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基于动态光镊技术的卵巢癌SKOV3细胞凋亡检测

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中国激光 2014年第11期41卷 108-112页

作者：张聿全吴晓静王弋嘉闵长俊朱思伟袁小聪南开大学现代光学研究所天津300071 天津市人民医院天津300191 深圳大学光电工程学院微纳光学研究所广东深圳518060

化学疗法治疗癌症的主要机制是通过药物调控使无限增殖的癌细胞恢复到正常凋亡,因而实时检测用药过程中癌细胞的凋亡情况对于临床治疗具有重要意义。以卵巢癌SKOV3细胞作为研究对象,针对治疗药物(顺铂)不同浓度培养液的条件下,利用搭建... 详细信息

化学疗法治疗癌症的主要机制是通过药物调控使无限增殖的癌细胞恢复到正常凋亡,因而实时检测用药过程中癌细胞的凋亡情况对于临床治疗具有重要意义。以卵巢癌SKOV3细胞作为研究对象,针对治疗药物(顺铂)不同浓度培养液的条件下,利用搭建的动态光镊系统在微流控芯片上通过测量捕获效率参数对四组细胞的凋亡情况分别进行检测。实验结果表明,该系统对不同药物浓度培养下SKOV3细胞凋亡情况的检测具有良好效果。与传统的检测手段相比,该系统细胞用量小、耗时短、无需标记、并可实现活体细胞检测,因此为细胞凋亡的临床检测提供了重要指导意义。

关键词：生物光学动态光镊细胞凋亡检测 SKOV3

基于机器学习技术的非染色细胞凋亡检测分类新方法

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中国细胞生物学学报 2019年第7期41卷 1371-1376页

作者：冯婧文撒昱天津大学精仪学院生物医学工程系

细胞凋亡检测和分类在生物医学研究中具有重要意义。该研究目的是在我们多年研究的基础上建立了一种基于偏振衍射成像流式细胞检测系统和机器学习技术的凋亡检测新方法,具有更高的时间效率和更好的应用前景。化学诱导K562和HL60细胞凋... 详细信息

细胞凋亡检测和分类在生物医学研究中具有重要意义。该研究目的是在我们多年研究的基础上建立了一种基于偏振衍射成像流式细胞检测系统和机器学习技术的凋亡检测新方法,具有更高的时间效率和更好的应用前景。化学诱导K562和HL60细胞凋亡。通过荧光激活细胞分选仪结合荧光双染技术将细胞分为三个亚群:健康细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡/坏死细胞。应用偏振衍射成像流式细胞检测技术采集每个亚群细胞的衍射图像。基于局部二值模式算法提取图像纹理特征生成训练和测试数据集,研究了不同的分类算法,建立凋亡分类模型。对模型性能和时间效率做出对比分析,筛选出具有更高时间效率的模型。新方法可实现90%的分类准确度,并在时间效率上具有优势。该研究成功开发了一种快速的无染色细胞凋亡检测新方法,使检测后的细胞可直接用于后续实验。

关键词：细胞凋亡检测非染色标记衍射图像机器学习

Annexin V-FITC/DAPI细胞凋亡检测法

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生物技术 2020年第4期30卷 352-361页

作者：刘钰妮王世恩汪湘任雪夏燕孙鹏曹春雨三峡大学医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 湖北民族大学附属民大医院风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北三峡职业技术学院湖北宜昌443002

[目的]建立新的荧光染料DAPI与FITC标记Annexin V联合的细胞凋亡流式细胞术检测方法,以用于具有橙红色荧光的药物处理细胞的流式细胞术凋亡检测。[方法]以倒置荧光显微镜成像和流式细胞仪分别检测不同浓度DAPI对活和死细胞的标记作用。... 详细信息

[目的]建立新的荧光染料DAPI与FITC标记Annexin V联合的细胞凋亡流式细胞术检测方法,以用于具有橙红色荧光的药物处理细胞的流式细胞术凋亡检测。[方法]以倒置荧光显微镜成像和流式细胞仪分别检测不同浓度DAPI对活和死细胞的标记作用。以荧光酶标仪检测不同浓度DAPI处理细胞的荧光信号,并进行相关性分析。以流式细胞术比较Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法对无色和含红/橙色荧光药物导致的细胞凋亡。[结果]DAPI标记可用于区分死细胞和活细胞,DAPI标记死细胞的荧光信号和DAPI的浓度呈线性正相关。Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法相比,二者对不含红橙色荧光药物诱导的多种肿瘤细胞的凋亡检测结果无显著差异。与Annexin V-FITC/PI双染法相比,Annexin V-FITC/DAPI双染法可有效避免药物自身荧光与PI通道重合导致的流式检测干扰。[结论]成功建立了新的Annexin V-FITC/DAPI双染法用于细胞凋亡的流式细胞术检测,该方法能够避免具有红、橙色荧光基团的药物对的干扰检测凋亡。

关键词： Annexin V-FITC PI DAPI 流式细胞术细胞凋亡检测

细胞生物学实验课程中两种细胞凋亡检测方法的建立

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高校生物学教学研究（电子版） 2022年第1期12卷 32-36页

作者：吴艳朱玲燕邝栋明中山大学生命科学学院广州510275

细胞凋亡是细胞生命活动的重要过程,然而由于技术与平台等条件的局限,往往难以在细胞生物学实验课程的教学过程中建立有效、多样的细胞凋亡检测方法。通过教学实践探索,确定了两种可在细胞生物学实验课程教学中实际开展的细胞凋亡检测... 详细信息

细胞凋亡是细胞生命活动的重要过程,然而由于技术与平台等条件的局限,往往难以在细胞生物学实验课程的教学过程中建立有效、多样的细胞凋亡检测方法。通过教学实践探索,确定了两种可在细胞生物学实验课程教学中实际开展的细胞凋亡检测方法——DAPI染色荧光显微镜检测和Annexin V/PI染色流式细胞术检测。同时证实,借助科研实验平台及研究生助教制度、可有效解决本科实验教学平台在技术、人员及资源等方面的瓶颈问题,实际提高细胞生物学实验课程教学的水平与质量。上述实验方法探索的模式、思路,以及最终确定的实验条件本身,均可为相关实验课程中"细胞凋亡检测与分析"实验内容的建立提供启发与借鉴。

关键词：细胞生物学实验细胞凋亡检测实验教学 DAPI染色法流式细胞术

单链DNA特异性单克隆抗体的制备及其在细胞凋亡检测中的初步应用

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单链DNA特异性单克隆抗体的制备及其在细胞凋亡检测中的初步应用

基于虚拟仿真技术的细胞凋亡流式检测线上线下混合式教学改革实践

山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会

作者：徐志伟吴国庆李少华冯永堂苗乃法李在连潍坊医学院免疫学教研室潍坊医学院免疫学教研室潍坊医学院免疫学教研室潍坊医学院免疫学教研室潍坊医学院免疫学教研室潍坊医学院免疫学教研室

为了制备抗单链DNA单克隆抗体,建立检测细胞凋亡的新方法,采用杂交瘤细胞融合技术,筛选分泌抗单链DNA抗体的单克隆杂交瘤细胞株,用斑点印迹和竞争ELISA法鉴定单抗的特异性,进而结合免疫组织化学和免疫荧光方法用于检测凋亡细胞。通过筛... 详细信息

为了制备抗单链DNA单克隆抗体,建立检测细胞凋亡的新方法,采用杂交瘤细胞融合技术,筛选分泌抗单链DNA抗体的单克隆杂交瘤细胞株,用斑点印迹和竞争ELISA法鉴定单抗的特异性,进而结合免疫组织化学和免疫荧光方法用于检测凋亡细胞。通过筛选得到单克隆杂交瘤细胞株B17,其分泌的抗体与单链DNA结合而与双链DNA无交叉反应,以此单抗建立的凋亡细胞检测方法能够检测出凋亡细胞,

关键词：细胞凋亡检测单克隆抗体特异性 DNA 初步应用

来源： cnki会议评论

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中国组织化学与细胞化学杂志 2021年第3期30卷 301-306页

作者：陈瑾秦霞黄慧许健浙江中医药大学医学技术与信息工程学院杭州310053

细胞凋亡的流式检测是细胞化学研究重要技术手段,然而流式细胞仪属于大型高精密度复杂仪器,高校实验场地局限、仪器缺乏,教学还处于基本理论知识普及和基础操作示教阶段,学生难以达到灵活应用。为此,本文基于虚拟仿真技术,提出细胞凋亡... 详细信息

细胞凋亡的流式检测是细胞化学研究重要技术手段,然而流式细胞仪属于大型高精密度复杂仪器,高校实验场地局限、仪器缺乏,教学还处于基本理论知识普及和基础操作示教阶段,学生难以达到灵活应用。为此,本文基于虚拟仿真技术,提出细胞凋亡流式检测线上线下混合式教学改革思路。通过开发细胞凋亡流式检测虚拟仿真实验,探索线上虚拟实操,线下重点示教的混合式教学设计,构建双线教学效果评价与质量监控方法,以期提高学生的自主学习能力和综合运用能力,促进细胞化学实验多形式教学内涵建设,彰显“互联网+教学”优势。

关键词：细胞凋亡检测流式细胞术虚拟仿真技术混合式教学改革

DEHP致草鱼肝细胞凋亡的三种检测方法分析

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畜牧兽医科技信息 2024年第10期 49-51页

作者：王淑悦王海彬孙宗仪刘运枫周晓玲东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 仲恺农业工程学院动物科技学院广东省水禽健康养殖重点实验室广东广州5102253 黑龙江省动物疫病预防与控制中心黑龙江哈尔滨150069

为了验证邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)所致细胞凋亡的最佳检测方法,本文以对数生长期的草鱼肝细胞为实验对象,通过3种不同检测方法,即AO/EB染色、Hoechst 33342染色以及Rhodamine123染色来对比研究DEHP对草鱼肝细胞凋亡的影响并比... 详细信息

为了验证邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)所致细胞凋亡的最佳检测方法,本文以对数生长期的草鱼肝细胞为实验对象,通过3种不同检测方法,即AO/EB染色、Hoechst 33342染色以及Rhodamine123染色来对比研究DEHP对草鱼肝细胞凋亡的影响并比较检测方法之间的优缺点。结果显示,在三种染色方法中均可见到草鱼肝细胞凋亡现象。AO/EO染色可区分四种细胞形态,但仅可在细胞悬液状态下使用且EB染料对人体有一定毒害作用。Hoechst 33342染色易区分正常细胞与凋亡细胞,但少数细胞的染色结果会与实际凋亡情况相反,因此该染色方法不应单独使用。Rhodamine123染色对细胞无任何毒性作用可在第一时间提示细胞凋亡的发生,但染色可能与线粒体能量状态无关,染色剂在细胞内保留性差,膜电位的变化也可能由其他因素导致,使测量结果没有指向性。综上所述,三种检测方法均表明DEHP可以诱导草鱼肝细胞凋亡,将对水生生物造成严重威胁。若要真正有效的反映细胞发生凋亡的情况,需结合多种染色方法综合分析。

关键词： DEHP 细胞凋亡检测 AO/EB染色 Hoechst 33342染色 Rhodamine染色

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TAT-Apoptin蛋白制备及其诱导BGC-823细胞的凋亡作用

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南开大学学报（自然科学版） 2015年第5期48卷 33-37页

作者：许鑫仲雨微李其久张保华王瑞琨段大程贲松彬辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036

为了制备单一组分TAT-Apoptin融合蛋白,检测其跨膜及凋亡活性.利用IPTG诱导目的质粒p GEX-6p-1-TAT-Apoptipn及对照质粒p GEX-6p-1-TAT-EGFP和p GEX-6p-1-TAT-Apoptin-EGFP可溶性表达,纯化蛋白并孵育BGC-823细胞,荧光显微镜、DNA ladder、流式细胞术检测融合蛋白跨膜及凋亡活性.结果表明,成功诱导融合蛋白表达,获得单一蛋白,荧光显微镜检测TAT将融合蛋白带入细胞内且不影响其活性,TAT-Apoptin融合蛋白处理BGC-823细胞36和48 h时后出现典型DNA Ladder条带,流式细胞术检测早期凋亡率48 h为61.5%,在24～48 h范围内凋亡率增加.结论为制备的TAT-Apoptin蛋白可跨膜诱导BGC-823细胞凋亡,且具有较高活性.

关键词： Apoptin TAT 细胞凋亡检测

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性别差异在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的机制

性别差异在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的机制

作者：陈琛苏州大学

学位级别：硕士

目的：研究大鼠在心肌缺血再灌注（Ischemia reperfusion, IR）损伤中的性别差异以及造成这种差异的原因。方法：以雌、雄Sprague-Dawley大鼠为研究对象，设立组别分别为雄性空白组、雄性缺血再灌注组、雌性空白组、雌性缺血再灌注... 详细信息

目的：研究大鼠在心肌缺血再灌注（Ischemia reperfusion, IR）损伤中的性别差异以及造成这种差异的原因。方法：以雌、雄Sprague-Dawley大鼠为研究对象，设立组别分别为雄性空白组、雄性缺血再灌注组、雌性空白组、雌性缺血再灌注组，采用Evansblue-triphenyltetrazolium chloride (TTC)染色法测定心肌组织梗死及缺血面积、计算梗死和缺血面积比值、用组织切片染色的方法检测心肌组织中细胞凋亡情况、用Western blot方法检测心肌组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、phospho-p38及自噬相关蛋白LC-3B/LC3A的表达及变化。结果： 1.雌、雄大鼠心肌缺血再灌注后梗死面积与缺血面积的比值 TTC染色显示，给雌、雄大鼠心脏左冠状动脉前降支结扎30min后再灌注24h，心肌组织梗死面积（infarct area）与缺血面积(risk area)比值的平均值雄性大鼠为30.7±3.4％，雌性大鼠为8.1±1.3％，由缺血再灌注诱导的心肌组织损伤，雄性大鼠显著高于雌性大鼠（P细胞凋亡情况细胞凋亡检测（TUNEL法）结果显示，大鼠心肌组织切片染色后在显微镜下观察，可见雄性大鼠凋亡细胞显著多于雌性大鼠（P凋亡相关蛋白的表达及变化情况 3.1雌、雄大鼠心肌缺血再灌注后抗凋亡相关蛋白的表达及变化情况生理状态下，雄性大鼠心肌组织中抗凋亡的Bcl-2表达显著高于雌性大鼠（P0.05）。 3.2雌、雄大鼠心肌缺血再灌注后促凋亡相关蛋白的表达及变化情况生理状态下，雌性大鼠心肌组织中促凋亡的Bax表达和雄性大鼠相比较差别不显著（P>0.05），但缺血30min再灌注24h后，雌性大鼠的Bax表达显著下降（P0.05）。生理状态下，雌、雄性大鼠phospho-p38的表达没有显著区别（P>0.05），缺血再灌注以后雄性大鼠phospho-p38的表达显著升高（P0.05）。 3.3雌、雄大鼠心肌缺血再灌注后抗凋亡相关蛋白Bcl-2与促凋亡相关蛋白Bax比值的变化情况生理状态下，雄性大鼠Bcl-2/Bax的值显著高于雌性大鼠（P凋亡相关蛋白的下降和雌性大鼠促凋亡相关蛋白的下降，以及雌性大鼠高表达的自噬相关蛋白引起的。

关键词：心肌缺血再灌注 TTC染色细胞凋亡检测凋亡相关蛋白自噬相关蛋白 T检验