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丙型肝炎病毒核心区多肽对细胞毒t细胞的作用

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中华肝脏病杂志 2002年第6期10卷 426-428页

作者：马巧玉王宇明郝飞第三军医大学西南医院感染病科重庆400038

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者体内细胞毒t细胞(CtL)功能缺陷的原因。方法将HCV核心区多肽皮下注射免疫BALB/c小鼠,用乳酸脱氢酶释放实验检测小鼠脾细胞CtL活性。选择上述多肽中对CtL有抑制作用和增强作用的多肽各2条,交叉组合后... 详细信息

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者体内细胞毒t细胞(CtL)功能缺陷的原因。方法将HCV核心区多肽皮下注射免疫BALB/c小鼠,用乳酸脱氢酶释放实验检测小鼠脾细胞CtL活性。选择上述多肽中对CtL有抑制作用和增强作用的多肽各2条,交叉组合后共同免疫BALB/c小鼠检测其CtL活性。结果经单因素方差分析显示,HCV核心区多肽CPA9(39～74位氨基酸)、CPB7(67-76位氨基酸)、CPB8(71-80位氨基酸)对小鼠CtL有抑制作用,CPA10(5-23位氨基酸)、CPB6(63-72位氨基酸)、CPB2(13-140位氨基酸)对小鼠CtL有增强作用。CPB2+CPB8、CPB6+CPB8组中效靶比10:1,20:1的CtL活性显著高于对照组,CPB2+CPB7、CPB6+CPB7组与对照组无明显差异,双因素方差分析显示HCV核心区抑制性多肽和增强性多肽有交互作用。结论HCV核心区多肽CPA9、CPB7、CPB8对小鼠CtL有抑制作用,CPA10、CPB6、CPB2对小鼠CtL有增强作用;HCV核心区抑制性和增强性多肽有交互作用。

关键词：丙型肝炎病毒核心区多肽细胞毒性t细胞动物实验

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非细胞毒性清除乙型肝炎病毒机制的研究

国际流行病学传染病学杂志 2006年第2期33卷 96-99页

作者：李志群朱思和李志恒成军马英骥北京地坛医院传染病研究所哈尔滨医科大学附属第一临床医院传染科 150001 哈尔滨市胸科医院 150001

乙型肝炎发病机制主要是机体清除HBV而引发的细胞免疫病理损伤,涉及到病毒和机体两方面因素,而非细胞毒性机制在清除HBV中发挥主要作用。

关键词：细胞因子乙型肝炎病毒细胞毒性t细胞

EB病毒相关性噬血细胞综合征患儿的临床特征分析

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中国临床实用医学 2022年第6期13卷 62-64页

作者：唐丽刘小乖李瑞娜彭晓康刘攀刘希王策西安市儿童医院感染三科西安710003

目的探讨儿童EB病毒相关性噬血细胞综合征(EBV-HLH)的临床特点,为其诊疗提供思路。方法本研究为回顾性病例分析,选取西安市儿童医院感染三科2015年1月至2021年12月收治的30例EBV-HLH患儿,男15例,女15例,年龄(3.5±2.6)岁,年龄范围为8.9... 详细信息

目的探讨儿童EB病毒相关性噬血细胞综合征(EBV-HLH)的临床特点,为其诊疗提供思路。方法本研究为回顾性病例分析,选取西安市儿童医院感染三科2015年1月至2021年12月收治的30例EBV-HLH患儿,男15例,女15例,年龄(3.5±2.6)岁,年龄范围为8.9个月至~11.1岁,记录所有患儿临床表现、辅助检查及早期预后情况。结果所有患儿体温波动于38.5~40.2℃,热程3 d至1个月。在病程中,83.3% 。结论患儿EBV-HLH进展快、预后差,病情严重程度不一,目前尚无统一的治疗方案,需进一步探索个体化治疗。

关键词： EB病毒感染相关嗜血细胞综合征细胞毒性t细胞潜伏膜蛋白-1 地塞米松

DNA疫苗激活CtL反应机制及增强DNA疫苗效力的研究进展

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生物医学工程学杂志 2003年第1期20卷 175-179页

作者：邓小玲四川大学华西医学中心基础与法医学院免疫教研室

DNA疫苗相对于以前的疫苗免疫策略有着强大的优势 ,但仍有许多问题待解决 ,尤其是采用哪些有效的方法来增强 DNA免疫的效果 ,是目前研究关注的热点。本文就近年来 DNA疫苗研究中所采用的增强免疫效力的策略作了综述 ,并就 DNA免疫激活 CtL

关键词： DNA疫苗 CtL反应机制细胞毒性t细胞免疫效力

MUC1/Y基因修饰的树突状细胞体外抗卵巢癌效应的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第6期25卷 471-475页

作者：祁澜孔北华杨美香曲迅山东大学齐鲁医院妇产科济南250012 山东大学齐鲁医院临床基础研究所

目的研究人MUC1/Y基因转染人外周血树突状细胞(DC)后在体外诱导的特异性抗MUC1/Y+卵巢癌效应。方法通过人外周血单核细胞诱导DC,采用脂质体法将已构建好的含人MUC1/Y全长cDNA的真核表达载体pEGFPN1/MUC1/Y转染到DC中,荧光显微镜下观察... 详细信息

目的研究人MUC1/Y基因转染人外周血树突状细胞(DC)后在体外诱导的特异性抗MUC1/Y+卵巢癌效应。方法通过人外周血单核细胞诱导DC,采用脂质体法将已构建好的含人MUC1/Y全长cDNA的真核表达载体pEGFPN1/MUC1/Y转染到DC中,荧光显微镜下观察其表达的蛋白定位;与自体t细胞共培养,观察其致敏的细胞毒性t淋巴细胞(CtL)对MUC1/Y+的卵巢癌细胞A2780的杀伤活性,并与转染空载体的DC诱导的CtL进行比较。结果pEGFPN1/MUC1/Y转染DC后,其绿色荧光蛋白主要表达于DC细胞膜上,可诱导出对卵巢癌细胞系A2780特异性的细胞毒性t细胞。结论MUC1/Y基因修饰的DC可诱导特异的抗MUC1/Y+卵巢癌效应。

关键词： MUC1/Y 基因修饰抗卵巢癌效应人外周血树突状细胞细胞毒性t淋巴细胞 MUC1/Y 细胞毒性t细胞 A2780 真核表达载体全长cDNA 显微镜下观察卵巢癌细胞系细胞共培养体外诱导基因转染细胞诱导脂质体法蛋白定位杀伤活性

重组人热休克蛋白70-抗原肽复合物对肿瘤的免疫治疗作用研究

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中国肿瘤临床 2008年第5期35卷 285-289页

作者：马杰蒋春晓焦平陈月耿学军颜炜群吉林大学药学院生物工程中心生物工程教研室长春市130021

目的:使用以毕赤酵母X-33为宿主菌,重组表达制备的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外结合形成复合物,探讨其在肿瘤免疫治疗中的有效性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与纯化的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BA... 详细信息

目的:使用以毕赤酵母X-33为宿主菌,重组表达制备的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外结合形成复合物,探讨其在肿瘤免疫治疗中的有效性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与纯化的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,通过ELISPOt和颗粒酶释放法,检测该复合物诱导特异性CtL的能力。通过检测小鼠体内肿瘤的生长情况和肿瘤的组织切片,来观测该复合物对小鼠乳腺癌的免疫治疗作用。结果:rhHSP70-HER2/neu抗原肽复合物免疫小鼠后,可以增加t细胞分泌IFN-γ的能力,诱导出肿瘤特异性CtL,并对小鼠的乳腺癌有明显的治疗作用。结论:在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70可以在体外与一定的抗原肽非共价结合形成复合物,该复合物具有较强的诱导特异性CtL的能力,可对实验鼠的乳腺癌起到明显的治疗作用。

关键词：重组人热休克蛋白70 细胞毒性t细胞肿瘤免疫治疗

米托蒽醌通过诱导钙网蛋白的表达抑制黑素瘤的生长

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中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第1期17卷 19-24页

作者：张峻岭李卫泊谢绍建李冬斌田青王英霞薛平蔡建辉河北医科大学第二医院胃肠外科河北石家庄050000 河北医科大学第二医院肿瘤生物治疗科河北石家庄050000

目的:观察米托蒽醌(mitoxantrone,MIt)对黑素瘤B16细胞钙网蛋白(calreticulin,CRt)表达的影响,探讨高表达CRt的B16细胞膜抗原疫苗的免疫效果及其机制。方法:不同剂量MIt处理B16细胞,免疫荧光法检测B16细胞CRt的表达。以B16细胞建立小鼠... 详细信息

目的:观察米托蒽醌(mitoxantrone,MIt)对黑素瘤B16细胞钙网蛋白(calreticulin,CRt)表达的影响,探讨高表达CRt的B16细胞膜抗原疫苗的免疫效果及其机制。方法:不同剂量MIt处理B16细胞,免疫荧光法检测B16细胞CRt的表达。以B16细胞建立小鼠荷瘤模型,用不同剂量的MIt治疗荷瘤小鼠,观察MIt对黑素瘤生长及肿瘤组织中CRt表达的影响。制备B16细胞膜蛋白和MIt处理后B16细胞膜蛋白作为疫苗分别免疫小鼠,免疫组化检测小鼠移植瘤组织内免疫细胞的浸润情况,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏中CD4+、CD8+t细胞比例的变化。结果:MIt可剂量依赖性地上调B16细胞表面CRt的表达,对照组B16细胞表面CRt为(29.40±3.57)%,高剂量MIt处理组为(72.20±2.94)%(Pt促进移植瘤组织中CRt的表达,对照组为(3.21±1.37),高剂量MIt组为(9.17±1.06)(Pt有效抑制小鼠黑素瘤的生长(P细胞膜蛋白疫苗相比,高表达CRt的MIt-B16细胞膜蛋白疫苗可明显上调小鼠黑素移植瘤组织中的DCs和t细胞的数量,以及脾脏细胞中CD4+、CD8+t细胞的比例(Pt能够上调CRt在B16细胞表面的表达,高表达CRt的B16细胞膜蛋白疫苗能够提高肿瘤组织中浸润DCs和t细胞的数量,抑制黑素瘤的生长。

关键词：黑素瘤米托蒽醌钙网蛋白树突状细胞细胞毒性t细胞

丙型肝炎病毒CtL表位的HLA-A2限制性及其免疫学效应研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第9期29卷 822-826页

作者：段志良张丽芳张琴李文姝朱珊丽陈俊夏克栋文金生温州医学院微生物与免疫学教研室 325053 温州医学院第二附属医院检验科 325035

目的研究前期鉴定的5条丙型肝炎病毒（HCV）特异忡细胞毒性t细胞（CtL）表位的HLA—A2限制性及其免疫学效应。方法基于1、2细胞株，采用MHC-肽复合物稳定性试验研究前期鉴定的HCV特异性CtL表位与HLA—A2分子的亲和力；采用细胞内细胞因... 详细信息

目的研究前期鉴定的5条丙型肝炎病毒（HCV）特异忡细胞毒性t细胞（CtL）表位的HLA—A2限制性及其免疫学效应。方法基于1、2细胞株，采用MHC-肽复合物稳定性试验研究前期鉴定的HCV特异性CtL表位与HLA—A2分子的亲和力；采用细胞内细胞因子染色（intracellular cytokine staining，ICS）和ELISPOt研究上述HLA—A2限制性CtL表位体外刺激HLA—A2阳性外周血单个核细胞（PBMC）产生肽特异性CtL的效应；采坩CtL杀伤试验研究上述肽特异性CtL杀伤靶细胞（负载相同肽的t2细胞）的效应。结果前期研究鉴定的5条CtL表位肽中，NSdb_78（SMMAF-SAAL）和NS5a_367（tVSSALAEL）与HLA—A2分子有高亲和力（FI〉1）；ELISPOt结果显示NS4b_78（SMMAFSAAL）和NS5a_367（tVSSALAEL）可诱导高水平的分泌IFN-γ的效应细胞[分别为（60±6）SFC／10^4 PBMCvs（4±1）SFC／10^4 PBMC，P〈0．001：（10±3）SFC／10^4 PBMC vs （2±1）SFC／10^4 PBMC，P〈0．001]；ICS结果证实这两条肽刺激HLA—A2阳性PBMC后，在CD8^＋t细胞中产生了高百分比的CD8^＋ IFN-γ^＋ t[分别为（2．33±0．22）％vs（0．05±0．01）％，P〈0．001；（0．36±0．06）％vs（0．03±0．01）％，P〈0．001]；并且，肽特异性CtL可特异性杀伤负载相同肽的t2细胞。结论NS4b_78（SMMAFSAAL）和NS5a_367（tVSSALAEL）受HLA—A2限制，并具有较好的免疫原性。

关键词：细胞毒性t细胞 HLA-A2 免疫原性

HPV多肽致敏的树突状细胞体外激发特异性CtL能力的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2012年第5期32卷 468-472页

作者：浦红史央陆英华朱晨瑶毛玉荣张振宇时宏珍苏州大学附属第四人民医院妇科肿瘤综合治疗科无锡214062 南京市免疫细胞生物工程技术研究中心、南京得康生物技术有限公司 210019

目的观察以高危型人乳头瘤病毒16型（HPVl6）E6和E7基因编码的多肽E613-21（KLPDLCtEL）和E786-94（tLGIVCPI）为抗原负载的树突状细胞（DC）体外诱导特异性CtL的能力。方法采集HPV＋HIA-A2＋宫颈癌患者外周血，分离单核细胞（Mo）与外... 详细信息

目的观察以高危型人乳头瘤病毒16型（HPVl6）E6和E7基因编码的多肽E613-21（KLPDLCtEL）和E786-94（tLGIVCPI）为抗原负载的树突状细胞（DC）体外诱导特异性CtL的能力。方法采集HPV＋HIA-A2＋宫颈癌患者外周血，分离单核细胞（Mo）与外周淋巴细胞（PBL）；将Mo诱导成DC后负载E6和町多肽，用其反复致敏PBL（3次）；ELISA法检测致敏细胞上清细胞因子分泌水平；流式细胞标记法检测致敏细胞中特异性CtL的比例；Mtr法检测致敏细胞杀伤靶细胞的能力。结果11例HPVl6＋HLA-A2＋宫颈癌患者DC平均得率为（10．79±0．88）×106（每100ml外周血），CDllc＋HLA-DR＋为（97．15±2．41）％，其中CD80＋为（84．28±5．39）％，CD83＋为（85．17±5．06）％，CD86＋为（97．74±0．87）％。PBLs致敏3次后，平均增殖（15．4±1．5）倍；致敏第21天上清细胞因子水平分别为：IL-2（2551．9±195．3）pg／ml、IL-12（554．9±64．0）pg／ml、IFN-γ（2416．9±281．7）pg／ml，tNF-α（632．4±71．1）pg／ml，明显高于未致敏组（P〈0．05），IL-10（235．1±34．7）pg／ml与对照组比较无显著差异；特异性CtL的平均比例为（6．32±1．54）％，明显高于对照组（P〈0．05），对负载E6、E7多肽的t2细胞株杀伤率明显高于对照组（P〈0．05）。结论HPV E6和E7混合多肽负载的DC体外能有效地诱导特异性CtL，刺激thl型细胞因子的分泌，为治疗型宫颈癌疫苗的研制提供科学依据。

关键词：人乳头瘤病毒多肽树突状细胞细胞毒性t细胞