量;CCK-8法测定BMSCs的细胞相对增殖率。结果 ZYD中红花的ITS2序列与NCBI数据库结果一致,系统进化树构建后发现其与近缘物种各自聚类成分支;5个批次的HSYA含量分别为23. 72±0. 44、24. 49±0. 15、25. 23±0. 51、23. 52±0. 21、23. 44±0. 42μg·m L^-1(n=6),RSD分别为1. 87%、0. 65%、2. 06%、0. 89%、1. 82%;与对照组比较,CCK-8法检测到ZYD、HSYA、红花提取液(HH)组分处理BMSCs 48 h后细胞的相对增殖率均大于100%,有显著促进细胞增殖的作用。结论 ITS2 DNA条形码和HSYA可作为ZYD中关键药材红花质量控制的重要指标,ZYD、HH的促BMSCs细胞增殖作用与HSYA的成分功效有关。

关键词：紫芸解毒止痛酊红花羟基红花黄色素A ITS2 骨髓间充质干细胞 DNA条形码质量控制高效液相色谱法 CCK-8法细胞相对增殖率

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四种输血袋簿膜的体外细胞毒性

环境与职业医学 1991年第4期15卷 28-29页

作者：钱震斌钟宝珍上海市劳动卫生职业病研究所毒理室

输血袋是日前主要的血液保存容器,一般为高分子材料组成。而近年来,由于高分子材料在医学上的应用日益发展,其安全问题已受到毒理学家的普遍关注。因此,不少国家已制定了医用材料和装置的生物学性能评价实施标准,但基于目前对材料与人... 详细信息

输血袋是日前主要的血液保存容器,一般为高分子材料组成。而近年来,由于高分子材料在医学上的应用日益发展,其安全问题已受到毒理学家的普遍关注。因此,不少国家已制定了医用材料和装置的生物学性能评价实施标准,但基于目前对材料与人体各组织间的相互作用机理尚了解不多,体外实验或动物模拟结果与人群应用效应间的相关性关系不清等问题,因此,本实验以人淋巴细胞体外培养方法来研究直接接触血液的四种输血袋薄膜材料的细胞毒性,以测试其安全使用的可靠性。

关键词：体外细胞毒性生物学性能医用材料体外培养方法高分子材料细胞相对增殖率人淋巴细胞薄膜材料相互作用机理医用生物材料

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杭白菊水提物对猫肾细胞(F81)的影响

中兽医医药杂志 2020年第4期39卷 51-54页

作者：刘博陈―融许―久陈―凯王米中国农业科学院上海兽医研究所/农业农村部兽用化学药物及制剂学重点实验室上海200241 长江大学湖北荆州434023 上海比瑞吉宠物用品股份有限公司上海200540

研究菊花水提物对猫肾细胞(F81)的影响。制备杭白菊水提物,采用MTT法检测菊花水提物对F81的形态和增值的影响,用不同浓度的菊花水提物(分别为0 mg/mL,3.910×10^-3 mg/mL,7.810×10^-3 mg/mL,1.563×10^-2 mg/mL,3.125×10^-2 mg/mL,6.... 详细信息

研究菊花水提物对猫肾细胞(F81)的影响。制备杭白菊水提物,采用MTT法检测菊花水提物对F81的形态和增值的影响,用不同浓度的菊花水提物(分别为0 mg/mL,3.910×10^-3 mg/mL,7.810×10^-3 mg/mL,1.563×10^-2 mg/mL,3.125×10^-2 mg/mL,6.250×10^-2 mg/mL)于6孔板中处理对数生长期F81细胞,后使用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率。结果发现,菊花水提液组和对照组相比,细胞外观无明显改变,两者的细胞相对增值率基本一致,并且二者细胞周期、凋亡率的测试结果在统计学上无差异。说明菊花水提物对F81细胞的增殖无抑制作用,对细胞的形态无影响,并且对细胞的周期、凋亡率也无影响,菊花水提物在合理的剂量范围对F81细胞无影响,是安全的。

关键词：菊花水提物细胞相对增殖率细胞周期细胞凋亡