检索结果-南通市图书馆

作者：徐向红兰州大学

学位级别：硕士

目的1．对脐血中有核红细胞性状进行研究，探讨从孕妇外周血中富集胎儿有核红细胞的有效方法，为进行无创性产前诊断提供科学依据。2．探讨利用孕妇尿液中游离DNA进行性连锁遗传病产前诊断的可行性研究。方法1．对脐血进行液体、半固体... 详细信息

目的1．对脐血中有核红细胞性状进行研究，探讨从孕妇外周血中富集胎儿有核红细胞的有效方法，为进行无创性产前诊断提供科学依据。2．探讨利用孕妇尿液中游离DNA进行性连锁遗传病产前诊断的可行性研究。方法1．对脐血进行液体、半固体培养，以期获得脐血中胎儿有核红细胞(Fetal Nuclear Red Blood Cells，FNRBC)进行细胞基本性状研究;用聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Difluoride，PVDF)膜对淋巴细胞、单核细胞、有核红细胞进行分离;脐血单个核细胞微环境改变对PVDF膜富集胎儿有核红细胞效率的影响。2．将42例孕妇尿液进行离心富集后提取游离DNA作为模板，以Y染色体短臂上的特异序列(SRY基因)为扩增对象，用套式聚合酶链反应(Nested-PCR)技术对其进行扩增，产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果1．联苯胺染色和K-B染色法都能够将NRBC同其他单个核细胞区分开来，而K-B染色可以进一步将NRBC和FNRBC进行区分;71份样本中NRBC的占有比例不均，范围在1％～54％，平均在8％左右;脐血的液体培养经流式细胞仪检测，得率最大为20％，细胞培养效果有待探讨。2．在检测的42例孕妇尿液中32例孕妇尿液中检出SRY基因片段，与其相对应的血浆及血细胞亦检出SRY基因片段。10例未检出SRY基因片段，与其相对应的血浆及血细胞也未检出SRY基因片段。结论1．聚偏二氟乙烯膜可用来分离脐血中淋巴细胞、单核细胞、有核红细胞、红细胞。脐血中单个核细胞微环境的改变可以提高有核红细胞通过聚偏二氟乙烯膜的效率，2．孕妇尿液中确实存在胎儿游离DNA，经富集提取DNA，通过套式PCR法进行胎儿性别判定，为非侵入性早期产前诊断性连锁遗传病及其它疾病奠定了基础。

关键词：胎儿有核红细胞流式细胞仪密度梯度离心离子通道细胞分离液产前诊断 PVDF膜微环境尿液游离DNA 巢式PCR

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Percoll分离法联合MALDI-TOF MS直接鉴定血培养专性厌氧菌阳性标本的应用价值

引用

国际检验医学杂志 2021年第19期42卷 2324-2328页

作者：梁林幸雯张京陆必超丁秀荣刘志忠首都医科大学康复医学院北京100069 中国康复研究中心北京博爱医院检验科北京100068 首都医科大学附属北京佑安医院检验科北京100069

目的评价Percoll分离法联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定血培养专性厌氧菌阳性标本中的应用价值。方法收集2018年3月至2020年9月血培养中单独厌氧瓶阳性标本,用Percoll分离法和十二烷基硫酸钠(SDS)洗涤法两... 详细信息

目的评价Percoll分离法联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定血培养专性厌氧菌阳性标本中的应用价值。方法收集2018年3月至2020年9月血培养中单独厌氧瓶阳性标本,用Percoll分离法和十二烷基硫酸钠(SDS)洗涤法两种方法对标本进行菌体富集和纯化处理,采用MALDI-TOF MS对标本进行直接鉴定,以转种后菌落鉴定结果为标准,对两种不同前处理方法的鉴定准确率进行比较。结果共有71份血培养专性厌氧菌阳性标本纳入研究,采用Percoll分离法处理标本,专性厌氧菌“种”水平鉴定准确率为84.5%,其中革兰阴性菌的“种”水平鉴定准确率为80.0%,革兰阳性菌的“种”水平鉴定准确率为87.8%。采用SDS洗涤法处理标本,专性厌氧菌的“种”水平鉴定准确率为60.6%,其中革兰阴性菌的“种”水平鉴定准确率为46.7%,革兰阳性菌的“种”水平鉴定准确率为70.7%。与SDS洗涤法相比,采用Percoll分离法处理标本明显提高了MALDI-TOF MS对革兰阴性菌的鉴定准确率(χ^(2)=7.177,P=0.007)。结论使用Percoll分离法处理血培养专性厌氧菌阳性标本,用于MALDI-TOF MS直接鉴定,可明显提高专性厌氧菌特别是革兰阴性厌氧菌的鉴定准确率,且操作简便,成本低,适合在临床微生物实验室中应用。

关键词：十二烷基硫酸钠细胞分离液基质辅助激光解析电离飞行时间质谱血培养厌氧菌

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