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色素上皮衍生因子对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸代谢的影响

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中华眼底病杂志 2011年第3期27卷 226-230页

作者：沈玺焦秦钟一声谢冰上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科上海200025

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸代谢的影响。方法Sprague_Dawley大鼠78只，分为模型组、模型对照组、PEDF干预组（干预组）、干预对照组，实验结束时去除血糖恢复鼠和实验期间死亡鼠，每组以12只大鼠作为... 详细信息

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸代谢的影响。方法Sprague_Dawley大鼠78只，分为模型组、模型对照组、PEDF干预组（干预组）、干预对照组，实验结束时去除血糖恢复鼠和实验期间死亡鼠，每组以12只大鼠作为统计样本。模型组、干预组、干预对照组大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。模型组大鼠不作任何干预，模型对照组为相同月龄的正常大鼠。干预组大鼠左眼玻璃体腔注射0．1μg／μl的PEDF5．0μl，干预对照组大鼠左眼玻璃体腔注射相同容积的磷酸盐缓冲液。采用蛋白免疫印迹法（Western bolt）和实时荧光聚合酶链式反应（PCR）法检测视网膜L-谷氨酸-L-门冬氨酸转运体（GLAsT）表达的变化，高压液相色谱法（HPLC）观察视网膜谷氨酸的含量变化。将体外培养的大鼠视网膜Müller细胞随机分为对照组、实验组、PEDF干预组（干预组）和干预对照组，荧光免疫法和实时荧光PCR法检测Müller细胞GLAST表达的改变，根据[＾3HI标记的D，L－谷氨酸摄人量判断Müller细胞的摄取功能。结果实时荧光PCR法和Western bolt检测结果显示，相对于模型对照组大鼠，模型组大鼠视网膜GI。AST表达降低（实时荧光PCR法：t一8．86，P〈0．01；Westernblot：t：3．42，P〈0．05），视网膜谷氨酸含量升高（f一4．01，P〈O．05）；干预组大鼠视网膜GLAST表达与干预对照组视网膜GI。AST表达比较，干预组大鼠视网膜GLAST的表达升高（实时荧光PCR法：t一3．56，P％0．05；Westernblot：￡一3．52，P〈0．05）；视网膜谷氨酸含量下调（f：4．36，P-（0．05）。实时荧光PCR法和荧光免疫法检测结果显示，高糖可以降低视网膜Müller细胞GLAST的表达（实时荧光PCR法：t=3．48，P＜0．05；荧光免疫法：t=4．72，P＜0．05）；[^3HI标记的D，L-谷氨酸摄人量结果显示，高糖可以下调视网膜Müller细胞GI。AST的功能（t=3．81，P〈0．05）；经PEDF处理后，可以明显改善高糖状态下视网膜Müller细胞GLAST的表达（实时荧光PCR法：t=6．82，P〈0．01；荧光免疫法：t=3．72，P〈0．05）和对谷氨酸的摄取功能（t=4．14，P＜0．05）。结论PEDF可通过改善糖尿病大鼠视网膜Müller细胞中GLAST功能从而改善谷氨酸循环，抑制神经节细胞的死亡。

关键词：糖尿病视网膜病变/病理生理学细胞因子类/生理学谷氨酸/代谢糖尿病实验性

炎性细胞因子对色素上皮细胞衍生因子表达的影响

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中华眼底病杂志 2008年第6期24卷 440-443页

作者：张忠红栾洁东南大学附属中大医院眼科南京210009

目的观察肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素（IL）-6、IL-8等炎性细胞因子对视网膜色素上皮细胞衍生因子（PEDF）表达的影响。方法原代培养人视网膜色素上皮（RPE）细胞，取3～5代细胞分别以浓度为20．00、2．00、0．20、0．02ng／ml... 详细信息

目的观察肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素（IL）-6、IL-8等炎性细胞因子对视网膜色素上皮细胞衍生因子（PEDF）表达的影响。方法原代培养人视网膜色素上皮（RPE）细胞，取3～5代细胞分别以浓度为20．00、2．00、0．20、0．02ng／ml的TNF—α、IL-6、IL-8干预6、12、24、48h，蛋白免疫印迹方法检测培养液中PEDF蛋白质的表达水平。结果TNF—α、IL-6、IL-8对人RPE细胞PEDF的分泌均有抑制作用，并且其抑制作用随着3种炎性细胞因子浓度的增加和作用时间的延长而增强；在浓度0．02ng／ml、作用时间6h（F=7．14，P〈0．05），浓度2．00ng／ml、作用时间48h（F=14．05，P〈0．01），浓度20．00ng／ml、作用时间24h（F=11．53，P〈0．01）3种作用条件下，对PEDF分泌抑制作用的差异具有统计学意义，其中TNF—α干预组PEDF的表达量最低，对人RPE细胞PEDF的分泌抑制作用最明显（F=14，P〈0.01）。结论TNF-α、IL-6、IL-8能够下调体外培养的人RPE细胞PEDF蛋白质的表达。

关键词：细胞因子类/生理学色素上皮眼趋化因子CXCL12

细胞因子诱导的子宫平滑肌细胞生物学特性变化

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安徽医科大学学报 2008年第5期43卷 515-519页

作者：李彩荣凌斌冯定庆周颖李敏安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室合肥230001

目的观察人正常子宫平滑肌细胞经细胞因子刺激后生物学特性变化,探讨细胞因子在子宫肌瘤发病中的作用。方法分离培养健康育龄妇女外周血单个核细胞,经十二蔻佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)联合刺激获取富含细胞因子的条件培养液... 详细信息

目的观察人正常子宫平滑肌细胞经细胞因子刺激后生物学特性变化,探讨细胞因子在子宫肌瘤发病中的作用。方法分离培养健康育龄妇女外周血单个核细胞,经十二蔻佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)联合刺激获取富含细胞因子的条件培养液,后者与人正常子宫平滑肌细胞建立共培养体系。采用免疫荧光观察雌激素受体α(ER-α)表达,MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR法检测纤连蛋白(Fibronectin,FN)和胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)mRNA表达量,比较刺激前后细胞的生物学特性变化。结果细胞因子刺激组ER-α及细胞外基质FN和Collagen-ⅠmRNA表达水平增多,与未刺激人正常子宫平滑肌细胞组比较差异有显著性(P细胞组比较差异无显著性(P>0.05);细胞增殖能力三组细胞间差异无显著性(P>0.05)。结论细胞因子诱导人正常子宫平滑肌细胞生物学特性发生肌瘤细胞样改变;子宫腔局部细胞因子水平在子宫肌瘤发病中起重要作用。

关键词：平滑肌瘤/病理生理学细胞外基质/生理学细胞因子类/生理学子宫肿瘤/病理生理学

色素上皮衍生因子对糖尿病大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶表达的影响

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中华眼底病杂志 2010年第2期26卷 155-159页

作者：沈玺焦秦钟一声谢冰上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科 200025

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对糖尿病大鼠视网膜Muller细胞谷氨酰胺合成酶（GS）表达的影响.方法将Sprague-Dawley大鼠分为模型组、模型对照组、PEDF干预组（干预组）、干预对照组,每组均为8只大鼠.模型组、干预组、干预对照组... 详细信息

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对糖尿病大鼠视网膜Muller细胞谷氨酰胺合成酶（GS）表达的影响.方法将Sprague-Dawley大鼠分为模型组、模型对照组、PEDF干预组（干预组）、干预对照组,每组均为8只大鼠.模型组、干预组、干预对照组大鼠链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型.模型组大鼠不作任何干预,模型对照组为相同月龄的正常大鼠,干预组大鼠左眼玻璃体腔注射0.1 μg/μl的PEDF10 μl,干预对照组大鼠左眼玻璃体腔注射相同容积的磷酸盐缓冲液.采用免疫组织化学法和实时荧光聚合酶链反应（PCR）法检测视网膜GS和白细胞介素-1β（IL-1β）的表达变化.将视网膜Muller细胞置于高糖环境下培养,实验干预组中加入100 ng/ml PEDF,空白对照组加入相同容积的培养液,24 h后通过蛋白质免疫印迹（Western blot）法和实时荧光PCR法检测PEDF对Mailer细胞GS和IL-1β表达的改变.流式细胞仪锚定蛋白-异硫氰酸荧光素和碘化丙啶（Annexin V-FITC-PI）双染色法检测100ng/mlPEDF对高糖状态下Muller细胞凋亡的影响.结果实时荧光PCR法从基因水平和免疫组织化学法从蛋白质水平检测均显示,相对于模型对照组大鼠,模型组大鼠视网膜GS表达降低,而IL-1β的表达升高,实时荧光PCR法：GS t=4.23,P〈0.01 IL-1β：t=16.73,P〈0.01 免疫组织化学法：GS：t=5.13,P〈0.01 IL-1β：t=9.32,P〈0.01 干预组大鼠玻璃体腔注射PEDF 48 h后,IL-1β的表达下降,GS的表达升高,与干预对照组比较,实时荧光PCR法：GS：t=3.87,P〈0.01 IL-1β：t=3.61,P〈0.05 免疫组织化学法：GS：t=3.32,P〈0.05 IL-1β：t=2.63,P〈0.05.在高糖环境下,通过实时荧光PCR法和Western bot法检测均显示PEDF可以下调IL-1β的表达,而上调GS的表达,与空白对照组比较,实时荧光PCR法：GS：t=2.89,P〈0.05 IL-1β：t=3.37,P〈0.05 Western blot：GS：t=2.66,P〈0.05 IL-1β：t=3.23,P〈0.05.流式细胞仪检测结果显示,PEDF可以抑制高糖环境下Muller细胞的凋亡,实验组凋亡率与空白对照组凋亡率比较,差异有统计学意义（t=3.21,P〈0.05）.结论对于糖尿病大鼠,PEDF可能通过下调视网膜Muller细胞中IL-1β的表达来上调GS的表达,从而改善谷氨酸循环,抑制神经节细胞的死亡.

关键词：糖尿病视网膜病变/病理生理学细胞因子类/生理学谷氨酸合酶/生理学糖尿病,实验性

妊娠期糖尿病血清脂联素水平与胰岛素抵抗的关系

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中国医师杂志 2006年第12期8卷 1627-1628页

作者：何东华刘涛郑明旭徐涛成山东省聊城市第二人民医院内分泌科山东临清252601 山东省夏津县人民医院

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)孕妇血清脂联素与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法采用稳态模型评估法(HOMA)分别评估48例GDM孕妇和40例正常糖耐量(NGT)孕妇的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);利用放免法检测2组孕妇的血清脂联素水平。结果⑴GDM组HOMA-IR... 详细信息

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)孕妇血清脂联素与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法采用稳态模型评估法(HOMA)分别评估48例GDM孕妇和40例正常糖耐量(NGT)孕妇的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);利用放免法检测2组孕妇的血清脂联素水平。结果⑴GDM组HOMA-IR显著高于NGT组(P<0.01);⑵GDM组血清脂联素水平显著低于NGT组(P<0.01);⑶多元回归分析提示IR I、孕晚期体重指数(BM I)是影响血清脂联素水平的最显著因素(P<0.05)。结论GDM孕妇血清脂联素水平显著降低,其脂联素水平的改变与IR相关。

关键词：糖尿病,妊娠病/病理生理学胰岛素抗药性细胞因子类/生理学