检索结果-南通市图书馆

肿瘤 2014年第3期34卷 197-203页

作者：李晓宇罗颀枫魏传奎李登峰房林同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科上海200072

目的 :探讨上调miR-181b的表达对人乳腺癌mda-mb-231和mcf-7细胞功能的影响及其可能的靶向基因。方法 :应用脂质体介导的方法将miR-181b模拟物(miR-181b mimics)分别转染mda-mb-231和mcf-7细胞后,通过MTT、Transwell和FCM法分别检测细... 详细信息

目的 :探讨上调miR-181b的表达对人乳腺癌mda-mb-231和mcf-7细胞功能的影响及其可能的靶向基因。方法 :应用脂质体介导的方法将miR-181b模拟物(miR-181b mimics)分别转染mda-mb-231和mcf-7细胞后,通过MTT、Transwell和FCM法分别检测细胞增殖和迁移能力及细胞周期的变化。将含细胞周期蛋白依赖性激酶8(cyclin-dependent kinase 8,CDK8)基因3’端非翻译区(3’-untranslated region,3’-UTR)的重组载体psiCHECK-2/CDK8-3’UTR和miR-181b mimics共转染入人胚肾HEK293T细胞,应用双荧光素酶报告系统验证CDK8基因3’-UTR是否有miR-181b的结合位点。蛋白质印迹法检测miR-181b mimics转染后mdamb-231和mcf-7细胞中CDK8蛋白的表达情况。结果 :与转染miR-181b模拟物阴性对照(negative control,NC)(miR-181b mimics-NC)组比较,miR-181b mimics转染组mda-mb-231和mcf-7细胞的增殖和迁移能力受到抑制(P细胞周期主要阻滞于G0/G1期(P细胞的荧光素酶活性下降(Pmda-mb-231和mcf-7细胞中CDK8蛋白的表达水平明显下调(P细胞的增殖和迁移,这种作用可能与miR-181b靶向调节CDK8的表达有关。

关键词：乳腺肿瘤微RNAs 细胞增殖细胞周期蛋白依赖性激酶8 miR-181b 细胞,mda—mb一231,mcf-7

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