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细胞凋亡抑制基因免疫对小鼠生长及生长激素的影响

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中国畜牧杂志 2003年第3期39卷 14-15页

作者：叶荣杨利国茆达干姜勋平陈学进南京农业大学动物繁育研究所江苏南京210095 上海第二医科大学发育生物实验室上海200025

本实验用细胞凋亡抑制基因 (bcl- 2 )JLV重组质粒 (JLV -bcl)免疫小鼠 ,测定免疫后小鼠的生长及血浆GH浓度。结果表明 ,经bcl- 2免疫后实验组小鼠体重均低于对照组 ,在 7～ 8周龄时实验A组小鼠体重与对照组存在显著差异 (P <0 .0 5)。用... 详细信息

本实验用细胞凋亡抑制基因 (bcl- 2 )JLV重组质粒 (JLV -bcl)免疫小鼠 ,测定免疫后小鼠的生长及血浆GH浓度。结果表明 ,经bcl- 2免疫后实验组小鼠体重均低于对照组 ,在 7～ 8周龄时实验A组小鼠体重与对照组存在显著差异 (P 基因与小鼠生长有关 ,如果用基因治疗的方法增加bcl-

关键词：细胞凋亡抑制基因免疫小鼠生长生长激素

细胞凋亡抑制基因、β-1，3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的玉米表达载体构建

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细胞凋亡抑制基因、β-1，3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的玉米表达载...

作者：张丁方西北农林科技大学

学位级别：硕士

玉米纹枯病是一种世界范围内发生的土传病害，该病害主要由立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)等土壤习居菌侵染引起,严重影响玉米的产量和质量。近年来，已有不少研究表明，将动物，昆虫及杆状病毒中的细胞凋亡抑制基因转入植物中，这些基... 详细信息

玉米纹枯病是一种世界范围内发生的土传病害，该病害主要由立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)等土壤习居菌侵染引起,严重影响玉米的产量和质量。近年来，已有不少研究表明，将动物，昆虫及杆状病毒中的细胞凋亡抑制基因转入植物中，这些基因表现出类似的抗凋亡作用，从而提高植物抗病抗逆的能力。本研究所用的细胞凋亡抑制基因p35来源于苜蓿斜纹夜蛾核型多角体病毒（Autographa californica NPV，AcNPV），iap基因来源于甜菜斜纹夜蛾（Spodoptera exigua）。β-1,3-葡聚糖和几丁质是真菌细胞壁的主要成分，已有大量研究表明，β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶能够降解真菌细胞壁中的β-1,3-葡聚糖和几丁质，从而破坏真菌菌丝体顶端的细胞壁使其逐渐变薄，导致菌丝体顶端膨胀、破碎，最终死亡。本研究所用的β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶分别来自烟草和菜豆。在本研究中，我们首先克隆得到p35、iap、β-1,3-glucanase及chitinase基因编码区序列，通过酶切、连接等操作分别将各基因构建到具有除草剂（ppt）抗性的质粒pCAMBIA3301上，并以泛素（ubiquitin）启动子启动各基因的转录。构建的植物表达载体p3301-p35、p3301-iap、p3301-β-1,3-glucanase及p3301-chitinase经菌落PCR和酶切验证后进行序列检测及分析，结果显示p35、 β-1,3-glucanase及chitinase基因均无突变，iap基因有一个碱基发生突变但未造成编码氨基酸的改变属无义突变。

关键词：玉米纹枯病细胞凋亡抑制基因 p35 iap β-1,3-葡聚糖酶几丁质酶

转细胞凋亡抑制基因OpIAP和p35增强小麦对纹枯病的抗性

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作物学报 2015年第10期41卷 1490-1499页

作者：申芳嫡洪彦涛杜丽璞徐惠君马翎健张增艳西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100 中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部麦类生物学与遗传育种重点实验室北京100081

OpIAP（Orgyiapseudotsugatainhibitorofapoptosisprotein）是黄杉毒蛾核型多角体病毒中编码细胞凋亡抑制蛋白（inhibitorofapoptosisprotein,IAP）的基因,p35基因编码苜蓿斜纹夜蛾核型多角体病毒中具细胞凋亡抑制作用的35kDa蛋白。本研究人工合成了OpIAP和p35基因,构建了同时含有OpIAP和p35表达盒的转双价基因载体pUbi：p35-RSS1P：Myc-OpIAP,两基因分别由玉米泛素基因启动子（Ubiquitin,Ubi）和水稻蔗糖合酶-1启动子（sucrosesynthase-1promoter,RSS1P）驱动。通过基因枪介导法将该载体导入小麦品种扬麦16,获得双价转基因小麦。对T0-T2代植株,利用PCR、RT-PCR、qRT-PCR及Westernblot分析,确认导入的外源OpIAP和p35基因能够在4个转双价基因小麦株系中遗传并表达。用来源不同、致病力不同的禾谷丝核菌强致病株型R0301和WK207对转双价基因小麦的T1、T2代植株分别进行纹枯病抗性鉴定,结果表明,与受体扬麦16相比,双价转基因小麦的T1、T2代植株对纹枯病的抗性明显提高,说明OpIAP和p35基因的表达可以增强转基因小麦对来源不同、致病力不同的禾谷丝核菌的抗性。

关键词：细胞凋亡抑制基因 OpIAP p35 转基因小麦小麦纹枯病

细胞凋亡抑制基因bcl-2在牙源性病损中表达的研究

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现代口腔医学杂志 2002年第4期16卷 320-323,I003页

作者：钟鸣王洁王兆元中国医科大学口腔医学院沈阳110002

目的　观察凋亡相关基因bcl- 2在成釉细胞瘤 (Ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿 (OdontogenicKeratocyst,OKC)中的表达 ,探讨其与AB和OKC的生物学意义。方法　应用免疫组化法 (S -P)检测 75例AB(原发 31例 ,复发 37例 ,恶变 7例 ) ,35... 详细信息

目的　观察凋亡相关基因bcl- 2在成釉细胞瘤 (Ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿 (OdontogenicKeratocyst,OKC)中的表达 ,探讨其与AB和OKC的生物学意义。方法　应用免疫组化法 (S -P)检测 75例AB(原发 31例 ,复发 37例 ,恶变 7例 ) ,35例OKC及 9例口腔正常粘膜。同时采用原位杂交法检测了 2 0例AB(12例原发 ,8例复发 ) ,12例OKC中的bcl- 2mRNA。结果　 88% (6 6 / 75 )AB ,74.2 % (2 6 / 35 )OKC ,44 .4% (4 / 9)正常口腔粘膜有bcl- 2蛋白表达 ,三组间相比差异有显著性 (P 0 .0 5 )。bcl- 2在病变中表达的特征为AB的外周层细胞为强表达 ,星网状层有阳性表达 ,随着细胞增殖分化呈实性片状时bcl- 2表达增强 ,角化退变样细胞 ,颗粒性变细胞表达缺失。OKC中多在基底层细胞中表达。结论　①bcl- 2在AB及OKC的发生、发展及细胞分化与增殖中起着重要作用。

关键词：成釉细胞瘤牙源性角化囊肿 bcl-2基因免疫组化原位杂交基因表达细胞凋亡抑制基因牙源性病损

移植神经生长因子和脑衍生神经生长因子基因修饰的嗅鞘细胞对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

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中国临床康复 2005年第18期9卷 124-125页

作者：布林郑鸿姜汉国袁即山广东医学院附属医院骨科广东省湛江市524001 广东医学院病理教研室广东省湛江市524001 中山大学第一附属医院烧伤科广东省广州市510060

目的:探讨大鼠脊髓损伤后神经生长因子和脑衍生神经生长因子基因修饰的嗅神经鞘细胞移植对脊髓损伤后细胞凋亡及促进神经功能恢复的作用。方法:实验于2003-09/2004-04在广东医学院实验动物中心完成,SD大鼠48只,雌雄不限,体质量240～260... 详细信息

目的:探讨大鼠脊髓损伤后神经生长因子和脑衍生神经生长因子基因修饰的嗅神经鞘细胞移植对脊髓损伤后细胞凋亡及促进神经功能恢复的作用。方法:实验于2003-09/2004-04在广东医学院实验动物中心完成,SD大鼠48只,雌雄不限,体质量240～260g。随机分为3组:基因修饰组,嗅鞘细胞移植组,脊髓损伤组,每组16只。均首先行大鼠脊髓损伤造模。基因修饰组和嗅鞘细胞移植组分别移植神经生长因子、脑衍生神经生长因子修饰的嗅鞘细胞和单纯嗅鞘细胞,脊髓损伤组不做治疗。移植后12周,采用免疫组织化学法和原位末端标记法对损伤区的脊髓组织切片进行细胞凋亡的检测,主要观察bcl-2(细胞凋亡抑制基因),bax和fas(细胞凋亡诱导基因)阳性表达的情况评估经基因修饰和未经基因修饰的单纯嗅鞘细胞对脊髓神经凋亡的抑制及诱导作用。结果:48只大鼠均进入结果分析。①原位末端标记法检测结果:基因修饰组细胞凋亡数低于嗅鞘细胞移植组,脊髓损伤组最高。②免疫组织化学结果:Bcl-2蛋白表达的顺序为基因修饰组>嗅鞘细胞移植组>脊髓损伤组(20.79±6.40,13.54±3.66,9.34±2.12,P嗅鞘细胞移植组>基因修饰组[(24.98±4.32,40.48±2.05),(18.92±4.74,25.54±3.82),(11.78±3.81,16.87±3.30),(P细胞其存活时间与分泌有限。神经生长因子和脑衍生神经生长因子是神经营养因子的主要成员,用神经生长因子和脑衍生神经生长因子基因修饰嗅鞘细胞后可提高嗅鞘细胞的生存时间和提高分泌神经营养因子功能,移植后具有抑神经细胞凋亡的作用。

关键词：神经生长因子基因修饰脊髓损伤脑衍生嗅鞘细胞移植原位末端标记法 Bcl-2蛋白表达嗅神经鞘细胞移植细胞凋亡抑制基因神经营养因子免疫组织化学法 Bax蛋白表达神经功能恢复实验动物中心凋亡诱导基因神经细胞凋亡

Apoptosis-regulating protein,survivin:expression and relationship with caspase-3 protein in pituitary adenomas

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中国临床康复 2002年第18期6卷 2808-2809,I001页

作者：马杰石智勇魏冰乔思杰 Henan Tumor Hospital Zhengzhou 450003 China

Objective To study the expression of a inhibito r gene,survivin , in pituitary adenomas and its relationship with the expression of caspase-3gen *** Using streptavidin-biotin peroxid ase(SP),the expression of surviv ing,caspa se-3protein was examined in 8normal pituitary tissue and 38pitu itary *** Survivin was expressed in 23of 38cases of pituitary a denomas,in contrast,normal pituitary tissue did not express *** e expression rate of PRL group,GHgroup,Mixed group in pituitary adenomas was 12/17,7/13,4/8,*** of surviving was no t related with the tumor type(P >0.05).Meanwhile,surviving positive rat e in caspase-3positive and negative groups was 5/14,79%.The result s how ed it was strongly associated with ca spase-3expression(P <0.05).C onclusions Apoptosis suppression by surviving play an important role in a popto sis of pituitary *** vivin could be a new diagnostic /therapeutic tar get in pituitary adenoma s.

关键词：细胞凋亡抑制基因 Survivin基因 Caspase-3蛋白垂体腺瘤基因表达

靶向Survivin基因沉默对胰腺癌细胞Patu8988增殖和凋亡的影响

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中华实验外科杂志 2010年第8期27卷 1174-1174页

作者：谢于王学军王宏光蔡守旺董家鸿解放军总医院肝胆外科北京100853 解放军军事医学科学院

Survivin基因是近年来发现的一种细胞凋亡抑制基因,几乎所有常见人类肿瘤中皆高表达,而在正常分化成熟组织中多无表达.因此,针对Survivin的靶向治疗具有良好的特异性.

关键词：靶向Survivin 细胞凋亡抑制基因胰腺癌细胞基因沉默 Survivin基因增殖人类肿瘤靶向治疗

云母单体颗粒对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜癌相关基因蛋白表达的影响

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中国中药杂志 2006年第4期31卷 312-316页

作者：朱方石姒健敏王良静王冬飞陈萍江苏省中医药研究院江苏南京210028 浙江大学邵逸夫临床医学研究所浙江杭州310016

目的:研究云母单体颗粒剂对实验性萎缩性胃炎大鼠癌相关基因表达的调控作用。方法:运用云母高、中、低3种不同剂量的单体颗粒剂,对实验性萎缩性胃炎大鼠进行了分组干预治疗,采用免疫组织化学方法的EnVision系统二步法,观察模型大鼠胃黏... 详细信息

目的:研究云母单体颗粒剂对实验性萎缩性胃炎大鼠癌相关基因表达的调控作用。方法:运用云母高、中、低3种不同剂量的单体颗粒剂,对实验性萎缩性胃炎大鼠进行了分组干预治疗,采用免疫组织化学方法的EnVision系统二步法,观察模型大鼠胃黏膜突变型抑癌基因p53、癌基因p21、抑癌基因p16及细胞凋亡抑制基因bcl-2等基因蛋白表达变化情况。结果:云母3种不同剂量有降低p53,p21表达的倾向,对p16的缺失和bcl-2的高表达有明显调节作用,并能减轻胃黏膜炎症,促进腺体的再生。结论:云母对萎缩性胃炎的治疗和逆转作用可能与对癌相关基因蛋白表达的调控作用有关。

关键词：云母萎缩性胃炎癌基因抑癌基因细胞凋亡抑制基因基因蛋白大鼠

环孢素A和他克莫司对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生物学行为的影响

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中华器官移植杂志 2012年第6期33卷 358-361页

作者：苗芸于立新邓文锋付绍杰徐健杜传福王亦斌周敏捷南方医科大学南方医院器官移植科广州510515

目的研究环孢素A（CsA）和他克莫司（Tac）对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生长及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立Balb／c小鼠移植瘤模型。分为3组实验。对照组，不给予任何免疫抑制剂；CsA组，腹腔注射CsA；Tac... 详细信息

目的研究环孢素A（CsA）和他克莫司（Tac）对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生长及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立Balb／c小鼠移植瘤模型。分为3组实验。对照组，不给予任何免疫抑制剂；CsA组，腹腔注射CsA；Tac组，腹腔注射Tac。根据各组小鼠瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线，根据终末瘤质量计算影响率。以细胞侵袭实验研究各组小鼠肺癌细胞迁移能力的改变。用细胞凋亡原位末端标记法检测细胞凋亡情况。荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肿瘤细胞凋亡抑制基因（Bcl2）mRNA和肿瘤细胞凋亡促进基因（Bax）mRNA的表达。结果CsA组和Tac组移植瘤增长迅速，质量和体积均高于对照组（P〈0．05），2组的影响率分别为19％（P〈0．05）和25％（P〈0．05）。CsA组和Tac组肿瘤细胞的迁移能力均明显高于对照组（P〈0．01，P〈（1．01）对照组肿瘤凋亡指数为（0．049±0．008）％，CsA组为（0．009±0．001）％，Tac组为（0．007±0．001）％，对照组高于（：sA组和Tac组（P〈0．05，P〈0．05）。与对照组相比较，CsA组和Tac组肿瘤细胞中Bcl-2mRNA的表达较高（P〈0．05），BaxmRNA的表达较低（P〈0．05）。结论CsA和Tac对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生长均有促进作用，会增强肿瘤细胞的侵袭力，其机制可能与影响肿瘤细胞凋亡相关。

关键词：肺癌A549细胞体内移植他克莫司环孢素A 生物学行为细胞凋亡抑制基因裸鼠 Balb/c小鼠