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大鼠肝癌组织中巨噬细胞与细胞毒性t细胞关系

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中华实验外科杂志 2011年第11期28卷 1877-1880页

作者：徐建王艳红沈沪佳复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

目的观察大鼠肝癌组织中巨噬细胞对细胞毒性t细胞浸润和凋亡的影响。方法构建Wistar大鼠Walker-256肝癌模型，将大鼠分为3组：A组（腹腔注射氯磷酸盐脂质体）、B组（腹腔注射PBS脂质体）、C组（腹腔注射生理盐水）。12d后摘取肿瘤组织... 详细信息

目的观察大鼠肝癌组织中巨噬细胞对细胞毒性t细胞浸润和凋亡的影响。方法构建Wistar大鼠Walker-256肝癌模型，将大鼠分为3组：A组（腹腔注射氯磷酸盐脂质体）、B组（腹腔注射PBS脂质体）、C组（腹腔注射生理盐水）。12d后摘取肿瘤组织，测量肿瘤大小、免疫组织化学检测肿瘤组织中浸润的CD68、CD163、CD8及GranzymeB阳性细胞个数；CD8与tUNEL双标方法检测肿瘤组织中t细胞的凋亡。结果（1）A、B、C3组肿瘤体积比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）A、B、C 3组中，CD68阳性细胞个数在A、B组之间比较；CD163阳性细胞个数在A、B组之间比较；CD8阳性细胞个数在A、B组，A、c组之间比较；Granzyme阳性细胞个数在A、c组之间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。其余各组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。其中，CD68、CD163阳性细胞个数在A组明显少于B、C组；而CD8、GranzymeB阳性细胞个数在A组明显多于B、C组。（3）相关分析显示，针对全部肿瘤组织，CD68与CD8阳性细胞之间，CD163与GranzymeB阳性细胞之间呈负相关，差异有统计学意义（P〈0．05）。CD68与GranzymeB阳性细胞之间，CD8与CD163阳性细胞之间无明显相关。（4）A、B、C3组中t细胞（CD8）凋亡率在A、C组之间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；其余各组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。A组t细胞凋亡率明显低于B、C组。结论氯磷酸盐脂质体可有效清除大鼠肝癌组织中巨噬细胞。巨噬细胞清除后，细胞毒性t细胞的浸润增多、凋亡减少。肿瘤巨噬细胞通过促进细胞毒性t细胞凋亡而抑制其对肿瘤细胞的杀伤活性，在肿瘤发展中起重要作用。

关键词：肿瘤巨噬细胞细胞毒性t细胞浸润

中药灵芝多糖调控细胞毒性t细胞抗肿瘤机制研究

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时珍国医国药 2013年第10期24卷 2365-2367页

作者：郭焱崔健丽李超英李春莉吴泽民张艳芳李文杰长春中医药大学吉林长春130117 吉林大学第四医院吉林长春130127 吉林省人民医院 130021

目的通过研究中药灵芝多糖对S180荷瘤小鼠细胞毒性t细胞活性的影响,探讨中药灵芝多糖抗肿瘤机制。方法小鼠胃饲灵芝多糖,流式细胞术检测荷瘤小鼠t细胞亚群变化,3H-tdR掺入法检测荷瘤小鼠CtL细胞毒活性。结果胃饲灵芝多糖使荷瘤小鼠的CD... 详细信息

目的通过研究中药灵芝多糖对S180荷瘤小鼠细胞毒性t细胞活性的影响,探讨中药灵芝多糖抗肿瘤机制。方法小鼠胃饲灵芝多糖,流式细胞术检测荷瘤小鼠t细胞亚群变化,3H-tdR掺入法检测荷瘤小鼠CtL细胞毒活性。结果胃饲灵芝多糖使荷瘤小鼠的CD8+t淋巴细胞数量、CtL细胞毒活性均明显提高(P细胞毒性t细胞免疫活性,从而达到抗肿瘤效果。

关键词：中药灵芝多糖细胞毒性t细胞抗肿瘤

负载k-ras抗原的树突状细胞诱导细胞毒性t淋巴细胞对肺癌细胞的体内杀伤作用

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中华实验外科杂志 2013年第12期30卷 2628-2630页

作者：朱登彦党丽峰杨洋刘东雷吴恺赵松郑州大学第一附属医院胸外科 450052 郑州大学第一附属医院体检中心 450052

目的观察k-ras突变多肽致敏的树突状细胞（DC）诱导活化的细胞毒性t淋巴细胞（CtL）对肺癌细胞的体内杀伤作用.方法联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）1000 mg/L和白细胞介素4（IL-4） 500 mg/L诱导外周血DC,分别使用表达... 详细信息

目的观察k-ras突变多肽致敏的树突状细胞（DC）诱导活化的细胞毒性t淋巴细胞（CtL）对肺癌细胞的体内杀伤作用.方法联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）1000 mg/L和白细胞介素4（IL-4） 500 mg/L诱导外周血DC,分别使用表达k-ras突变体的肺癌细胞抗原、单纯k-ras突变体抗原表位肽和k-ras突变体抗原表位肽阳离子纳米颗粒致敏DC,进而通过诱导刺激t淋巴细胞得到特异性的CtL.分别使用肺癌A549、NCH-446细胞株建立荷瘤裸鼠模型,以评价CtL体内抗肿瘤活性.结果负载全瘤抗原的DC诱导产生的CtL对表达k-ras阳性（A549）的肺癌细胞具有较好的抑制作用,而对k-ras表达阴性（NCH-446）的肺癌细胞抑制作用与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论负载肿瘤抗原的DC诱导CtL能够显著抑制肿瘤的生长速度,进而提高荷瘤裸鼠的生存时间,表明其可增加特异性抗肿瘤作用.

关键词：肺癌树突状细胞 k-ras突变多肽细胞毒性t细胞

树突状细胞诱导的细胞毒性t细胞对黑色素瘤的抑制作用

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中华实验外科杂志 2014年第4期31卷 771-773页

作者：张燕谭延伟蔡建辉胡玲玲河北医科大学第三医院肛肠外科石家庄050051 河北省血液中心河北省人民医院外科肿瘤生物治疗科河北奕康生物科技有限公司

目的探讨CIM^＋CD25^＋treg细胞对树突状细胞（DC）诱导的细胞毒性t细胞（CtL）对B16黑色素瘤抑瘤作用的影响及其机制。方法制备C57BL/6小鼠B16黑色素瘤动物模型，行全身放疗达非髓性淋巴细胞删除（NMLD）状态。随机将80只小鼠分为4组。... 详细信息

目的探讨CIM^＋CD25^＋treg细胞对树突状细胞（DC）诱导的细胞毒性t细胞（CtL）对B16黑色素瘤抑瘤作用的影响及其机制。方法制备C57BL/6小鼠B16黑色素瘤动物模型，行全身放疗达非髓性淋巴细胞删除（NMLD）状态。随机将80只小鼠分为4组。A组：在DC与t细胞共同培养前应用免疫磁珠法（MACS）删除CIM^＋CD25^＋treg细胞；B组：DC与t细胞共同培养后删除CIM^＋CD25^＋treg细胞；C组：DC与t细胞共同培养时不删除CIM^＋CD25^＋treg细胞。D组：对照组。体外应用DC诱导t细胞产生效应细胞CtL，将CtL经鼠尾静脉回输小鼠体内，观察对黑色素瘤的抑瘤效果。结果A、B、c3组对B16黑色素瘤抑瘤率分别为90．89％、92．52％、60．02％，均明显高于对照组（P〈0．05）。删除CIM^＋CD25^＋treg细胞的A、B两组抑瘤率优于C组（P〈0．05）。但A、B两组问抑瘤率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论删除CIM^＋CD25^＋treg细胞可明显提高CtL对B16黑色素瘤的抑瘤效果。

关键词：树突状细胞细胞毒性t细胞黑色素瘤抑瘤率

EB病毒-细胞毒性t细胞免疫治疗改善EB病毒相关非霍奇金淋巴瘤化疗效果的实验研究观察

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中国输血杂志 2015年第11期28卷 1304-1308页

作者：邓锐易海范方毅付利孙浩平李业成赖思晗刘一岚王译帅燕蓉何光翠缪晓娟苏毅成都军区总医院血液科四川成都610038

目的探讨EB病毒(EBV)特异性细胞毒性t细胞(CtL)免疫治疗对EBV相关非霍奇金淋巴瘤(NHL)化疗效果的影响及机制。方法通过细胞学实验成功诱导并扩增出大量的EBV特异性CtL;建立人EBV相关NHL的Balb/c裸雌鼠动物模型,设单纯免疫(EBV-CtL)治疗... 详细信息

目的探讨EB病毒(EBV)特异性细胞毒性t细胞(CtL)免疫治疗对EBV相关非霍奇金淋巴瘤(NHL)化疗效果的影响及机制。方法通过细胞学实验成功诱导并扩增出大量的EBV特异性CtL;建立人EBV相关NHL的Balb/c裸雌鼠动物模型,设单纯免疫(EBV-CtL)治疗组、单纯化疗(CHOP)组、免疫治疗联合化疗疫(EBV-CtL+CHOP)治疗组以及空白对照组,5只/组,观察各组动物肿瘤生长情况;治疗结束后剥离肿瘤组织检测瘤内免疫细胞变化情况。结果体外杀伤实验显示伴随效靶比的增加,EBV-CtL杀伤能力逐渐增大:效靶比例分别在2.5∶1、5.0∶1与、10∶1及20∶1时,杀伤效率(%)分别为9.41±1.23、19.45±3.54、50.34±6.77和55.26±7.21(PtL及巨噬细胞(tIM)平均比率(%),EBV-CtL+CHOP组、EBV-CtL组、CHOP组及空白对照组分别为13.65±1.48、4.33%±1.04%,10.24±1.2%、3.82±0.54,6.83±0.16、0.95±0.07,6.32±0.18、1.96±0.24(PtL可能通过激活tIM增殖而间接促进肿瘤免疫应答。EBV-CtL免疫治疗能有效改善EBV相关NHL化疗疗效,或对EBV相关NHL的治疗起到一定指导作用。

关键词：非霍奇金淋巴瘤 EB病毒细胞毒性t细胞免疫治疗化疗动物实验裸鼠

乙肝病毒感染患者HBcAg特异性细胞毒性t细胞检测及意义

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山东医药 2008年第22期48卷 86-88页

作者：王晓花孙成刚济南市传染病医院山东济南250021 山东省立医院

应用四聚体技术结合流式细胞术检测人外周全血中HBcAg表位肽tc18-27特异性细胞毒t淋巴细胞(HBVsCtL)的比率,并分析其与外周血HBV DNA、ALt、HBeAg之间的关系。结果HLA-A2+慢乙肝患者、无症状携带者和急性HBV感染者HBVsCtL比率均较健康... 详细信息

应用四聚体技术结合流式细胞术检测人外周全血中HBcAg表位肽tc18-27特异性细胞毒t淋巴细胞(HBVsCtL)的比率,并分析其与外周血HBV DNA、ALt、HBeAg之间的关系。结果HLA-A2+慢乙肝患者、无症状携带者和急性HBV感染者HBVsCtL比率均较健康对照者升高(P(0.05);且HLA-A2+急性HBV感染者HB-VsCtL比率较慢性HBV感染者明显升高(P(0.01)。HBVsCtLs比率与HBV DNA定量及ALt之间无显著相关性(P>0.05)。HBeAg(+)慢乙肝患者HBVsCtL比率与正常对照无统计学差异(P>0.05),但HBeAg(-)慢乙肝患者HBVsCtL比率较健康对照高(PtL与肝内病毒复制和肝细胞损伤之间无直接相关关系,但其水平高低在一定程度上反映了HBV特异性细胞免疫功能的高低,对发病及转归有一定影响。

关键词： HLA-A2抗原四聚体流式细胞术慢性乙型病毒性肝炎细胞毒性t细胞

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细胞毒性t细胞与肿瘤免疫治疗

国外医学（口腔医学分册） 2003年第2期30卷 113-115页

作者：郅克谦刘继承韦树标温玉明王昌美四川大学华西口腔医学院颌面外科广东省深圳市福田区园岭医院口腔科

宿主对肿瘤的免疫应答是细胞免疫和体液免疫对肿瘤作用的综合结果,其中细胞免疫是抗肿瘤免疫的重要组成部分。本文通过介绍t细胞活化机制和杀死靶细胞的机制,进而综述目前常用的抗肿瘤免疫途径。

关键词：细胞毒性t细胞肿瘤免疫治疗

脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤治疗的研究

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实用妇产科杂志 2005年第5期21卷 287-289页

作者：何跃东彭芝兰刘兴会刘珊玲王和四川大学华西第二医院四川成都610041

目的研究脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞用于卵巢癌过继免疫治疗的可行性。方法采用肿瘤细胞和淋巴细胞混合培养法获得脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行治疗并与外周血来源淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来... 详细信息

目的研究脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞用于卵巢癌过继免疫治疗的可行性。方法采用肿瘤细胞和淋巴细胞混合培养法获得脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行治疗并与外周血来源淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来源的细胞毒性t淋巴细胞有明显的抑瘤作用,移植物抗宿主病的发生不明显。结论脐血可作为过继免疫治疗中效应细胞来源试用于卵巢癌的治疗。

关键词：脐血细胞毒性t细胞卵巢癌过继免疫治疗

HLA-A0201阳性慢性粒细胞白血病PR1特异性细胞毒性t细胞的初步研究

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白血病．淋巴瘤 2015年第8期24卷 483-486页

作者：王玲玲许月姜扬文扬州大学临床医学院 225001 江苏省苏北人民医院血液科

目的探讨PR1特异性细胞毒性t细胞（CtL）与HLA-A0201阳性慢性粒细胞白血病（CML）患者疗效及预后的关系,探讨是否可以应用PR1肽作为疗效达到停药试验标准患者的后续免疫治疗,从而维持长期缓解状态.方法收集28例HLA-A0201阳性CML患者... 详细信息

目的探讨PR1特异性细胞毒性t细胞（CtL）与HLA-A0201阳性慢性粒细胞白血病（CML）患者疗效及预后的关系,探讨是否可以应用PR1肽作为疗效达到停药试验标准患者的后续免疫治疗,从而维持长期缓解状态.方法收集28例HLA-A0201阳性CML患者外周血,利用可溶性PR1-MHC-Ⅰ类四聚体技术及流式细胞术检测PR1特异性CtL存在与否、频率高低;比较不同治疗时间CML患者PR1特异性CtL表达的差异.结果 PR1特异性CtL频率与同期PCR（bcr-abl/abl）IS（IS：国际标准值）之间呈负相关（r=-0.658,P＜0.001）.接受治疗3、6、9个月及1、2、3、4、5、6年的PR1特异性CtL频率分别为（0.06±0.02）％、（0.10±0.02）％、（0.14土0.02）％、（0.16±0.02）％、（0.20±0.03）％、（0.18±0.03）％、（0.18±0.01）％、（0.17±0.05）％、（0.18±0.03）％.治疗3、6、9个月的频率分别与其他时间点频率相比,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.治疗1年及以上的频率两两相比,差异均无统计学意义（均P＞0.05）.伊马替尼400 mg 1次/d治疗3、6、9、12个月,Sokal评分高危组患者PR1特异性CtL频率低于低危组、中危组.结论治疗效果显著的CML患者体内可持续检测到PR1特异性CtL,其与肿瘤负荷呈负相关,提示PR1特异性CtL可能与抗白血病细胞作用相关,为疗效获得持续稳定MR^4.5及MR^5.0的CML患者使用PR1肽疫苗作为后续免疫治疗提供了依据.

关键词：白血病粒细胞慢性 PR1 细胞毒性t细胞肿瘤免疫