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马来酸酐改性聚乳酸对成骨细胞黏附、增殖和分化的研究

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生物医学工程学杂志 2011年第4期28卷 753-757页

作者：向燕王远亮罗彦凤张兵兵辛娟郑丹芳重庆大学生物工程学院生物材料与仿生工程研究中心重庆400044 重庆大学生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆400044

通过研究马来酸酐改性聚乳酸(MPLA)和聚乳酸(PDLLA)材料表面对MC3T3-E1成骨细胞形态、黏附、增殖、细胞总蛋白含量、碱性磷酸酶活性及细胞分泌无机钙含量的影响,评价MPLA和PDLLA材料的细胞相容性。结果显示:与PDLLA相比,MPLA材料上的成... 详细信息

通过研究马来酸酐改性聚乳酸(MPLA)和聚乳酸(PDLLA)材料表面对MC3T3-E1成骨细胞形态、黏附、增殖、细胞总蛋白含量、碱性磷酸酶活性及细胞分泌无机钙含量的影响,评价MPLA和PDLLA材料的细胞相容性。结果显示:与PDLLA相比,MPLA材料上的成骨细胞完全黏附和充分铺展;MPLA材料上细胞的增殖速率、细胞总蛋白含量、细胞碱性磷酸酶活性及细胞分泌的无机钙含量都显著高于PDLLA(P细胞的黏附、铺展、增殖及蛋白质的合成,并能促进成骨细胞的分化和矿化,与PDLLA材料相比具有更好的细胞相容性。

关键词：聚乳酸马来酸酐改性聚乳酸细胞生物相容性成骨细胞

壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能、抗菌性能及生物相容性的实验研究

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壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能、抗菌性能及生物相容性的实验...

作者：周敏南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景引导性骨再生（guided bone regeneration, GBR）膜具有屏障的作用,通过将骨引导性的基质保持在缺损区,屏蔽成纤维细胞等非成骨性细胞长入缺损区,允许骨组织在膜下空间内再生,从而减少移植骨骨量的丢失。胶原膜具有良好的... 详细信息

研究背景引导性骨再生（guided bone regeneration, GBR）膜具有屏障的作用,通过将骨引导性的基质保持在缺损区,屏蔽成纤维细胞等非成骨性细胞长入缺损区,允许骨组织在膜下空间内再生,从而减少移植骨骨量的丢失。胶原膜具有良好的生物相容性、可降解性、能够促进细胞的粘附和增殖的特点,作为引导性骨再生膜在临床上已被广泛应用。但纯胶原蛋白膜存在机械性能差、降解快、抗水性能差、不能与组织生长速度很好地匹配等问题。壳聚糖是一种可降解的天然聚阳离子生物多糖,降解产物为氨基葡萄糖等小分子,对人体无毒、无刺激,有较好的组织相容性。同时壳聚糖分子带正电荷,通过和细菌细胞膜上负电荷的相互作用,干扰细菌细胞膜功能,达到抗菌作用。本实验将Ⅰ型胶原与壳聚糖交联复合,制备具有良好力学强度、良好生物相容性及抗菌性能的引导骨再生膜修复材料,以改善胶原作为引导骨再生膜存在的不足。同时针对GBR术后存在软组织瓣裂开、膜暴露、感染等问题,通过在胶原中加入壳聚糖,使屏障膜具有抗菌性能,以减少膜暴露引起的感染,在促进成骨的同时,促进软组织的愈合,提高GBR手术的成功率。本实验使用提纯的牛肌腱Ⅰ型胶原（collagen, COL）和脱乙酰度85%的壳聚糖（chitosan, CS）,按质量比为（COL:CS=3:1）制作壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜。将其与纯牛肌腱Ⅰ型胶原膜对比,检测其理化性能,并在两组膜上接种成纤维细胞和MG63成骨细胞,观察两组膜上所接种的细胞在膜表面的增殖情况,对壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能和生物相容性进行初步研究。同时对其进行抗菌性能检测,评估壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的抗菌作用,为其应用于引导性骨再生膜提供参考。目的制备壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜并研究其理化性能,检测其与成纤维细胞和MG63成骨细胞的生物相容性,以初步探讨壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜应用作为引导性骨再生屏障膜的可行性,同时对其进行抗菌性能检测,评估壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的抗菌能力,从而为其应用于引导性骨再生提供参考。材料和方法 1.采用提纯的牛肌腱Ⅰ型胶原和壳聚糖,通过冷冻干燥法,使用热交联、化学交联技术制备壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜（实验组）和Ⅰ型胶原膜（对照组）。采用氨基酸含量分析、差示量热扫描法分析对牛肌腱Ⅰ型胶原性质和表征进行分析。通过红外光谱分析、扫描电镜分析、吸水率测试以及材料力学性能测试,检测实验组和对照组的理化性能。 2.0.5cm×0.5cm大小的实验组和对照组膜各20张,分别置于48孔板内,接种人牙龈成纤维细胞于孔板内培养,接种密度每孔5×104个,分别于1d、3d、5d、7d每组各取出5张膜,置于新48孔板中,每孔加入培养液200ml和MTS试剂40ml,孵育3.5h,测吸光度值（OD）,比较两组膜上粘附的人牙龈成纤维细胞增殖水平。 3.1.0cm×1.0cm大小的实验组和对照组膜各12张,分别置于24孔板内,接种成骨肉瘤细胞系MG63于孔板内培养,接种密度每孔5×104个,分别于1d、3d、5d、7d每组各取出3张膜,置于新24孔板中,每孔加入培养液500ml和MTS试剂100ml,孵育3.5h,测吸光度值（OD）,比较两组膜上粘附的MG63成骨细胞增殖水平。 4.人牙龈成纤维细胞接种于两组膜表面,接种后8h、1d、3d行生物材料扫描前处理之后,在扫描电镜（SEM）下观测细胞粘附、伸展及分化的形态变化。 5.成骨肉瘤细胞系MG63接种于两组膜表面,接种后4h及1d行生物材料扫描前处理之后,在SEM下观测细胞粘附、伸展及分化的形态变化。 6.实验组膜和对照组膜（10cm×1.0cm）,每菌种每组各取3张膜,采用振荡法对两组膜行牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌杆菌抗菌性能检测,平板计数法计数菌落回收数。 7.实验组膜和对照组膜（1.0cm×1.0cm）分别在3×108CFU/mL的牙龈卟啉单胞菌菌悬液和伴放线放线杆菌菌悬液培养24h,SEM观察细菌粘附膜表面情况。 8.以上统计学方法采用SPSS13.0统计分析软件,析因方差分析处理组和时间有无交互效应,多个样本均数比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）,两个样本均数比较采用独立样本t检验比较,Levene’test检验方差是否齐性,方差齐则采用LSD样本均数间的两两比较,方差不齐则采用近似F检验的Melch法或Brown-Forsythe法进行方差分析后,Dunnett’s T3多重比较。假设检验为双侧检验,检验标准0.05,P＜0.05时差异有统计学意义。实验结果 1.胶原氨基酸组成分析、差示量热扫描法分析结果表明牛肌腱Ⅰ型胶原的胶原3股螺旋结构是保持较完整,成分比例及性质表征符合Ⅰ型胶原的要求。红外光谱结果表明实验组具备了胶原和壳聚糖特征峰表现,并且两种材

关键词：壳聚糖 Ⅰ型胶原复合膜抗菌性能细胞生物相容性

壳聚糖温敏凝胶引导组织再生膜的制备及其细胞生物相容性

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山东大学学报（医学版） 2011年第6期49卷 80-83,88页

作者：梁杰崔军孙康宁徐欣山东大学口腔医学院口腔种植中心济南250012 山东大学材料科学与工程学院济南250061 山东省口腔生物医学重点实验室济南250012

目的制备壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)膜,通过体外细胞培养评价新型引导组织再生膜的细胞生物相容性。方法利用CS/β-GP体系的温敏相转变特性,通过分子自组装技术合成温敏凝胶膜,采用红外光谱分析、扫描电镜、拉伸强度实验进行结构... 详细信息

目的制备壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)膜,通过体外细胞培养评价新型引导组织再生膜的细胞生物相容性。方法利用CS/β-GP体系的温敏相转变特性,通过分子自组装技术合成温敏凝胶膜,采用红外光谱分析、扫描电镜、拉伸强度实验进行结构和力学测试。通过MTT比色法对体外培养的小鼠成纤维细胞L929生长及增殖情况进行初步评价,共分3组进行对比研究:实验A组(2%CS+0.5 gβ-GP)、实验B组(2%CS+1.0 gβ-GP)及空白对照组。结果红外光谱分析提示,壳聚糖与β-甘油磷酸钠分子间存在静电作用和化学键结合,形成新的化合物;扫描电镜观察,壳聚糖/β-甘油磷酸钠膜具有多孔的表面结构和内部结构;L929细胞体外培养第3、4、5天,实验组与空白对照组吸光度(A)值组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶具有良好的成膜性,能促进成纤维细胞的体外增殖,是一种有应用前景的新型引导组织再生膜材料。

关键词：壳聚糖 β-甘油磷酸钠引导组织再生膜温敏凝胶细胞生物相容性

纯钛阳极氧化-植酸-载铜膜层的细胞相容性与抗菌性研究

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医学理论与实践 2018年第10期31卷 1405-1408页

作者：马春秀刘继光张慧明焦玉凤杨东红吕晓云李慕勤佳木斯大学附属第二医院黑龙江省佳木斯市154002 佳木斯大学黑龙江省高校生物医学材料重点实验室

目的:针对钛种植体植入后组织感染问题,在纯钛阳极氧化-植酸处理工艺基础上,引入具有抗菌性的铜元素,探究不同镀铜含量涂层的细胞相容性以及对抗菌性能的影响。方法:纯钛表面两步法阳极氧化、植酸及化学镀铜制备涂层,通过SEM及元素分析... 详细信息

目的:针对钛种植体植入后组织感染问题,在纯钛阳极氧化-植酸处理工艺基础上,引入具有抗菌性的铜元素,探究不同镀铜含量涂层的细胞相容性以及对抗菌性能的影响。方法:纯钛表面两步法阳极氧化、植酸及化学镀铜制备涂层,通过SEM及元素分析,激光共聚焦显微镜和CCK-8实验检测各组涂层成骨细胞的细胞活性,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法检测抗菌性。结果:随着镀铜时间的增加铜含量增多,涂层微孔孔隙变小变少,涂层表面愈加致密。各组均有利于成骨细胞生长,无细胞毒性,载铜后各组试件表面细胞伸展均较好,其中镀铜时间6min的Cu3组细胞整体伸展最好;载铜后涂层具有抗菌性,随着镀铜含量的增加,其中Cu3组抗菌率达86%,明显优于其他组。结论:纯钛阳极氧化-植酸-低载铜复合膜层具有良好的细胞相容性,抗菌能力随着铜含量的增多而增强,涂层表面含铜量为1.2wt%,具有较强抗菌能力。

关键词：纯钛阳极氧化载铜抗菌性细胞生物相容性

小肠黏膜下层组织与雪旺细胞生物相容性的体外研究

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中华外科杂志 2006年第24期44卷 1713-1714页

作者：苏琰张长青张开刚曾炳芳上海交通大学附属第六人民医院骨科 200233

运用组织工程技术研究可替代自体神经移植的人工神经是近年研究的热点.小肠黏膜下层(small intestinal submucosa, SIS)作为支架材料在修复组织缺损的实验研究中已取得令人满意的效果,具有非常良好的应用前景[1]。

关键词：细胞生物相容性小肠黏膜下层组织工程技术体外研究自体神经移植体外分离培养人工神经实验研究

生物材料的细胞生物相容性评价方法的研究进展

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中国医疗器械信息 2011年第9期17卷 10-14,21页

作者：林红赛王春仁王志杰张华中国食品药品检定研究院北京100050 华南理工大学生物医学工程研究院广州510640 苏州大学基础医学院苏州215021

细胞生物相容性评价是生物材料临床应用前必须检测的项目,目前的评价方法主要以细胞毒性试验法为主,国内外标准就细胞毒性试验已有具体的试验原则和试验方法。随着现代细胞生物学和分子生物学技术的进步,细胞毒性评价出现了一些国内外... 详细信息

细胞生物相容性评价是生物材料临床应用前必须检测的项目,目前的评价方法主要以细胞毒性试验法为主,国内外标准就细胞毒性试验已有具体的试验原则和试验方法。随着现代细胞生物学和分子生物学技术的进步,细胞毒性评价出现了一些国内外标准尚未收录的新的评价指标和评价方法,本文主要综合常用的评价指标和评价方法及其发展现状作一综述。

关键词：细胞生物相容性试验方法毒性机制

壳聚糖复合材料及其细胞生物相容性的研究进展

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中国美容医学 2012年第8期21卷 1457-1459页

作者：陈怡霏徐幸赵子维栾兆辉梅强(综述) 陈卫军(审校) 第三军医大学学员旅四队重庆400038 第三军医大学基础部解剖教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038

壳聚糖（chitosan，CTS）作为甲壳素脱乙酞氨基后的一种产物，又称为脱乙酞甲壳素，是纤维素以外第二大最丰富的天然高分子化合物“]。壳聚糖具有抗微生物、调节血脂、增强机体免疫能力以及抑制肿瘤等生物活性。由于壳聚糖与机体内的氨... 详细信息

壳聚糖（chitosan，CTS）作为甲壳素脱乙酞氨基后的一种产物，又称为脱乙酞甲壳素，是纤维素以外第二大最丰富的天然高分子化合物“]。壳聚糖具有抗微生物、调节血脂、增强机体免疫能力以及抑制肿瘤等生物活性。由于壳聚糖与机体内的氨基葡萄糖类具有相似结构，类似于人体骨胶原组织，而且具有无毒害、良好的生物相容性等特点，在骨组织工程的应用和研究中发展迅速，现针对壳聚糖及其衍生物的生物相容性综述如下。

关键词：细胞生物相容性壳聚糖复合材料高分子化合物机体免疫能力骨组织工程抗微生物调节血脂

胶原蛋白—几丁聚糖三维骨架构建组织工程血管的可行性

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上海第二医科大学学报 2005年第9期25卷 901-905页

作者：陈兵张建李建新张柏根首都医科大学宣武医院血管外科北京100053 上海第二医科大学仁济医院血管外科

目的研究胶原蛋白—几丁聚糖构建的三维支架在血管组织工程研究中的可行性。方法以I型胶原蛋白和几丁聚糖为生物材料,体外预构具有三维结构的支架,观察支架的空间立体结构;将培养的种子细胞(人平滑肌细胞和纤维细胞)种植于支架,观察材... 详细信息

目的研究胶原蛋白—几丁聚糖构建的三维支架在血管组织工程研究中的可行性。方法以I型胶原蛋白和几丁聚糖为生物材料,体外预构具有三维结构的支架,观察支架的空间立体结构;将培养的种子细胞(人平滑肌细胞和纤维细胞)种植于支架,观察材料与细胞的生物相容性和抗收缩性,并测定材料中DNA含量和胶原蛋白含量。结果应用相分离技术制备的支架,具有均匀的三维结构和丰富的交通孔,种植种子细胞后可以形成良好的细胞黏附和生长,且选用的支架材料可以抵抗细胞收缩引起的材料变形;培养2、4、6周的材料中,DNA含量和胶原蛋白含量随培养时间延长而明显增加。结论构建的胶原蛋白—几丁聚糖三维支架具有结构均匀、细胞生物相容性好的特点,并具有一定的物理强度,可以应用于血管组织工程研究。

关键词：组织工程胶原蛋白几丁聚糖三维支架细胞生物相容性

聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙的细胞生物相容性研究

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中国临床康复 2003年第6期7卷 907-908,T001页

作者：孙梁胡蕴玉熊卓潘屿解放军第四军医大学西京医院骨科陕西省西安市710032 解放军白求恩国际和平医院放射科河北省石家庄市050081

目的:采用骨髓基质细胞检测聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙(PLGATCP)材料的细胞生物相容性,筛选细胞组织工程的载体材料。方法:利用骨髓基质细胞在体外接种于PLGA/TCP材料,并与PLGA/TCP材料浸提液共培养,进行形态学观察、细胞增殖及酶学检测... 详细信息

目的:采用骨髓基质细胞检测聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙(PLGATCP)材料的细胞生物相容性,筛选细胞组织工程的载体材料。方法:利用骨髓基质细胞在体外接种于PLGA/TCP材料,并与PLGA/TCP材料浸提液共培养,进行形态学观察、细胞增殖及酶学检测。结果:骨髓基质细胞能在PLGA/TCP材料上贴附、繁殖,其生长及功能不受影响。结论PLGA/TCP材料具有良好的细胞生物相容性,能作为细胞组织工程种子细胞的载体材料。

关键词：聚乳酸聚羟乙酸磷酸三钙细胞生物相容性研究生物医学工程