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急性白血病细胞因子表达谱分析及白介素-3受体异构体表达研究

急性白血病细胞因子表达谱分析及白介素-3受体异构体表达研究

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作者：黄家福福建医科大学

学位级别：硕士

造血细胞的生长、增殖、分化和凋亡受体内正、负两大类调控因子组成的调控网络的调控。正调控因子有IL‐1、IL‐3、IL‐6、GM‐CSF和G‐CSF等;负调控因子有TGF‐β、TNF‐α、IFN‐γ等。正调控因子促进造血细胞的增殖和分化，负调控因... 详细信息

造血细胞的生长、增殖、分化和凋亡受体内正、负两大类调控因子组成的调控网络的调控。正调控因子有IL‐1、IL‐3、IL‐6、GM‐CSF和G‐CSF等;负调控因子有TGF‐β、TNF‐α、IFN‐γ等。正调控因子促进造血细胞的增殖和分化，负调控因子抑制造血细胞的增殖，诱导细胞凋亡。急性白血病是造血系统的恶性肿瘤，以细胞过度增殖、分化凋亡受阻为特征。因此，造血调控因子在其中起重要作用。我们前期发现白血病细胞系表达多种正性细胞因子及其受体。这些细胞因子通过自分泌或旁分泌环节，刺激白血病细胞增殖，抑制白血病细胞凋亡。有关细胞因子在急性白血病的表达及其意义有零星报道，但系统研究这些细胞因子在正常人或急性白血病患者的表达水平，目前未见报道。为比较全面研究急性白血病患者造血调控因子表达水平，我们采用蛋白质芯片以及Elisa技术，检测57例急性白血病患者血清IL-1β、Il-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-12、IL-13、IL-17、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、MCP-1、MIP-1β、TNF-α和IL-3等细胞因子的含量，以13例正常人血清样本作为对照，比较急性白血病，包括急性淋巴细胞性白血病和急性髓系白血病患者这些因子与正常人之间的表达差异及意义。 IL‐3是多向集落刺激因子，能够促进多能造血干细胞增殖及向髓系干细胞和髓系各前体祖细胞分化。IL‐3通过与细胞表面受体（IL‐3R）结合发挥生物学功能。IL‐3R由IL‐3Rα和β共同亚基组成。我们及国外研究均表明，急性髓系白血病和急性B淋巴细胞白血病高表达IL‐3Rα，高表达IL‐3Rα的急性髓系白血病病人表现为高白细胞和幼稚细胞比例高，这些病人的临床缓解率低、复发率高，无病生存期短，预后差。最近我们的国际合作方研究发现了人和鼠IL-3Rα均存在两种不同的异构体：将传统的IL-3Rα称为SP1;将新发现的缺失N-末端Ig样结构域的IL-3Rα，称为SP2。体外实验表明表达人IL-3RαSP1的鼠FDCP-mix细胞主要表现出自我更新增殖能力，而表达人IL-3RαSP2的鼠FDCP-mix细胞则表现出分化能力。提示，SP1、SP2分别介导不同的细胞信号转导效应。SP1在急性白血病中的表达已见诸报导，而SP2在急性白血病患者中的表达情况目前尚不清楚。本研究采用荧光定量RT-PCR技术检测hIL-3Rα两个异构体SP1、SP2在人急性白血病细胞中的表达情况。取得以下结果。 ***患者IL‐4,IL‐5,IL‐7,IL‐12,GM‐CSF,IFN‐γ,IL‐3水平低于正常;IL‐10,MCP‐1,TNF‐α水平高于正常;IL‐1β,IL‐6,IL‐8,IL‐13,IL‐17,G‐CSF,MIP‐1β水平与正常人差异无统计学意义（P＞0.05）。 ***患者血清IL‐7,IFN‐γ,IL‐12,IL‐3低于正常;IL‐10,MCP‐1水平高于正常;IL‐1β,IL‐4,IL‐5,IL‐6,IL‐8,IL‐13,IL‐17,G‐CSF,MIP‐1,GM‐CSF,TNF‐α水平与正常人差异无统计学意义（P＞0.05）。 3. IL‐1β水平与AML患者幼稚细胞比例成正性相关;IL‐6水平与AML患者白细胞计数成正性相关;IL‐12,IFN‐γ水平与ALL患者白细胞计数及外周幼稚细胞比例成负性相关;IL‐4,IL‐7水平与AL患者血小板计数成正性相关;MIP‐1β水平与AL患者白细胞计数成正性相关。 ***患者IL‐3RαSP1,SP2表达水平均高于正常，且SP1水平高于SP2。结论： 1.急性白血病患者存在细胞因子表达谱差异，特定细胞因子的表达水平与急性白血病患者的外周血白细胞计数、幼稚细胞比例和血小板计数密切相关。 2.急性白血病患者IL‐3RαSP1,SP2表达水平均高于正常，SP1表达水平高于SP2。

关键词：细胞因子蛋白质芯片 IL‐3R 急性白血病

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