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巨噬细胞移动抑制因子促进骨髓间充质干细胞归巢修复急性膝关节软骨损伤

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中国组织工程研究 2021年第25期25卷 4013-4018页

作者：陆定贵姚顺晗唐乾利唐毓金右江民族医学院附属医院广西壮族自治区百色市533000

背景:软骨缺乏血管、神经,自我修复能力有限。青年人的软骨修复主要方法有软骨下骨钻孔术、微骨折术,其目的是打通软骨下骨板,使骨髓腔受到炎症刺激从而动员骨髓间充质干细胞归巢到损伤区域分化为软骨细胞、成纤维细胞,从而发挥修复作... 详细信息

背景:软骨缺乏血管、神经,自我修复能力有限。青年人的软骨修复主要方法有软骨下骨钻孔术、微骨折术,其目的是打通软骨下骨板,使骨髓腔受到炎症刺激从而动员骨髓间充质干细胞归巢到损伤区域分化为软骨细胞、成纤维细胞,从而发挥修复作用。微骨折术后的软骨生长取决于损伤区归巢干细胞的数量,因此,提高干细胞归巢数量可提高手术成功的机会。目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子对骨髓间充质干细胞归巢治疗软骨急性损伤的影响。方法:由人股骨骨髓中分离培养骨髓间充质干细胞,并检测其分化为软骨细胞的能力。采用免疫组化方法测定骨髓间充质干细胞和成软骨细胞的CXCR2表达,采用细胞划痕实验探讨巨噬细胞移动抑制因子对骨髓间充质干细胞迁移动力学的影响。制作大鼠急性膝关节软骨损伤模型,造模后第1,2,3天关节内注射巨噬细胞移动抑制因子,造模后第7天采用免疫化学荧光染色和流式细胞术检测损伤区域PECAM-1阳性细胞(血管内皮细胞)数量,采用DAPI染色检测损伤区域单核细胞数量。结果与结论:①骨髓间充质干细胞表面标记物CD166、CD29阳性,CD34阴性;②骨髓间充质干细胞诱导分化为软骨细胞后CXCR2抗体表型退化、消失,而Ⅱ型胶原抗体表型呈阳性;③巨噬细胞移动抑制因子可促进骨髓间充质干细胞迁移,阻断CXCR2受体后巨噬细胞移动抑制因子促进骨髓间充质干细胞迁移的作用被抑制;④在动物模型中,DAPI染色结果提示巨噬细胞移动抑制因子组损伤区有核细胞数明显高于对照组,免疫化学荧光染色及流式细胞术显示巨噬细胞移动抑制因子组修复损伤区域PECAM-1阳性细胞明显高于对照组;⑤以上结果表明,巨噬细胞移动抑制因子可促进骨髓间充质干细胞归巢修复急性软骨损伤。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞巨噬细胞移动抑制因子膝关节软骨损伤细胞归巢

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增强造血干/祖细胞归巢潜能的可行性策略

中华血液学杂志 2007年第11期28卷 787-789页

作者：高静韬郑以州中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

造血干／祖细胞（HS／PC）的归巢为一多步骤过程，众多黏附分子、趋化因子、生长因子及蛋白水解酶等参与HS／PC归巢过程的调控，其中以基质衍生因子（SDF）-1α与其特异性G蛋白偶联受体CXCR4（SDF-lα／CXCR4轴）的调节作用尤为重要，Wr... 详细信息

造血干／祖细胞（HS／PC）的归巢为一多步骤过程，众多黏附分子、趋化因子、生长因子及蛋白水解酶等参与HS／PC归巢过程的调控，其中以基质衍生因子（SDF）-1α与其特异性G蛋白偶联受体CXCR4（SDF-lα／CXCR4轴）的调节作用尤为重要，Wright等^[1]研究证实CXCR4或SDF-1α缺陷小鼠因胎肝和骨髓造血功能衰竭而死于围产期。新近发现多种细胞因子或蛋白成分可以增加HS／PC对SDF-lα／CXCR4轴的敏感性和反应性，并由此构建复杂的SDF-1α／CXCR4轴调控模型，我们就此领域的研究现状作一综述。

关键词：造血干/祖细胞细胞归巢 CXCR4 骨髓造血功能衰竭 G蛋白偶联受体 SDF-1 基质衍生因子蛋白水解酶

丹参酮ⅡA诱导人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化、提高预分化细胞归巢能力的研究

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中国医科大学学报 2020年第4期49卷 294-300页

作者：樊晨星王秀艳赵千赖红李昆锦州医科大学附属第一医院检验科辽宁锦州121001 锦州医科大学附属第三医院检验科辽宁锦州121001 中国医科大学基础医学院解剖学教研室沈阳110122

目的评估丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞(hPDMSCs)向心肌细胞分化及预分化细胞归巢能力的影响,并探讨其相关机制。方法应用组织块法分离培养hPDMSCs。取第3~6代对数生长期的hPDMSCs,分别用丹参酮ⅡA或丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262... 详细信息

目的评估丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞(hPDMSCs)向心肌细胞分化及预分化细胞归巢能力的影响,并探讨其相关机制。方法应用组织块法分离培养hPDMSCs。取第3~6代对数生长期的hPDMSCs,分别用丹参酮ⅡA或丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262611处理,同时设置不加药的对照组,20 d终止实验。用MTS法评估细胞增殖情况,划痕实验分析预分化细胞向损伤区域迁移情况,Western blotting检测心肌特异性蛋白(GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI)、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(APC、Gsk-3β、β-catenin)以及与归巢相关的趋化因子(CXCR-4、CCR-2)的表达情况。结果应用组织块法成功分离培养出hPDMSCs;与对照组相比,经丹参酮ⅡA干预的hPDMSCs增殖速率明显减慢,心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI的表达明显增加(P细胞增殖、促进心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI的表达、提高细胞向损伤区迁移的能力明显降低,且CXCR-4、CCR-2的表达也明显减少(P细胞分化、提高预分化细胞向损伤区的归巢能力。

关键词：丹参酮ⅡA 人胎盘间充质干细胞心肌分化细胞归巢

基于内源性干细胞归巢的牙髓再生模式研究进展

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重庆医科大学学报 2018年第11期43卷 1532-1536页

作者：陈巧窦磊重庆市妇幼保健院口腔科重庆401147 重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科重庆401147

目前对于牙髓不可逆炎症和坏死患牙的标准治疗方法是根管治疗,但根管治疗不能恢复牙髓牙本质复合体的生理功能,不能形成修复性牙本质抵御外界侵袭。相比传统的根管治疗术,诱导根管内牙髓再生能达到更好的预后,也是今后的研究方向。研究... 详细信息

目前对于牙髓不可逆炎症和坏死患牙的标准治疗方法是根管治疗,但根管治疗不能恢复牙髓牙本质复合体的生理功能,不能形成修复性牙本质抵御外界侵袭。相比传统的根管治疗术,诱导根管内牙髓再生能达到更好的预后,也是今后的研究方向。研究表明利用组织工程原理将干细胞,合适的支架材料及信号因子植入到根管内可以形成牙髓样结构和管状牙本质。相比外源性干细胞移植的技术敏感性及潜在的安全性问题,基于内源性干细胞归巢实现牙髓再生的模式更加符合临床要求。现将基于内源性干细胞归巢实现牙髓再生模式的各个重要环节的研究进展综述如下。

关键词：牙髓再生细胞归巢干细胞支架材料信号因子

从“细胞移植”到“细胞归巢”——临床牙周组织再生的新希望?

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医学争鸣 2013年第1期4卷 31-34页

作者：雷鸣陈发明第四军医大学口腔医学院转化医学中心陕西西安710032 第四军医大学口腔医学院牙周黏膜病科陕西西安710032

干细胞移植作为牙周组织再生治疗的新方法已经取得明显进展。然而,其临床转化目前却面临着技术困难和准入制度等方面的严峻挑战。机体内已经存在很多可供组织修复再生需要的干细胞,诱导、动员这些干细胞定向迁徙、靶点募集(细胞归巢)并... 详细信息

干细胞移植作为牙周组织再生治疗的新方法已经取得明显进展。然而,其临床转化目前却面临着技术困难和准入制度等方面的严峻挑战。机体内已经存在很多可供组织修复再生需要的干细胞,诱导、动员这些干细胞定向迁徙、靶点募集(细胞归巢)并发挥治疗作用,有望实现牙周内源性再生,加速牙周再生治疗的临床转化进程,值得深入研究。

关键词：细胞归巢牙周内源性再生临床转化

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祖细胞归巢与低氧性肺动脉高压

广东医学 2011年第9期32卷 1209-1211页

作者：李梅罗容珍吴秋良中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室病理科广州510060

肺循环阻力的增加和肺动脉高压是导致肺心病的重要原因,各种低氧性肺动脉高压（hypoxia pulmonary hyperten-sion,HPH）的主要病理改变是肺血管重塑（pulmonary vascu-lar remodeling,PVR）。长期慢性低氧可以导致肺动脉结构改变即发生... 详细信息

肺循环阻力的增加和肺动脉高压是导致肺心病的重要原因,各种低氧性肺动脉高压（hypoxia pulmonary hyperten-sion,HPH）的主要病理改变是肺血管重塑（pulmonary vascu-lar remodeling,PVR）。长期慢性低氧可以导致肺动脉结构改变即发生血管重塑。低氧情况下,骨髓或者外周血祖细胞可以归巢至肺动脉而参与低氧性PVR的形成。

关键词：低氧性肺动脉高压细胞归巢 pulmonary 肺血管重塑外周血祖细胞肺循环阻力病理改变结构改变

组织工程学及细胞归巢理论在颌面部骨组织缺损修复中的应用

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广东医学 2013年第17期34卷 2734-2737页

作者：屈瑞博哈励逊国际和平医院口腔科河北衡水053000

由于先天畸形、外伤、肿瘤、炎症、慢性疾病等所致的颌骨缺损和缺失可以使面部外形发生显著的变化.人们一直在探索一种简单易行损伤小且效果显著的方法来恢复组织的缺损.在义齿修复领域,近年来,我国种植技术的兴起为口腔修复方法开拓了... 详细信息

由于先天畸形、外伤、肿瘤、炎症、慢性疾病等所致的颌骨缺损和缺失可以使面部外形发生显著的变化.人们一直在探索一种简单易行损伤小且效果显著的方法来恢复组织的缺损.在义齿修复领域,近年来,我国种植技术的兴起为口腔修复方法开拓了崭新的思路,然而由于骨组织的缺损修复条件的限制,使一些患者无法进行以种植技术为基础的修复治疗.一些无牙颌患者,由于牙槽嵴严重的吸收使修复义齿的固位能力和稳定性无法得到有效的保障,虽然人们想出了多种改良的方法来增强修复效果,但结果始终不尽完美.因此,包括口腔颌面外科、修复科、牙周科、种植科等多学科都将骨缺损的修复作为研究的重点.

关键词：组织缺损修复颌骨缺损颌面部组织工程学细胞归巢口腔颌面外科应用种植技术

丹参酮ⅡA诱导人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化、提高预分化细胞归巢及其相关机制的研究

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丹参酮ⅡA诱导人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化、提高预分化细...

作者：樊晨星锦州医科大学

学位级别：硕士

目的评估丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞（h PDMSCs）向心肌细胞分化及对预分化细胞归巢能力的影响,并探讨其相关机制。方法1、应用组织块分离法培养h PDMSCs,使用流式细胞术进行相关抗原的鉴定。2、取第4-6代的h PDMSCs,分别用不同浓... 详细信息

目的评估丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞（h PDMSCs）向心肌细胞分化及对预分化细胞归巢能力的影响,并探讨其相关机制。方法1、应用组织块分离法培养h PDMSCs,使用流式细胞术进行相关抗原的鉴定。2、取第4-6代的h PDMSCs,分别用不同浓度的丹参酮ⅡA进行干预,MTS法每四天进行细胞增殖检测,选择对细胞增殖没有影响的无毒剂量（从没有到有影响的临界浓度）进行实验。3、使用丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262611干预h PDMSCs,同时设置不加药的对照组,每四天换一次液,MTS法检测细胞的增殖情况。4、使用丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262611干预h PDMSCs,同时设置不加药的对照组,20天时使用细胞划痕法检测细胞迁移运动情况。5、使用丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262611干预h PDMSCs,同时设置不加药的对照组,每四天换一次液,20天时收集细胞,使用Western-blot法进行以下相关蛋白的检测:（1）细胞周期调节蛋白（CDK4、CDK6、Cyclin D1）、细胞增殖相关抗原（Ki67、PCNA）和细胞凋亡调控蛋白（Caspase-3、Cleaved Caspase-3）的表达情况;（2）心肌特异性蛋白（GATA-4、ANP、α-SCA、c Tn I）的表达情况;（3）经典Wnt信号通路相关蛋白（APC、Gsk-3β、β-catenin）和非经典Wnt信号通路相关蛋白（Wnt5a、Wnt11）的表达情况;（4）与归巢相关的趋化因子（CXCR-4、CCR-2）的表达情况。结果1、应用组织块分离法成功分离培养出h PDMSCs。2、与对照组相比,经丹参酮ⅡA处理的细胞增殖速度明显降低,但这种降低并不伴有细胞凋亡的变化,其细胞凋亡调控蛋白（Caspase-3、Cleaved Caspase-3）的表达没有明显变化（P＞0.05）,而细胞增殖相关抗原（Ki67、PCNA）和细胞周期调节蛋白（CDK4、CDK6、Cyclin D1）的表达明显减少（P＜0.05）。3、与对照组相比,经参酮ⅡA处理的细胞,其心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、c Tn I的表达明显增加（P＜0.05）,且向损伤区迁移的能力明显增强（P＜0.05）。4、与对照组相比,经参酮ⅡA处理的细胞,其经典Wnt信号通路中的APC、Gsk-3β的表达明显增多（P＜0.05）,而β-catenin的表达明显减少（P＜0.05）,非经典Wnt信号通路中Wnt5a、Wnt11的表达也明显增加（P＜0.05）;同时,与归巢相关的趋化因子CXCR-4、CCR-2的表达也明显增多（P＜0.05）。5、在增加β-catenin激动剂WAY-262611干预后,细胞增殖速度明显增快,细胞增殖相关抗原（Ki67、PCNA）和细胞周期调节蛋白（CDK4、CDK6、Cyclin D1）的表达明显增加（P＜0.05）;心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、c Tn I的表达明显减少（P＜0.05）;同时,细胞向损伤区迁移的能力明显下降（P＜0.05）,与归巢相关的趋化因子CXCR-4、CCR-2的表达也明显减少（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路诱导h PDMSCs向心肌细胞分化、提高预分化细胞的归巢能力。

关键词：丹参酮ⅡA 人胎盘间充质干细胞心肌分化细胞归巢

基质细胞衍生因子-1趋化细胞归巢诱导牙髓再生的实验研究

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基质细胞衍生因子-1趋化细胞归巢诱导牙髓再生的实验研究

作者：吴周玲广西医科大学

学位级别：硕士

目的:无髓根管内应用基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)进行再生性牙髓治疗或体内局部应用抗SDF-1抗体来中和牙髓血运重建过程中产生的SDF-1,以研究SDF-1在再生性牙髓治疗中的作用。方法:1.60只8周龄SD大鼠,双... 详细信息

目的:无髓根管内应用基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)进行再生性牙髓治疗或体内局部应用抗SDF-1抗体来中和牙髓血运重建过程中产生的SDF-1,以研究SDF-1在再生性牙髓治疗中的作用。方法:1.60只8周龄SD大鼠,双侧下颌第一磨牙作为实验牙,去髓建立无髓根管模型。2.实验牙的处理方法为:(1)建立无髓根管模型;(2)根尖损伤刺激出血;(3)根管内植入SDF-1α水凝胶;(4)下颌第一磨牙前庭沟局部注射SDF-1血清抗体。实验分为5个组,每组12只SD大鼠。根据上述方法对不同组别的实验牙采取单一或组合方式处理,分别为:刺激出血组(Group Blood Clot,BC组)、刺激出血+SDF-1α水凝胶组(Group Blood Clot+SDF-1α,BC+SDF-1α组)、SDF-1α水凝胶组(Group SDF-1α,SDF-1α组)、刺激出血+抗SDF-1抗体中和作用组(Group Blood Clot+SDF-1 Neutralizing Antibody,BC+antiSDF-1组)。设对照组,实验牙仅建立无髓根管模型。3.样本收集和检测:每组12只大鼠根据上述分组处理后,分别在14天和30天将大鼠过量麻醉处死,每个时间点6只大鼠。取左右两侧下颌骨进行组织学标本处理,进行HE(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色,对根管内新生组织进行定性和定量分析。结果:HE染色组织学表现(1)对照组:根管内去髓后不进行任何处理,14天和30天根管内未见新生结缔组织,根尖孔附近可见少量炎症细胞,根尖区牙周膜内的细胞无从根尖孔向根管内延伸的趋势。(2)实验组HE染色组织学表现14天组织学表现:BC组、BC+SDF-1α组和SDF-1α组根管内冠部均可见大小不一不规则的矿化基质,根管内根尖方向为成纤维细胞样细胞和少量小血管组成的较致密的结缔组织,以上3组根尖区牙周膜内的细胞明显地呈现从根尖孔向根管内延伸的趋势,BC+SDF-1α组和SDF-1α组新生结缔组织内小血管较BC组更丰富;BC+antiSDF-1组中有2个样本根管内未见新生结缔组织,根尖区牙周膜内的细胞从根尖孔向根管内延伸的趋势消失,大量幼稚的成纤维细胞和丰富的小血管聚集在根尖孔处,未进入到根管内,其余样本组织学表现与BC组相似。30天组织学表现:各实验组根管内以及根尖区牙周膜内组织学表现基本相似,根管内冠方为大量大小不一的不规则矿化基质,根管内根尖1/3处为成纤维细胞样细胞和极少小血管组成的较为致密的结缔组织,形态类似于牙周韧带样结构,根管内的结缔组织通过根尖孔连接到牙周韧带。(3)实验组IHC染色组织学表现14天IHC染色组织学表现:BC组、BC+SDF-1α组和SDF-1α组根管内有表达CXCR4阳性细胞,BC+antiSDF-1组根管内未见表达CXCR4阳性细胞。所有实验组根尖区牙周膜内均可见表达CXCR4阳性细胞。30天IHC染色组织学表现:BC组和BC+SDF-1α组根管内有表达CXCR4阳性细胞,SDF-1α组根管内全为矿化组织,无表达CXCR4阳性细胞,BC+antiSDF-1组根管内未见表达CXCR4阳性细胞。所有实验组根尖区牙周膜内均可见表达CXCR4阳性细胞。(4)根管内新生组织面积比值的统计学分析14天时,BC组、BC+SDF-1α组和SDF-1α组根管内新生组织面积比值的平均值均高于BC+antiSDF-1组,但各实验组间的差异无统计学意义(p>0.05)。30天时,BC组、BC+SDF-1α组和SDF-1α组根管内新生组织面积比值的平均值均高于BC+antiSDF-1组,各实验组间的差异有统计学意义(p细胞归巢进入根管参与组织再生,在一定程度上增加牙髓血运重建术后根管内的新生组织量。2.局部应用抗SDF-1抗体能阻止表达CXCR4阳性的细胞归巢到根管内参与牙髓组织新生。***-1α/CXCR4信号轴在趋化细胞归巢进入根管进行组织再生中具有重要作用。

关键词：组织工程细胞归巢牙髓再生基质细胞衍生因子-1 CXC趋化因子受体4 抗SDF-1抗体牙髓血运重建