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乌司他丁对肠道上皮细胞屏障损伤的保护作用分析

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临床荟萃 2017年第11期32卷 953-956页

作者：李永胜马晓峰甘肃省人民医院急诊科甘肃兰州730000 国营长风机器厂职工医院内科甘肃兰州730000

目的探讨乌司他丁(UTI)对肠道上皮细胞屏障损伤的保护作用及其机制。方法培养Caco-2细胞,并建立肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的单层上皮细胞模型,随机分为空白对照组、TNF-α模型组、UTI低剂量组(5万U/kg)、UTI中剂量组(10万U/kg)、UTI... 详细信息

目的探讨乌司他丁(UTI)对肠道上皮细胞屏障损伤的保护作用及其机制。方法培养Caco-2细胞,并建立肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的单层上皮细胞模型,随机分为空白对照组、TNF-α模型组、UTI低剂量组(5万U/kg)、UTI中剂量组(10万U/kg)、UTI高剂量组(20万U/kg)。采用Millicell电阻仪和多功能读板仪分别测定各组上皮细胞电阻(TER)和异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran),酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平,流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫蛋白质印记(Western blot)技术测定紧密连接蛋白闭合蛋白(occludin)和紧密黏连蛋白1(ZO-1)表达水平。结果与空白对照组相比,TNF-α模型组TER、FITC-dextran、occludin和ZO-1表达水平均明显下降,IL-6、IL-10、细胞凋亡率明显升高(P细胞凋亡率降低(P细胞屏障功能损伤。

关键词：肠细胞屏障肿瘤坏死因子α 乌司他丁紧密连接蛋白

布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制

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现代生物医学进展 2021年第24期21卷 4641-4645,4636页

作者：郭靖宁朱静张金虎史艳平吉慧西安交通大学附属儿童医院中西医结合科陕西西安710100 西安国际医学中心医院药学部陕西西安710100

目的:探究布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制。方法:30只雄性SD大鼠作为研究对象,并根据实验目的分为3组:对照组(正常大鼠,生理盐水干预,n=10),哮喘组(通过OVA诱导大鼠哮喘模型,n=10),... 详细信息

目的:探究布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制。方法:30只雄性SD大鼠作为研究对象,并根据实验目的分为3组:对照组(正常大鼠,生理盐水干预,n=10),哮喘组(通过OVA诱导大鼠哮喘模型,n=10),布地奈德组(气雾剂布地奈德用于治疗过敏性哮喘的大鼠,n=10)。通过钙测定试剂盒和蛋白印迹分析大鼠气道上皮细胞中Ca^(2+)的吸收和MCU蛋白表达;TEER和TRITC荧光分析检测大鼠气道上皮中的屏障功能;免疫组化分析分气道上皮细胞屏障功能相关因子ZO-1、E-cadherin的蛋白表达;ELISAF分析BALF上清液中炎性因子IL-4、IL-5和IL-13的水平;二氢乙锭衍生物和蛋白印迹分析BALF中ROS含量和caspase-3活性。结果:哮喘组较对照组Ca^(2+)浓度降低,MCU蛋白表达升高(P细胞浸润(P细胞的屏障完整性和自噬水平,缓解哮喘气道炎症,改善哮喘症状。

关键词：布地奈德 MCU 哮喘大鼠细胞屏障自噬

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纳米载体逃逸溶酶体机制及其调控的研究进展

吉林大学学报（医学版） 2017年第4期43卷 845-848页

作者：孙茂蕾徐晓薇顾中一刘杰高雪彬孟许亚孙宏晨吉林大学口腔医院病理科吉林长春130021 吉林大学口腔医院牙周病科吉林长春130021

纳米载体传递药物或核酸进入细胞,要穿透细胞膜,逃逸溶酶体并进入细胞核,其中逃逸溶酶体是纳米载体发挥作用的关键步骤。近年来,国内外许多学者根据纳米载体逃逸溶酶体的机制,利用大分子对现有纳米载体进行修饰或合成新型纳米载体。本... 详细信息

纳米载体传递药物或核酸进入细胞,要穿透细胞膜,逃逸溶酶体并进入细胞核,其中逃逸溶酶体是纳米载体发挥作用的关键步骤。近年来,国内外许多学者根据纳米载体逃逸溶酶体的机制,利用大分子对现有纳米载体进行修饰或合成新型纳米载体。本文作者就纳米载体进入细胞的屏障、逃逸溶酶体机制及根据逃逸机制对其进行修饰调控3个方面做进行分析和综述。

关键词：纳米载体细胞屏障逃逸溶酶体修饰调控

全氟壬烯氧基苯磺酸钠暴露对人源结肠癌细胞通透性的影响

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环境与健康杂志 2023年第3期 219-225页

作者：王彩云李桂霞靳远祥长治医学院公共卫生与预防医学系职业与环境卫生教研室山西长治046000 长治医学院基础医学系形态综合实验室浙江工业大学生物工程学院生物技术系

目的探究全氟壬烯氧基苯磺酸钠(OBS)对人源结肠癌细胞系(CaCo2细胞)的毒性以及引起细胞通透性和屏障改变的可能因素。方法将对数期生长的CaCo2细胞分别暴露于含0.0(对照)~25.0 mg/L OBS低糖DMEM培养基染毒24 h和48 h,采用CCK-8法测定细... 详细信息

目的探究全氟壬烯氧基苯磺酸钠(OBS)对人源结肠癌细胞系(CaCo2细胞)的毒性以及引起细胞通透性和屏障改变的可能因素。方法将对数期生长的CaCo2细胞分别暴露于含0.0(对照)~25.0 mg/L OBS低糖DMEM培养基染毒24 h和48 h,采用CCK-8法测定细胞活性。将对数期生长的CaCo2细胞分别暴露于含0.0(对照)~5.0 mg/L OBS低糖DMEM培养基染毒24 h和48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定细胞中黏蛋白2(MUC2)、紧密连接蛋白1(TJP1)、闭合蛋白1(CLDN1)、咬合蛋白(OCCLUDIN)、凋亡相关基因和炎性相关基因的m RNA表达水平,采用蛋白印迹(WB)法检测TJP1、CLDN1、OCCLUDIN和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(CASPASE9)蛋白的表达水平。结果与对照组相比,5.0~25.0 mg/L OBS染毒组CaCo2细胞的存活率较低,差异有统计学意义(P细胞的存活率均无明显改变。与对照组相比,5.0 mg/L OBS染毒24 h时CaCo2细胞中MUC2、CLDN1 mRNA的表达水平和0.1、1.0 mg/L OBS染毒48 h时细胞中OCCLUDIN mRNA的表达水平及各浓度OBS染毒48 h时细胞中MUC2mRNA的表达水平较低,而各浓度OBS染毒48 h时细胞中CLDN1 m RNA的表达水平及5.0 mg/L OBS染毒48 h时细胞中OCCLUDIN mRNA的表达水平较高,差异均有统计学意义(P细胞中CLDN1蛋白表达水平和0.1 mg/L OBS染毒24 h、48 h时TJP1蛋白表达水平较高,而5.0 mg/L OBS染毒24 h、48 h时细胞中TJP1蛋白表达水平较低,差异均有统计学意义(P细胞中基因CASPASE9的表达mRNA表达水平下降,差异有统计学意义(P细胞中基因肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素-22(IL-22)的mRNA表达水平、0.1和1.0 mg/L OBS染毒48 h时白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达水平、以及5.0 mg/L OBS染毒48 h时细胞中基因核因子κB(NFκB)、TNFα、toll样受体4(TLR4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、IL-22的mRNA表达水平均增加,差异有统计学意义(P细胞活性,减少黏蛋白MUC2的正常表达以破坏细胞间的紧密连接,并且激活细胞中炎性相关基因,表明OBS对细胞通透性和细胞屏障的影响可能与细胞中免疫调控激活有关。

关键词：全氟壬烯氧基苯磺酸钠 CaCo2细胞细胞通透性细胞屏障免疫调控

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体外血脑屏障的建立

山东医药 2016年第27期56卷 28-30页

作者：李联平蒋莹海军总医院北京100048 北京市肛肠医院

目的利用大鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞于体外建立血脑屏障。方法分别取10只出生7-10 d、2只出生1-3 d的SD大鼠,断头处死后取脑组织,分别分离培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,采用免疫细胞染色方法鉴定脑微血管内皮细胞,以脑... 详细信息

目的利用大鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞于体外建立血脑屏障。方法分别取10只出生7-10 d、2只出生1-3 d的SD大鼠,断头处死后取脑组织,分别分离培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,采用免疫细胞染色方法鉴定脑微血管内皮细胞,以脑微血管內皮细胞因子Ⅷ作为标记抗原,以神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）作为标记抗原鉴定星型胶质细胞。以非接触方式共培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞的方法建立体外血脑屏障。接种12 d将电极插入待测Transwell小室（培养模型）、细胞培养液、空白Transwell小室（细胞培养液为媒介）。测定跨膜电阻、测算荧光素钠渗透系数（Pe）,衡量模型完整性。结果接种12 d时,模型、细胞培养液、空白Transwell小室的电阻值分别为180、64、112Ω/cm^2。接种12 d时模型Pe为（4.67±0.4）×10^6cm/s。结论成功建立体外血脑屏障,屏障效应较好、完整性较高。

关键词：血脑屏障细胞屏障动物实验大脑脑微血管内皮细胞星型胶质细胞

植物乳杆菌Y44对人肠上皮细胞模型Caco-2抗氧化功能的影响

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植物乳杆菌Y44对人肠上皮细胞模型Caco-2抗氧化功能的影响

作者：李唤宇大连工业大学

学位级别：硕士

活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)在人体内不断生成并参与许多生理代谢行为,而ROS介导的氧化应激与人类多种疾病的发生密切相关,其中,炎症是最为常见的疾病。乳杆菌属细菌是人们熟悉的微生物,具有悠久的使用历史,某些乳杆菌属细菌... 详细信息

活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)在人体内不断生成并参与许多生理代谢行为,而ROS介导的氧化应激与人类多种疾病的发生密切相关,其中,炎症是最为常见的疾病。乳杆菌属细菌是人们熟悉的微生物,具有悠久的使用历史,某些乳杆菌属细菌及其参与的发酵食品(如酸奶,酸菜等)等被证明具有良好的益生功能,包括抗氧化功能和抗炎功能等。在我们的前期工作中,已筛选获得具有抗氧化活性的乳杆菌菌株植物乳杆菌Y44(Lactobacillus plantarum Y44)。本研究首先通过一些化学抗氧化方法,包括DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基清除实验,铁离子还原(Ferric ion Reducing Antioxidant Power,FRAP)实验和氧自由基吸收(Oxygen Radical Absorption Capacity,ORAC)实验,以及细胞抗氧化活性(Celler Antioxidant Activity,CAA)和偶氮二异丁脒盐酸盐(ABAP)损伤的Caco-2细胞模型,进一步研究***44的抗氧化活性。实验结果表明***44可有效清除氧自由基,化学抗氧化结果、CAA实验结果与***44菌浓度进行相关性分析发现***44的抗氧化活性与菌浓度呈正相关(p细胞具有一定的损伤作用;当***44菌株作用浓度为10 cfu/mL时表现出最高的CAA值、并可显著提高ABAP氧化损伤Caco-2细胞的存活率;化学抗氧化实验结果、CAA实验结果与***44保护Caco-2细胞免受ABAP损伤的结果具有一致性。*** Y44菌株可通过上调Caco-2细胞β-Catenin和E-Cadherin蛋白表达量增强Caco-2细胞的屏障功能,防止ABAP对Caco-2细胞的损伤,扫描电镜结果表明*** Y44保护了Caco-2细胞在氧化应激状态下的完整性。*** Y44菌株显著下调ABAP诱导Caco-2细胞促炎因子IL-8和TNF-α的表达(p细胞NF-κB p65蛋白核转位以及IκB蛋白泛素化降解(p细胞炎症。*** Y44菌株可显著促进Caco-2细胞Nrf2信号通路相关蛋白Nrf2蛋白和HO-1蛋白的表达(p细胞过氧化氢酶(CAT)的表达(p细胞的Nrf2信号传导途径相关蛋白的表达发挥抗氧化作用,从而提高人肠上皮细胞模型Caco-2细胞的抗氧化功能。

关键词：乳杆菌抗氧化 Nrf2-ARE信号通路细胞屏障炎症

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聚苯乙烯微塑料致肠道炎症的毒性效应研究

聚苯乙烯微塑料致肠道炎症的毒性效应研究

中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议

作者：宋妍肖甜卞倩中国药科大学药物科学研究院江苏省疾病预防控制中心毒理与风险评估研究所

目的探讨鞘脂代谢通路(SPHK/S1P)中特异性激活S1PR1受体破坏细胞屏障在聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)致小鼠结肠炎症中的作用及其机制。材料与方法将8周龄雄性C57BL/6 J小鼠随机分为对照组、PS-MPs低剂量组(0.5 mg/kg/d)、PS-MPs中剂量组(5 mg... 详细信息

目的探讨鞘脂代谢通路(SPHK/S1P)中特异性激活S1PR1受体破坏细胞屏障在聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)致小鼠结肠炎症中的作用及其机制。材料与方法将8周龄雄性C57BL/6 J小鼠随机分为对照组、PS-MPs低剂量组(0.5 mg/kg/d)、PS-MPs中剂量组(5 mg/kg/d)、PS-MPs高剂量组(50mg/kg/d)、DSS结肠炎模型组(采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立溃疡性结肠炎模型)、DSS结肠炎模型加PS-MPs高剂量组。对PS-MPs染毒组小鼠灌胃不同浓度粒径为2.5μm的PS-MPs共28天,实验期间观测小鼠体重及粪便等一般情况,进行疾病活动指数(DAI)评分。染毒结束后,H&E染色观察结肠组织病理情况,检测血清及结肠组织中S1P、TNF-α、IL-6、IL-8水平。用0、100、200、400μg/mL2.5μm粒径PS-MPs处理小鼠肠道上皮Caco-2细胞48 h,检测Caco-2细胞活力、ROS含量、GSH含量等指标,ELISA检测细胞培养液中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8水平;qRT-PCR、Westernblot检测鞘脂代谢及细胞屏障相关基因及蛋白S1PR1、claudin-1、occludin表达水平。结果体内实验发现,与对照组相比,PS-MPs高剂量组小鼠出现肠道屏障损伤,结肠组织粘膜上皮损伤、隐窝数量减少、粘膜下层和肌层伴有炎性细胞浸润;小鼠血清中相关炎症因子水平显著提高(P屏障。体外实验发现,随着PS-MPs染毒浓度增加,Caco-2细胞活力下降,S1PR1、claudin-1、occludin表达水平逐渐升高(P细胞屏障,引起肠道损伤并加剧结肠炎症的发生发展。

关键词：聚苯乙烯微塑料 S1P 细胞毒性细胞屏障结肠炎症

来源： cnki会议评论

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运动维护人体屏障功能的AMPK途径探究

体育科技文献通报 2024年第9期32卷 271-274页

作者：杨谦慧山西师范大学体育学院山西太原030031

运动作为一种积极调节人体能量代谢的重要方式,与人体屏障功能完整密切相关。截至目前,鲜有运动维护人体屏障功能相关代谢途径的研究文献。基于此,本文通过科学严谨的实验数据和实际生活案例对合理运动维护人体皮肤屏障、血脑屏障、免... 详细信息

运动作为一种积极调节人体能量代谢的重要方式,与人体屏障功能完整密切相关。截至目前,鲜有运动维护人体屏障功能相关代谢途径的研究文献。基于此,本文通过科学严谨的实验数据和实际生活案例对合理运动维护人体皮肤屏障、血脑屏障、免疫屏障、肠屏障、细胞屏障的作用原理进行阐述,然后针对国内外与运动维护人体屏障功能的AMPK信号通路相关的研究进行梳理。研究发现,运动维护屏障功能的AMPK途径在人体中广泛存在,并且单次运动或多次运动均可激活AMPK,从而维护人体屏障功能,但过量运动或可损坏屏障完整。本文旨在揭示运动促进人体健康的潜在生物逻辑,深化对科学运动促进人体健康机理的认识,有助于激发人们参与运动的热情,进而提升现代人的健康生活品质。

关键词：运动 AMPK 人体皮肤屏障血脑屏障免疫屏障肠屏障细胞屏障作用机理

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荧光成像的进展:药剂学的机会

国外医学（药学分册） 2005年第2期32卷 142-142页

作者：卞广兴