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天津医药 2014年第4期42卷 325-328,I0004页

作者：张梦晓尚曼张琦王瑶吴艳娜宋君秋刘艳霞天津医科大学药理教研室 300070

目的建立流式细胞术对大鼠循环血中细胞微囊泡(MVs)的检测方法,并测定心肌缺血预适应(IPC)处理大鼠循环血中血小板来源的MVs(PMVs)及内皮细胞来源的MVs(EMVs)。方法大鼠经腹主动脉取血,枸橼酸钠抗凝,室温下经两步离心获得无血小板血浆(P... 详细信息

目的建立流式细胞术对大鼠循环血中细胞微囊泡(MVs)的检测方法,并测定心肌缺血预适应(IPC)处理大鼠循环血中血小板来源的MVs(PMVs)及内皮细胞来源的MVs(EMVs)。方法大鼠经腹主动脉取血,枸橼酸钠抗凝,室温下经两步离心获得无血小板血浆(PFP)。PFP中分别加入FITC标记的血小板表面标志物CD61单抗或PE标记的内皮细胞表面标志物CD144单抗,采用1μm标准微球做粒径对照,2μm标准微球用于计数,流式细胞仪进行检测。结果 3.5%枸橼酸钠与血液按体积比1∶4混匀,离心后可得均匀、清亮的上清。PFP中1μm以下粒子信号占全部信号的99%以上。PMVs和EMVs分别为CD61阳性和CD144阳性的粒子,直径均小于1μm。IPC处理大鼠循环血中PMVs、EMVs水平分别为(4 053±1 987)个/μL、(4 870±825)个/μL。结论成功建立和优化了流式细胞术测定大鼠循环血中MVs的方法,并通过对IPC处理大鼠循环血中PMVs和EMVs的测定对MVs的检测方法进行了验证。

关键词：血小板内皮细胞流式细胞术细胞微囊泡缺血预适应

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冠心病患者血浆细胞膜微囊泡miR-155表达的分析

冠心病患者血浆细胞膜微囊泡miR-155表达的分析

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作者：熊振宇广州医科大学

学位级别：硕士

【研究背景】冠状动脉粥样硬化性心脏病是指在多种致病因素作用下导致冠状动脉粥样硬化,引起冠状动脉管腔狭窄甚至闭塞,从而导致心肌细胞缺血、缺氧或者坏死而引发的临床综合征。有相关研究表明,内皮祖细胞修复能力缺陷、血管内皮细胞... 详细信息

【研究背景】冠状动脉粥样硬化性心脏病是指在多种致病因素作用下导致冠状动脉粥样硬化,引起冠状动脉管腔狭窄甚至闭塞,从而导致心肌细胞缺血、缺氧或者坏死而引发的临床综合征。有相关研究表明,内皮祖细胞修复能力缺陷、血管内皮细胞功能障碍和平滑肌细胞功能损伤是血管病变的关键环节[1]。细胞膜微囊泡是组织细胞受到来自各种不同的刺激反应后释放的一种直径约为100-1000nm的细胞膜小囊泡。它在调节mi RNA信号转导和功能表达中起非常重要的的作用[2]。按照目前研究结果的观点,普遍认为细胞膜微囊泡是miRNAs的主要载体[3]。miRNAs为长度大约18-22个核苷酸的非编码RNA小分子,它通过抑制蛋白的翻译或引起mRNA降解,在转录后的水平上调控基因表达。miRNAs通过特异信号转导,可以调控细胞周期,对生物的细胞分化、增殖凋亡和激素分泌等生物过程有着极其重要的病理生理学意义。在各种各样的miRNAs中,很多都与冠心病相关,而miR-155作为炎症相关性miRNA,已经被证实参与了冠心病血管内皮损伤的发生发展。本研究主要采取逆转录荧光定量PCR(qRT-PCR)检测冠心病患者的血miR-155表达水平,探讨miR-155在冠心病发生发展中的意义。【研究目的】探讨冠心病患者的血浆细胞微囊泡miR-155的表达水平,了解miR-155与冠心病的相关性。【研究方法】按照本研究的纳入及排除标准收集了2014年1月至2016年12月期间于广州医科大学附属第二医院心血管内科住院部92个病例的外周血标本。其中冠心病24例;2型糖尿病21例;冠心病合并糖尿病22例;正常对照组25例。收集这些患者外周血,分离微囊泡,提取血miR-155,采取逆转录荧光定量PCR,并且收集这些患者的多项一般临床指标进行分析。本研究的所有数据均采用SPSS v16.0软件进行统计分析。统计方法为单因素方差分析。【结果】四组患者在性别、年龄、TBIL、DBIL、IBIL、Cr、UA、BNP、LVEF在统计学上无明显差异(P>0.05)。冠心病组患者的CHOL相对正常对照组升高(P细胞微囊泡miR-155表达水平与正常对照组有明显统计学差异(P细胞微囊泡miR-155表达水平与正常对照组有统计学差异(P0.05)。【结论】1.冠心病、糖尿病及冠心病合并糖尿病组患者的血浆细胞膜微囊泡的miR-155表达水平比较一般人群明显升高。2.冠心病及糖尿病与冠心病合并糖尿病患者的血浆细胞膜微囊泡的miR-155表达水平比较无差异。

关键词：冠心病糖尿病细胞微囊泡 miR-155

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心肌缺血预适应循环血中微囊泡对大鼠心肌I/R损伤的作用

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中国应用生理学杂志 2016年第2期32卷 97-101页

作者：王艺璐刘淼尚曼王瑶张琦王少勋韦苏张琨玮刘超吴艳娜宋君秋刘艳霞天津医科大学基础医学院药理学教研室天津300070

目的:研究心肌缺血预适应(IPC)大鼠循环血中微囊泡(MVs)对大鼠在体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及相关机制。方法:反复短暂结扎/松开大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠IPC模型,自腹主动脉取血,超速离心法分离循环血中的IPC-MVs,并对其进... 详细信息

目的:研究心肌缺血预适应(IPC)大鼠循环血中微囊泡(MVs)对大鼠在体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及相关机制。方法:反复短暂结扎/松开大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠IPC模型,自腹主动脉取血,超速离心法分离循环血中的IPC-MVs,并对其进行流式鉴定。建立在体大鼠心肌I/R模型,股静脉注射IPC-MVs 7mg/kg。HE染色观察心肌形态学变化,TTC染色检测心肌梗死范围,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率。比色法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)活力,分光光度法测定心肌组织caspase 3活力,Western blot法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:流式细胞术检测IPC-MVs浓度为4380±745个/μl。与I/R组比较,IPC-MVs能够减轻I/R大鼠心肌组织损伤,缩小心肌梗死范围(P细胞凋亡数量(P<0.01),明显降低血清LDH活力(P<0.01),降低心肌组织caspase 3活力(P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达(P<0.01),降低Bax蛋白表达(P<0.01),升高Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。结论:IPC-MVs显著减轻大鼠在体心肌I/R损伤,通过上调心肌组织中Bcl-2的蛋白表达,下调Bax的蛋白表达,升高Bcl-2/Bax比值,降低caspase 3活力而发挥心肌保护作用。

关键词：细胞微囊泡心肌缺血预适应心肌缺血/再灌注大鼠细胞凋亡

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创伤性颅脑损伤与凝血病相关性分析

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浙江创伤外科 2022年第1期27卷 193-196页

作者：谢志杰程军吴建跃杭州师范大学附属医院杭州310015

目的通过对创伤性颅脑损伤(TBI)相关凝血功能障碍机制、危险因素、检测手段等进行简要阐述,为临床诊断与治疗提供理论依据,并针对其相关危险因素,早期纠正以改善预后。方法通过查阅,收集国内外关于创伤性颅脑损伤合并凝血病的诊断治疗... 详细信息

目的通过对创伤性颅脑损伤(TBI)相关凝血功能障碍机制、危险因素、检测手段等进行简要阐述,为临床诊断与治疗提供理论依据,并针对其相关危险因素,早期纠正以改善预后。方法通过查阅,收集国内外关于创伤性颅脑损伤合并凝血病的诊断治疗的文献并综述。结果TBI患者并发凝血功能障碍是TBI临床管理中的一大难题,其发病机制十分复杂。结论凝血障碍和出血进展是TBI临床管理中的重大且持续的挑战,尚待进一步的基础与临床研究阐明TBI后止血异常的各种表型和机制及相关危险因素,以解决TBI后凝血血异常、制定有针对性和个体化的方法防止继发性损伤并改善结果。

关键词：创伤性颅脑损伤凝血病细胞微囊泡血小板

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