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微小核糖核酸-548ah 靶向组蛋白去乙酰化酶4对乙型肝炎病毒复制和表达的影响

中华传染病杂志 2016年第5期34卷 274-279页

作者：邢同京徐洪涛陆欣星曹琳叶茂聪江苏省泰州市人民医院感染病科 225300

目的：探讨miRNA‐548ah靶向组蛋白去乙酰化酶（HDAC ）4对 HBV复制和表达的影响。方法 miRNA‐548ah模拟剂和抑制剂转染 HepG2，2，15细胞，荧光定量 PCR 检测转染前、后miRNA‐548ah和 HDAC4 mRNA的表达，蛋白质印迹检测 HepG2，2，1... 详细信息

目的：探讨miRNA‐548ah靶向组蛋白去乙酰化酶（HDAC ）4对 HBV复制和表达的影响。方法 miRNA‐548ah模拟剂和抑制剂转染 HepG2，2，15细胞，荧光定量 PCR 检测转染前、后miRNA‐548ah和 HDAC4 mRNA的表达，蛋白质印迹检测 HepG2，2，15细胞中 HDAC4蛋白的表达。生物信息学方法分析miRNA‐548ah靶基因，构建含候选靶基因 HDAC4的3′UTR双荧光素酶表达载体，检测荧光素酶活性。ELISA测定细胞培养上清液中 HBsAg、HBeAg水平，荧光定量 PCR检测细胞培养上清液中 HBV DNA水平。两组间比较采用两样本均数 t检验，多组间比较采用方差分析并SNK‐q检验。结果在 HepG2，2，15和 HepG2细胞中，miRNA‐548ah分别为5．74±0．02和2．96±0．40（t＝11．89，P＜0．01），HDAC4分别为9．38±0．39和18．13±0．34（ t＝29．39， P＜0．01）。转染miRNA‐548ah抑制剂可抑制HepG2，2，15细胞中miRNA‐548ah的表达（1．01±0．13，t＝15．48，P＜0．01）。与对照组比较，抑制剂组 HepG2，2，15细胞培养上清液中 HBsAg[（6．45±0．46） IU／mL比（2．60±0．20） IU／mL ，t＝7．48，P＜0．01]、HBeAg[（5．49±0．27） NCU／mL比（4．15±0．34） NCU／mL ，t＝3．10，P＜0．05]、HBV DNA[（3．93±0．06） lg拷贝／mL比（2．04±0．07） lg拷贝／mL ，t＝18．89，P＜0．01]水平均明显降低。转染miRNA‐548ah模拟剂，HDAC4的表达水平明显降低（2．98±0．94）；转染抑制剂则表达水平明显升高（23．77±6．74），差异有统计学意义（F＝9．34， P＜0．01）。miRNA‐548ah模拟剂对HepG2，2，15细胞中HDAC4蛋白表达有显著抑制作用（0．53±0．14比0．23±0．02，t＝3．58， P＝0．02），对psiCHECK‐HDAC4载体荧光素酶活性表达也有显著抑制作用（7．62±0．45比6．65±0．27，t＝3．18， P＝0．03）。结论 miRNA‐548ah可通过调控靶基因HDAC4，促进HBV的复制和表达。

关键词：微小RNA-548ah 肝炎病毒乙型组蛋白去乙酰化酶-4

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