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细胞共培养方法的研究进展

中华危重病急救医学 2016年第8期28卷 765-768页

作者：秦燕勤陈玉龙李建生河南中医学院老年医学研究所河南郑州450046 河南中医学院分子生物学实验中心河南郑州450046

细胞培养技术是目前体外实验中最常用的方法。单层细胞培养因不能完全模拟多细胞相互作用的体内环境、细胞趋向单一化，而无法探讨多细胞间的相互关系，已不能满足研究者的需求。因此，为了满足科研需要，细胞共培养技术应运而生，其方... 详细信息

细胞培养技术是目前体外实验中最常用的方法。单层细胞培养因不能完全模拟多细胞相互作用的体内环境、细胞趋向单一化，而无法探讨多细胞间的相互关系，已不能满足研究者的需求。因此，为了满足科研需要，细胞共培养技术应运而生，其方法也在实践中不断改进：从直接接触到间接接触，从二维到三维，细胞共培养模型更接近人体内环境，更有利于研究细胞与细胞之间的相互作用。目前，共培养技术已经被很多学者用于体外生理及病理模型、组织工程、细胞分化研究，为药物研发（包括中药研发）、药物分析以及药物作用机制及部位等研究热点。对有关细胞共培养方法的研究进行综述，总结各种方法的优点和不足，以促进细胞培养方法的不断改进，从而建立更加接近人体的多种细胞共培养体系，甚至模拟人体内循环的体外模型。

关键词：细胞共培养直接接触共培养间接接触共培养三维共培养体系

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细胞共培养技术在骨组织生物学中的应用

中国细胞生物学学报 2013年第2期35卷 216-223页

作者：谢丽孟芮商澎西北工业大学生命学院西北工业大学特殊环境生物物理学研究所空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室西安710072

骨组织不同细胞相互交织构成了复杂的网络结构,通过旁分泌和间隙连接途径相互传递信号,调节了个体发育的骨重塑和成体的骨重建过程。细胞共培养技术是研究细胞间相互作用的重要手段,目前主要有接触式和非接触式两种。就骨组织而言,由于... 详细信息

骨组织不同细胞相互交织构成了复杂的网络结构,通过旁分泌和间隙连接途径相互传递信号,调节了个体发育的骨重塑和成体的骨重建过程。细胞共培养技术是研究细胞间相互作用的重要手段,目前主要有接触式和非接触式两种。就骨组织而言,由于骨细胞(osteocyte)在力学感知及调节骨重塑/重建平衡中的中心枢纽作用,建立适宜于骨细胞与骨组织其他细胞间的共培养技术,对于骨组织基础生物学的研究具有重要意义。该文就当前应用于骨组织生物学中的细胞共培养技术进行综述。

关键词：细胞共培养骨组织骨细胞

细胞共培养方式在肝脏疾病研究中的应用及进展

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中华实验外科杂志 2023年第2期40卷 396-400页

作者：肖胜友古镈源黄治伟谭鹏付文广西南医科大学附属医院肝胆胰外科泸州646000 西南医科大学附属医院四川省院士(专家)工作站泸州646000

肝脏微环境中的细胞间交互作用对于维持正常肝功能极其重要。回顾既往肝脏疾病的体外研究模型中,单一细胞培养难以全面反映肝脏代谢情况,细胞共培养能一定程度上模拟肝脏微环境中两类及以上细胞间交互作用,用于研究肝脏疾病的生物学机... 详细信息

肝脏微环境中的细胞间交互作用对于维持正常肝功能极其重要。回顾既往肝脏疾病的体外研究模型中,单一细胞培养难以全面反映肝脏代谢情况,细胞共培养能一定程度上模拟肝脏微环境中两类及以上细胞间交互作用,用于研究肝脏疾病的生物学机制。目前,多种细胞共培养模型已被广泛应用于非酒精性脂肪性肝病、酒精性肝病、肝纤维化、药物性肝损伤、肝细胞肝癌等肝脏疾病研究中,本文概述了现有肝病研究中常用的细胞共培养构建方法及其特点,以期为肝脏体外模型的构建与选择提供参考。

关键词：细胞共培养体外模型肝脏疾病

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细胞共培养在组织工程研究中的应用及价值

中国组织工程研究与临床康复 2011年第20期15卷 3759-3762页

作者：詹兴旺姜艳王文良武警8750部队医院云南省蒙自县661100 红河学院理学院云南省蒙自县661100 武警医学院附属医院骨科天津市300162

背景:细胞共培养即最大程度地模拟机体内环境,在体外观察细胞与细胞之间的相互作用,是组织工程研究的热点。目的:总结并讨论细胞共培养研究在组织工程研究的应用及价值。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2000/2010)... 详细信息

背景:细胞共培养即最大程度地模拟机体内环境,在体外观察细胞与细胞之间的相互作用,是组织工程研究的热点。目的:总结并讨论细胞共培养研究在组织工程研究的应用及价值。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2000/2010)和Medline数据库(2000/2010),检索词分别为"细胞共培养,骨髓间充质干细胞,神经干细胞,软骨细胞,组织工程"和"Cellsco-culture,Bone marrow stem cells,Neural stem cells,Cartilage",语言分别设定为中文和英文。从细胞共培养在骨髓间充值干细胞、神经干细胞和软骨细胞3方面进行总结,对细胞共培养在组织工程研究及应用方面进行介绍。结果与结论:共检索到182篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章。结果表明大量细胞共培养的研究,都围绕着最大程度地模拟体内环境、维持体内性状,观察细胞与细胞之间相互作用,很多体外细胞共培养的研究结果和进展对于深入了解共培养有重要的指导和参考价值,但有关共培养的新方法新技术,研究结果,最新动向和研究热点但仍需进一步分析和总结。

关键词：细胞共培养骨髓间充质干细胞神经干细胞软骨细胞组织工程

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三种细胞共培养微流控芯片的设计和制作

生物工程学报 2017年第2期33卷 294-300页

作者：王帅超葛玉卿吴蕾郭慧杨仕平金庆辉上海师范大学生命与环境科学学院上海200234 中国科学院上海微系统与信息技术研究所传感技术联合国家重点实验室上海200050

设计一种具有"微坝"和"微缝"结构的微流控芯片,能够物理隔离不同细胞,而且培养基中小分子营养物质可以自由流通。实验结果表明在芯片上可以共培养人肺腺癌细胞(A549)、人胚肺成纤维细胞(HLF-1)和人内皮细胞(HUVECs)三种细胞,在72 h培养... 详细信息

设计一种具有"微坝"和"微缝"结构的微流控芯片,能够物理隔离不同细胞,而且培养基中小分子营养物质可以自由流通。实验结果表明在芯片上可以共培养人肺腺癌细胞(A549)、人胚肺成纤维细胞(HLF-1)和人内皮细胞(HUVECs)三种细胞,在72 h培养后三种细胞生长状态良好,具有细胞图形化的特点和功能,为下一步开展多种细胞相互作用等相关研究提供重要的技术平台。

关键词：细胞共培养微流控芯片微坝和微缝结构

左金丸对IEC6、HCT116细胞共培养模型肠上皮屏障功能的保护及机制研究

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中药新药与临床药理 2023年第1期34卷 1-7页

作者：余彩雁靳淑颖周四桂王桂香广东药科大学药学院广东广州510006

目的研究左金丸对IEC6、HCT116细胞共培养模型肠上皮屏障功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用左金丸醇提物低、中、高剂量(5、10、20μg·mL^(-1))处理HCT116、IEC6细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况。通过体外构建IEC6、HCT116... 详细信息

目的研究左金丸对IEC6、HCT116细胞共培养模型肠上皮屏障功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用左金丸醇提物低、中、高剂量(5、10、20μg·mL^(-1))处理HCT116、IEC6细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况。通过体外构建IEC6、HCT116细胞共培养体系模拟结肠癌微环境,以左金丸(5、10、20μg·mL^(-1))进行干预;检测IEC6细胞跨膜电阻(TEER)值及细胞通透性;采用高效液相色谱(HPLC)法检测HCT116、IEC6细胞多胺含量;微量法检测HCT116细胞的葡萄糖消耗量、乳酸及ATP含量;Western Blot法检测IEC6细胞Zonula occluden 1(ZO-1)、Occludin蛋白和HCT116细胞鸟氨酸脱羧酶(ODC)、精眯/精胺N1-乙酰基转移酶(SSAT)、鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)、SLC22A1、缺氧诱导因子1(HIF1α)、C-Myc、己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)、葡萄糖转运体1(GLUT1)、乳酸脱氢酶(LDHA)蛋白表达情况。结果 (1)与对照组比较,左金丸低、中、高剂量(5、10、20μg·mL^(-1))处理HCT116细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率显著升高(P细胞24 h后,细胞增殖抑制率无明显变化(P>0.05)。(2)与IEC6细胞单培养组比较,共培养模型组细胞的TEER及FD4荧光强度显著降低(P细胞的多胺含量显著降低(P细胞单培养组比较,共培养模型组HCT116细胞的多胺含量显著增加(P共培养模型组比较,左金丸中、高剂量组细胞的TEER及FD4荧光强度显著升高(P细胞ZO-1、Occludin蛋白表达明显上调(P细胞多胺含量显著增加(P细胞的多胺含量显著降低(P细胞多胺合成酶ODC、多胺转运体SLC22A1蛋白的表达(P细胞的葡萄糖消耗量、乳酸生产量及ATP含量(P细胞共培养模型肠上皮屏障功能具有保护作用,对结肠癌HCT116细胞具有增殖抑制作用,可能与其调节HCT116细胞多胺代谢、转运以及抑制肿瘤糖酵解水平有关。

关键词：左金丸结肠癌HCT116细胞肠上皮IEC6细胞细胞共培养多胺糖酵解

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干细胞共培养技术在医学研究中的应用

中国细胞生物学学报 2014年第8期36卷 1178-1185页

作者：詹秀琴姜泽群南京中医药大学基础医学院南京210023

细胞共培养技术是20世纪70年代后期发展起来的将不同种类、不同来源的细胞在同一个体系中进行培养、增殖的技术,该技术的诞生至今已经历了三十多年的时间,在共培养的细胞种类、共培养条件、共培养方法等方面均取得了很大的进展。其中,... 详细信息

细胞共培养技术是20世纪70年代后期发展起来的将不同种类、不同来源的细胞在同一个体系中进行培养、增殖的技术,该技术的诞生至今已经历了三十多年的时间,在共培养的细胞种类、共培养条件、共培养方法等方面均取得了很大的进展。其中,将骨髓间充质干细胞与其他种类细胞共培养,以诱导骨髓间充质干细胞定向分化的研究最为常见。该文对在神经、骨关节、心血管等系统疾病的替代治疗中有重要价值的共培养研究—骨髓间充质干细胞与不同种类的体细胞共培养作了重点介绍,以期为今后的工作提供借鉴和帮助。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞共培养医学研究

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牙髓再生组织工程中的细胞共培养体系

中国组织工程研究 2023年第15期27卷 2379-2384页

作者：张楚晗张东敏徐稳安南方医科大学深圳口腔医院(坪山) 广东省深圳市510811 南方医科大学口腔医学院广东省广州市510515

背景:常规根管治疗去除所有牙髓组织会导致牙的生理功能和组织再生能力丧失,体外培养牙髓干细胞并使之形成牙髓样组织,再移植入髓腔内成为了理想的牙髓再生治疗方法。目的:汇总阐述通过共培养体系诱导牙髓干细胞形成牙髓样组织的研究进... 详细信息

背景:常规根管治疗去除所有牙髓组织会导致牙的生理功能和组织再生能力丧失,体外培养牙髓干细胞并使之形成牙髓样组织,再移植入髓腔内成为了理想的牙髓再生治疗方法。目的:汇总阐述通过共培养体系诱导牙髓干细胞形成牙髓样组织的研究进展,为牙髓组织再生的干细胞治疗方法提供思路。方法:第一作者于PubMed、中国知网和万方数据库检索时限为2022年5月以前发表的相关文献。英文检索词为“dental pulp regeneration,dental pulp stem cell,co-culture,tissue engineering,signaling pathway”,中文检索词为“牙髓再生、牙髓干细胞、共培养、组织工程、支架、信号通路”,纳入67篇符合标准的文献进行总结阐述。结果与结论:①共培养体系由细胞主体和组合细胞通过不同的组合方式构成。②现阶段共培养体系组合方式可分为直接共培养与间接共培养2种,生物支架材料的介入、培养条件的改变等作用又可将共培养结局分为二维和三维再生组织。③直接共培养通过细胞间接触构建生理性的细胞外基质以及利于干细胞增殖分化的微环境。④间接共培养解决了组合细胞来源不足、不同个体间免疫排异反应等问题,组合细胞产生的生物因子更易制成临床使用的药物和生物支架材料。⑤目前共培养体系在成血管有优越表现,但其他结构相关报道较少,且共培养结局形成的再生组织仍具有不确定性。同时,由于牙体解剖结构、排异反应等限制因素,将共培养体系生成的再生组织运用于临床仍然困难。

关键词：牙髓再生组织再生牙髓干细胞细胞共培养共培养体系条件培养基生物支架组织工程

肿节风总黄酮对细胞共培养体系中巨核细胞分化、成熟的影响

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中药新药与临床药理 2019年第11期30卷 1277-1283页

作者：卢晓南孙慧娟朱静胡星遥严小军尚广彬江西中医药大学中医学院江西南昌330004 江西中医药大学中医基础理论分化发展中心江西南昌330004

目的研究肿节风总黄酮对细胞共培养体系中巨核细胞分化、成熟的影响。方法通过体外分离培养SD大鼠骨髓基质细胞和巨核细胞,构建共培养体系模拟骨髓微环境,加入兔抗大鼠血小板血清(APS)建立巨核细胞分化障碍模型,以肿节风总黄酮高、中、... 详细信息

目的研究肿节风总黄酮对细胞共培养体系中巨核细胞分化、成熟的影响。方法通过体外分离培养SD大鼠骨髓基质细胞和巨核细胞,构建共培养体系模拟骨髓微环境,加入兔抗大鼠血小板血清(APS)建立巨核细胞分化障碍模型,以肿节风总黄酮高、中、低剂量(7.80、3.90、1.95μg·mL^-1)进行干预。分别采用瑞氏-吉姆萨染色、流式细胞术检测各组共培养体系中巨核细胞的多倍体化程度、细胞表面标志物CD61表达量,以及基质细胞凋亡情况;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血小板生成素(TPO)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、转化因子-β1(TGF-β1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量。结果与正常组比较,APS模型组共培养体系中巨核细胞多倍体数目、CD61表达量以及TPO、SDF-1、VCAM-1含量均明显降低(P细胞凋亡率显著提高(P共培养体系中TPO的含量(P细胞多倍体数目及SDF-1含量(P共培养体系中基质细胞的凋亡率及TGF-β1含量(P共培养体系中巨核细胞的分化、成熟,可能与其改善共同培养体系中基质细胞状态和分泌功能,影响微环境中促巨核细胞分化的细胞因子含量关系密切。

关键词：细胞共培养肿节风总黄酮骨髓基质细胞巨核细胞分化成熟