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组织型转谷氨酰胺酶对乳腺癌侵袭转移作用的研究

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中华肿瘤防治杂志 2015年第12期22卷 936-940页

作者：贺文兴黄传生全军利吴斯明李健林刘志明广西医科大学第一附属医院普通外科广西南宁530021 江西省肿瘤医院病理科江西南昌330029

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(transglutaminase type 2,tissue transglutaminase,TG2或tTG)对人乳腺癌细胞的侵袭转移能力作用及可能的机制。方法构建TGM2的特异性慢病毒干扰载体(TGM2-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞,实验设T... 详细信息

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(transglutaminase type 2,tissue transglutaminase,TG2或tTG)对人乳腺癌细胞的侵袭转移能力作用及可能的机制。方法构建TGM2的特异性慢病毒干扰载体(TGM2-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞,实验设TGM2干扰组(RNAi)、空白组(Con)和阴性对照组(NC)。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TGM2mRNA表达。细胞侵袭迁移实验(Transwell)检测细胞侵袭迁徙能力改变。蛋白质印迹检测MDA-MB-231细胞TG2、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein 9,MMP-9)和波形蛋白(Vimentin)的表达。选择2012-05-10-2014-07-29广西医科大学第一附属医院(46例)和江西省肿瘤医院(35例)病理确诊的81例乳腺浸润性导管癌患者,采用免疫组化检测TG2表达水平,分析其与淋巴结转移关系。结果 RT-PCR检测结果显示,Con组TGM2mRNA表达量为1,RNAi组TGM2mRNA表达量为0.21±0.03,明显低于Con组的1,z=-2.087,P=0.036 9;明显低于NC组的0.94±0.05,z=-1.964,P=0.049 5。细胞侵袭实验显示,侵袭到滤膜下的细胞数RNAi组为42.33±4.04,低于Con组的93.50±7.42和NC组的87.25±5.74,z值均为-2.121,P值均为0.033 9。迁移到滤膜下的细胞数RNAi组为66.13±4.59,低于Con组116.75±7.82和NC组109.00±7.79(z值均为-2.309,P值均为0.020 9)。蛋白质印迹检测结果显示,RNAi组、NC组和Con组TG2蛋白相对表达量分别为0.34±0.06、0.87±0.10和0.95±0.03,F=66.55,P0.05;而与淋巴结转移(χ2=14.750,P转移作用,下调TG2表达水平可能是治疗肿瘤转移的新靶点。

关键词：乳腺癌组织型转谷氨酰胺酶侵袭转移波形蛋白基质金属蛋白酶-9

组织型转谷氨酰胺酶在局灶节段性肾小球硬化大鼠肾脏中的表达和意义

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中华肾脏病杂志 2005年第5期21卷 260-264页

作者：刘森炎陈东李月红赵慧颖李惊子黄海长北京大学第一医院肾内科北京大学肾脏病研究所 100034

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型大鼠肾脏中的表达及其意义。方法FSGS大鼠模型采用左颈静脉插管单次注射嘌呤霉素氨基核苷(PAN)方法建立,对照组大鼠注射等量生理盐水,20周后处死各组大鼠。肾组织切片... 详细信息

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型大鼠肾脏中的表达及其意义。方法FSGS大鼠模型采用左颈静脉插管单次注射嘌呤霉素氨基核苷(PAN)方法建立,对照组大鼠注射等量生理盐水,20周后处死各组大鼠。肾组织切片用PAS染色,光镜下观察病理变化;用免疫组织化学、底物掺入免疫荧光法、Western印迹法分别观察肾内tTG蛋白分布、原位活性和蛋白水平变化;用免疫组化半定量方法分析细胞外基质纤连蛋白(FN)表达。结果模型组肾组织病理呈典型局灶节段肾小球硬化病变,伴大量蛋白尿。对照组肾组织tTG蛋白表达较弱,分布于肾小球内;模型组肾组织tTG蛋白分布于肾小球硬化部位。Western印迹结果显示模型组肾组织tTG蛋白水平比对照组增加2.61倍(P组织tTG原位活性微弱;模型组肾小球tTG活性明显增强。模型组FN主要分布在肾小球,表达水平明显高于对照组(3.73±0.57比2.50±1.00,P<0.05):并且LTG蛋白水平与FN水平呈显著正相关(r=0.73,P<0.05)。结论tTG可能通过交联细胞外基质蛋白,抵抗降解,参与FSGS发生发展。

关键词：局灶节段性肾小球硬化组织型转谷氨酰胺酶肾脏局灶节段肾小球硬化 Western印迹嘌呤霉素氨基核苷细胞外基质蛋白免疫组织化学 FSGS 蛋白水平颈静脉插管对照组 PAS染色免疫荧光法大量蛋白尿 tTG 肾组织模型大鼠

组织型转谷氨酰胺酶在糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义

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中华肾脏病杂志 2006年第9期22卷 559-563页

作者：刘亚红程丽静高政南大连医科大学附属第二医院肾内科大连市中心医院内分泌科

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达及其意义。方法链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠制备DM模型,分别于第30、60、90和120天处死DM组大鼠6只、对照组(C组)3只。测定尿白蛋白量(AER)、肾重指数和血肌酐(Scr)。HE染色... 详细信息

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达及其意义。方法链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠制备DM模型,分别于第30、60、90和120天处死DM组大鼠6只、对照组(C组)3只。测定尿白蛋白量(AER)、肾重指数和血肌酐(Scr)。HE染色和PASM染色观察肾组织病理变化。免疫组织化学检测肾脏胶原Ⅳ(ColⅣ)和可溶性tTG表达。间接免疫荧光检测不溶性tTG分布。用RT-PCR检测总tTG mRNA表达。结果各个时间点DM组大鼠的AER、肾重指数和Scr均较c组明显升高(P组织的过度表达及不溶性tTG与ColⅣ表达的正相关,提示tTG可能参与了早期糖尿病肾病(DN)的发病过程。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶糖尿病肾病纤维化

HeLa细胞中与组织型转谷氨酰胺酶相互作用蛋白质的筛选

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第5期35卷 478-482页

作者：李平张宇清王霞谭理朱运松上海200032 复旦大学上海医学院分子遗传研究室复旦大学上海医学院分子遗传研究室教育部分子医学重点实验室

组织型转谷氨酰胺酶 (tissuetransglutaminase ,tTG ,TGII)是转谷氨酰胺酶家族成员之一 ,多数细胞凋亡过程中均有tTG表达水平的升高。为研究tTG在细胞凋亡过程中发挥作用的机制 ,利用Gal 4酵母双杂交系统筛选了HeLa细胞中与tTG相互作用... 详细信息

组织型转谷氨酰胺酶 (tissuetransglutaminase ,tTG ,TGII)是转谷氨酰胺酶家族成员之一 ,多数细胞凋亡过程中均有tTG表达水平的升高。为研究tTG在细胞凋亡过程中发挥作用的机制 ,利用Gal 4酵母双杂交系统筛选了HeLa细胞中与tTG相互作用的蛋白质 ,获得了 17个阳性酵母克隆。序列测定显示其中 1个克隆所含cDNA序列编码TIA 1相关蛋白 (TIA 1 relatedprotein ,TIAR )C端 12 9个氨基酸残基序列 ,GST下拉 (pull down)实验也证实tTG与TIAR能相互作用 ,而且这种相互作用需要Ca2 + 参与作用。这些结果提示tTG可能通过其Ca2 + 依赖的转谷氨酰胺活性对TIAR进行修饰从而影响TIAR的功能 ,可能在细胞凋亡中发挥着一定的作用。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶 TIA-1相关蛋白酵母双杂交

组织型转谷氨酰胺酶在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏中的表达及意义

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中国实验诊断学 2011年第2期15卷 220-223页

作者：曲萌王丹李才李相军苗春生尹俐吉林大学药学院吉林长春130021 北华大学医学检验学院

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及其意义。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠,采用HE和Masson染色观察肾组... 详细信息

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及其意义。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠,采用HE和Masson染色观察肾组织病变;采用免疫组化法检测肾间质中tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测tTG mRNA表达。结果 HE显示,模型组大鼠肾间质增宽,炎细胞浸润,纤维组织增多,肾小管明显扩张。Masson染色可见模型组大鼠肾间质胶原明显增多。模型组tTG和FN的基因和蛋白表达均明显高于假手术组(P<0.01),并且tTG的蛋白水平与FN水平呈显著正相关(r=0.734,P<0.05)。结论 tTG可能通过交联细胞外基质蛋白,抵抗降解,参与UUO大鼠肾间质纤维化的发生发展。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶 UUO 肾纤维化

组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制

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实用医学杂志 2013年第21期29卷 3472-3474页

作者：朱郇悯汤娟娟黎银燕刘嘉熙韦雪梅王飞陈晓湘张雪雁李孜广州医学院 510080

目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;R... 详细信息

目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P转录水平为A549细胞株的650.68(P转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。

关键词：癌非小细胞肺组织型转谷氨酰胺酶侵袭力表皮生长因子受体基质金属蛋白酶-2

组织型转谷氨酰胺酶在糖尿病或牙周病中的研究进展

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牙体牙髓牙周病学杂志 2010年第8期20卷 477-480页

作者：崔翠陈莉娅兰州大学口腔医学院口腔内科甘肃兰州730000

组织型转谷氨酰胺酶是一种多功能蛋白,参与调节胰岛素分泌和代谢,在糖尿病的发病机制中发挥重要作用;同时其活性又影响炎症反应、伤口愈合、胶原沉积及骨质形成过程,这些过程均与牙周病的发展及预后密切相关。该文拟就组织型转谷氨酰胺... 详细信息

组织型转谷氨酰胺酶是一种多功能蛋白,参与调节胰岛素分泌和代谢,在糖尿病的发病机制中发挥重要作用;同时其活性又影响炎症反应、伤口愈合、胶原沉积及骨质形成过程,这些过程均与牙周病的发展及预后密切相关。该文拟就组织型转谷氨酰胺酶与糖尿病或牙周病的相关性研究作一综述。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶糖尿病牙周病

银杏叶对大鼠肾脏中组织型转谷氨酰胺酶的表达及干预作用

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中国中药杂志 2009年第9期34卷 1133-1136页

作者：王丹李相军于晓艳石艳尹俐吉林大学药学院吉林长春130021 北华大学基础医学院吉林吉林132001

目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及银杏叶(GBE)对其表达的影响。方法:采用左侧输尿管结扎术复制肾间质纤维化模型,将雄性W istar大鼠随机分为假手术组、模型组、贝那普利(15 mg.kg-1)治疗组... 详细信息

目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及银杏叶(GBE)对其表达的影响。方法:采用左侧输尿管结扎术复制肾间质纤维化模型,将雄性W istar大鼠随机分为假手术组、模型组、贝那普利(15 mg.kg-1)治疗组及银杏叶(300 mg.kg-1)治疗组。术后第14天处死各组大鼠,取左肾进行HE和M asson染色,观察肾间质纤维化病变;免疫组化法检测肾间质中纤维连接蛋白(FN)和tTG的表达;RT-PCR检测tTG mRNA表达。结果:模型组FN和tTG的表达明显高于假手术组(P型组(P<0.05)。结论:贝那普利及银杏叶制剂可能通过下调tTG而减轻肾间质纤维化。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶 UUO 纤维化

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组织型转谷氨酰胺酶的研究进展

国外医学（分子生物学分册） 2002年第5期24卷 294-297页

作者：李平朱运松复旦大学医学院分子遗传学教研室上海200032

组织型转谷氨酰胺酶 (tissue transglutaminase,t TG,TG )是转谷氨酰胺酶家族成员之一 ,作为一种多功能的蛋白质 ,具有催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基交联的活性 ,还能结合和水解 GTP,在胞内和胞外产生多种功能。最初由于 t TG在... 详细信息

组织型转谷氨酰胺酶 (tissue transglutaminase,t TG,TG )是转谷氨酰胺酶家族成员之一 ,作为一种多功能的蛋白质 ,具有催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基交联的活性 ,还能结合和水解 GTP,在胞内和胞外产生多种功能。最初由于 t TG在细胞凋亡中所起的重要作用而受到研究者的关注 ,最近的研究更表明它在细胞分化、基质的稳定、伤口愈合、信号转导、动物发育等许多生理和病理过程中起着重要作用。

关键词：组织型转谷氨酰胺酶研究进展细胞凋亡信号转导病理生理过程