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热打击诱导血管内皮细胞组织因子早期表达分泌的初步研究

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解放军医学杂志 2023年第12期48卷 1412-1419页

作者：钱晶王凡凡万露露杨加乐施学智童华生周伟梁广州中医药大学研究生院广东广州510000 南部战区总医院重症医学科广东广州510000 南方医科大学第一临床医学院广东广州510000 广州中医药大学深圳临床医学院广东深圳518000 南部战区总医院急诊医学科广东广州510000

目的探讨热打击诱导血管内皮细胞组织因子(TF)早期表达分泌的规律。方法将30只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组与热打击后复温0、3、6、9h组(n=6)。热打击组小鼠暴露于动物孵箱热环境,核心温度达42.5℃时即为发生重症中暑。采用HE... 详细信息

目的探讨热打击诱导血管内皮细胞组织因子(TF)早期表达分泌的规律。方法将30只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组与热打击后复温0、3、6、9h组(n=6)。热打击组小鼠暴露于动物孵箱热环境,核心温度达42.5℃时即为发生重症中暑。采用HE染色观察小鼠肝脏、肺脏及肾脏组织病理学变化;RT-qPCR检测小鼠组织TFmRNA表达水平;ELISA法检测小鼠血浆TF浓度。体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)热打击模型,分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组。采用RT-qPCR、Western blotting及细胞免疫荧光化学技术分别检测HUVECs中TF mRNA及蛋白表达水平;采用ELISA法检测HUVECs培养上清中TF水平。结果对照组小鼠各组织未见明显病理损伤,热打击复温小鼠存在不同程度组织细胞结构性损伤及出血性、炎症性损伤。与对照组小鼠比较,热打击复温0、3 h组肾脏(1.719±0.018、1.241±0.178 vs.1.000±0.063)、复温3 h组肺脏(2.444±0.511 vs.1.000±0.106)及复温6 h组肝脏(7.312±0.618 vs.1.000±0.147)中TF mRNA表达量均明显升高(P<0.05)。热打击小鼠复温0、3、6、9h组血浆TF水平均较对照组小鼠升高[(132.426±17.920)pg/ml、(119.400±10.267)pg/ml、(107.374±13.495)pg/ml、(163.767±22.810)pg/ml vs.(75.479±13.831)pg/ml,P<0.01]。与对照组比较,热打击后复温6、9h组HUVECs的TFmRNA表达水平明显升高(1.905±0.354、2.564±0.297vs.1.000±0.097,P<0.01);热打击复温0、3、6、9 h组HUVECs培养上清TF水平均明显高于对照组[(36.309±4.101)pg/ml、(38.425±5.484)pg/ml、(41.655±4.380)pg/ml、(43.586±4.718)pg/ml vs.(14.996±0.254)pg/ml,P<0.01]。结论热打击血管内皮细胞中TF的早期表达分泌增加,可能是重症中暑循环TF的主要来源之一。

关键词：热打击血管内皮细胞组织因子表达分泌

LPAR1基因对脂多糖刺激下Ⅱ型肺泡上皮细胞中组织因子和纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响

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实用医学杂志 2023年第18期39卷 2323-2329页

作者：刘颖陈先俊肖川袁佳李清李璐杨金凤沈锋贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳550004

目的了解脂多糖(LPS)刺激下Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)中差异表达基因溶血磷脂酸受体1(LPAR1)的动态表达特点,以及该基因对LPS刺激下组织因子(TF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的调节作用。方法对LPS损伤后的RLE-6TN细胞进行RNA-... 详细信息

目的了解脂多糖(LPS)刺激下Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)中差异表达基因溶血磷脂酸受体1(LPAR1)的动态表达特点,以及该基因对LPS刺激下组织因子(TF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的调节作用。方法对LPS损伤后的RLE-6TN细胞进行RNA-seq测序,通过生物信息学分析,以NF-κB信号通路为核心,找到该信号通路富集到的的差异表达基因LPAR1。使用LPS刺激处于生长对数期的RLE-6TN细胞6、12、24、48及72 h,检测细胞中LPAR1基因的动态表达水平。在此基础上通过慢病毒转染敲低细胞中LPAR1基因的表达,观察该基因对细胞中TF和PAI-1表达的调节作用。结果 RLE-6TN细胞中LPAR1的表达在刺激6 h后开始升高,24 h时候达到顶峰,之后逐渐降低;利用慢病毒转染技术,成功低敲了细胞中LPAR1基因水平。LPS刺激24 h后,RLE-6TN细胞中TF和PAI-1的mRNA和蛋白的表达水平与正常对照组比较显著增加,差异有统计学意义(P 0.05)。结论 LPAR1基因对LPS刺激下RLE-6TN细胞TF和PAI-1的表达具有调节作用。该基因有望成为纠正ARDS肺泡内纤维蛋白沉积的新靶标。

关键词：溶血磷脂酸受体1 Ⅱ型肺泡上皮细胞急性呼吸窘迫综合征组织因子纤溶酶原激活物抑制剂1

组织因子在移植物抗宿主病患者内皮损伤中的作用机制研究

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中华血液学杂志 2009年第9期30卷 610-614页

作者：李泉张剑黎纬明邹萍华中科技大学同济医学院附属协和医院血液研究所武汉430022 华中科技大学同济医学院附属襄樊医院普外科

目的探讨组织因子（TF）在移植物抗宿主病（GVHD）血管内皮损伤中的作用及其机制。方法用实时定量PCR和Western blot方法检测TF在异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）和自体造血干细胞移植（auto-HSCT）小鼠各组织中基因和蛋白水平的表... 详细信息

目的探讨组织因子（TF）在移植物抗宿主病（GVHD）血管内皮损伤中的作用及其机制。方法用实时定量PCR和Western blot方法检测TF在异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）和自体造血干细胞移植（auto-HSCT）小鼠各组织中基因和蛋白水平的表达。用流式细胞术、实时定量PCR和Western blot方法分别检测异基因CD4^＋或CD8^＋ T淋巴细胞对脐静脉内皮细胞（HUVEC）中TF、VCAM-1、TNF-α、IFN-γ、IL-6以及MAPK表达的影响，观察抗TF抗体、p38MAPK和JNK阻滞剂对异基因T淋巴细胞诱导的HUVEC中细胞因子表达的影响。结果①在allo—HSCT后发生GVHD小鼠的皮肤、胃、小肠和肝组织中，TF在基因水平的表达为对照组的（15．1±2．1），（5．5±1．4），（9．7±2．3），（14．3±2．9）倍，TF蛋白的表达水平分别为对照组的（13．5±2．7），（6．2±0．9），（7．9±1．6），（15．3±3．2）倍；②异基因T淋巴细胞可显著诱导HUVEC中TF、VCAM-1、TNF—α、IFN-γ和IL-6的表达；异基因T淋巴细胞作用后，HUVEC中p38MAPK和JNK磷酸化增强，而磷酸化ERK无变化。p38MAPK和JNK阻滞剂可显著降低异基因CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞诱导HUVEC的TF表达。抗TF抗体和p38MAPK、JNK阻滞剂均可下调异基因T淋巴细胞诱导的HUVEC中VCAM-1、TNF-α、IFN-γ和IL-6的表达。结论TF通过细胞内信号通路p38MAPK和JNK参与了GVHD导致的血管内皮细胞损伤和活化。

关键词：移植物抗宿主病组织因子 T淋巴细胞血管内皮细胞丝裂原激活蛋白激酶类

组织因子表达对原发性结直肠癌侵袭及转移能力的影响

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中华外科杂志 2004年第3期42卷 149-153页

作者：万远廉姚宏伟叶京明刘玉村吴涛汪欣潘义生吴楠鞠晓明朱静黄莚庭北京大学第一医院普通外科 100034

目的　探讨组织因子 (TF)表达在原发性结直肠癌侵袭及转移中的作用 ,分析TF对人类大肠癌HT 2 9细胞侵袭能力的影响。方法　应用免疫组织化学染色法研究 85例原发性结直肠癌和 6例结直肠良性腺瘤标本TF表达情况 ,分析TF表达与肿瘤侵袭转... 详细信息

目的　探讨组织因子 (TF)表达在原发性结直肠癌侵袭及转移中的作用 ,分析TF对人类大肠癌HT 2 9细胞侵袭能力的影响。方法　应用免疫组织化学染色法研究 85例原发性结直肠癌和 6例结直肠良性腺瘤标本TF表达情况 ,分析TF表达与肿瘤侵袭转移及预后的关系 ;利用构建有正义 /反义TFcDNA的质粒pcDNA3 1/Zeo ,以脂质体法转染HT 2 9细胞 ;转染成功的HT 2 9细胞采用Western印迹分析检测TF表达水平并进行基质胶体外侵袭实验观察细胞侵袭能力的变化。结果85例结直肠癌标本中 4 0例 (4 7 1% )TF表达阳性 ,正常黏膜和结直肠良性腺瘤均为TF阴性表达 ;TF阳性表达与结直肠癌的浸润深度密切相关 (r =0 895 ,P <0 0 1) ;TF阳性表达与结直肠癌的同时性 (r =0 974 ,P <0 0 1)和异时性 (r =0 96 3,P <0 0 1)肝转移均密切相关 ;Logistic回归表明TF表达为结直肠癌肝转移的影响因素 (P <0 0 1) ,多因素回归分析表明TF表达是影响原发性结直肠癌预后的因素之一 (P <0 0 1) ;转染了正义TFcDNA的HT 2 9细胞的TF表达水平较未转染的HT 2 9细胞升高 ,转染了反义TFcDNA的HT 2 9细胞的TF表达水平则降低 ;转染了正义TFcDNA的HT 2 9细胞的侵袭能力较未转染的HT 2 9细胞增强 ,转染了反义TFcDNA的HT 2 9细胞的侵袭能力则减弱。结论TF?

关键词：组织因子表达原发性结直肠癌侵袭转移

组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭及与基质金属蛋白酶类的相关性研究

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北京大学学报（医学版） 2005年第3期37卷 265-268页

作者：汤坚强万远廉刘玉村戎龙汪欣吴涛潘义生叶京明姚宏伟朱静北京大学第一医院普通外科北京100034 北京大学第三医院普通外科

目的:探讨组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭的机制,研究其与MMP 2和MMP 9的相关性。方法:获取转染正义/反义TFcDNA的人类大肠癌HT 29细胞系/LoVo细胞系裸鼠皮下种植瘤标本,应用Westernblot和RT PCR技术,检测转染组和对照组肿瘤组织中MMP ... 详细信息

目的:探讨组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭的机制,研究其与MMP 2和MMP 9的相关性。方法:获取转染正义/反义TFcDNA的人类大肠癌HT 29细胞系/LoVo细胞系裸鼠皮下种植瘤标本,应用Westernblot和RT PCR技术,检测转染组和对照组肿瘤组织中MMP 2和MMP 9的蛋白和mRNA表达水平;同时采用明胶酶谱法检测转染反义LoVo细胞系培养上清中的MMP 2和MMP 9活性的变化。结果:与对照组相比较,转染正义TFcDNA的HT 29细胞系成瘤标本TF表达升高,其所对应的MMP 9和MMP 2蛋白水平和mRNA水平表达也明显升高; 转染反义TFcDNA的LoVo细胞系成瘤标本中的TF,MMP 9和MMP 2蛋白和mRNA水平表达明显低于对照组,转染反义TFcDNA的LoVo细胞系培养上清液中的MMP 9和MMP 2活性较对照组低;MMP 9和MMP 2表达与组织因子表达具有相关性。结论:组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭,其部分机制可能与组织因子上调MMP 9和MMP 2的表达有关,组织因子可能是大肠癌细胞分泌MMPs的内在激动剂。

关键词：组织因子大肠癌细胞基质金属蛋白酶类相关性研究人类 HT-29细胞系 mRNA水平 Western MMP-9活性 MMP-2蛋白 MMP-2表达 LoVo mRNA表达转染反义癌细胞侵袭皮下种植瘤 PCR技术明胶酶谱法培养上清液对照组 blot 肿瘤组织

组织因子和基质金属蛋白酶-9在乳腺癌中的表达与预后分析

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中国肿瘤临床 2008年第1期35卷 22-25页

作者：赵建新林增茂姚宏伟万远廉北京大学第一医院普通外科北京市100034 北京大学第三医院

目的:研究乳腺癌组织中组织因子(tissuefactor,TF)和基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的表达并分析其阳性表达与预后的关系。方法:应用二步法(EnVision)免疫组化方法检测71例乳腺癌组织中TF和MMP-9的表达情况并分析... 详细信息

目的:研究乳腺癌组织中组织因子(tissuefactor,TF)和基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的表达并分析其阳性表达与预后的关系。方法:应用二步法(EnVision)免疫组化方法检测71例乳腺癌组织中TF和MMP-9的表达情况并分析其随访资料。结果:TF和MMP-9在71例乳腺癌组织中染色阳性率分别为43.7%和42.3%。K-M法单因素分析显示其阳性表达患者的5年生存率低于阴性患者(P因子,而TF、MMP-9不能作为独立预后因子(P>0.05)。结论:TF和MMP-9在乳腺癌组织中的阳性表达率较高,对判断患者的预后有一定的作用。

关键词：乳腺癌基质金属蛋白酶组织因子免疫组织化学预后

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组织因子在兔急性肺栓塞肺动脉的表达

中华急诊医学杂志 2013年第12期22卷 1365-1368页

作者：张敬霞陈永利周毓玲郭倩玉王佩显天津市胸科医院心内科天津300051 中国医学科学院血液学研究所天津医科大学总医院心内科

目的探讨急性肺栓塞肺动脉组织因子（TF）表达水平的改变及临床意义。方法由中国医学科学院血液学研究所提供实验设备和条件。选用日本大耳白纯种家兔34只（实验动物二级，天津医科大学提供），随机（随机数字法）分为肺栓塞3h组（A组）... 详细信息

目的探讨急性肺栓塞肺动脉组织因子（TF）表达水平的改变及临床意义。方法由中国医学科学院血液学研究所提供实验设备和条件。选用日本大耳白纯种家兔34只（实验动物二级，天津医科大学提供），随机（随机数字法）分为肺栓塞3h组（A组）8只，肺栓塞8h组（B组）8只，肺栓塞24h组（C组）8只，实验对照组（D组）10只。沿兔耳缘静脉取血2mL制成血栓，沿颈静脉插入5F导管并注入血栓，建立急性肺栓塞动物模型。经数字减影检查证实肺栓塞成功。对照组不注入血栓，其余步骤与栓塞组相同。取材栓塞3、8和24h后的栓塞部位、栓塞远端和对照组正常肺动脉组织，应用RT—PCR方法检测组织内TFmRNA的表达水平。多组均数比较用方差分析，有统计学意义后用两两比较的q检验。结果肺栓塞3、8和24h组，三组间栓塞部位肺动脉TF表达差异无统计学意义。栓塞3h，8h组，栓塞远端肺动脉TF表达为（0．40±0．29），（0．15±0．05）显著低于栓塞部位肺动脉（1．10±0．21），（0．84±0．22）和正常肺动脉（0．86±0．34）（F值为10．72，20．04，P〈0．01）。栓塞24h组，栓塞、未栓塞和正常肺动脉之间比较差异无统计学意义。结论肺栓塞3h后栓塞远端肺动脉TF表达下降，然栓塞部位TF表达并无下降，这种局部高凝活性不利于血栓的溶解。因此针对栓塞局部的溶栓和抗凝治疗是一种有效的治疗方法．

关键词：肺栓塞组织因子肺动脉基因表达血栓抗凝溶栓兔

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组织因子对大肠癌细胞侵袭及血行转移的影响

中华外科杂志 2005年第19期43卷 1265-1267页

作者：万远廉戎龙刘玉村姚宏伟汪欣吴涛潘义生朱静北京大学第一医院外科 100034

目的分析组织因子(TF)表达对人类大肠癌细胞侵袭和血行转移能力的影响。方法利用构建有正义/反义组织因子cDNA(TFcDNA)的质粒pcDNA3.1/Zeo,以脂质体法转染人类大肠癌细胞HT29细胞及LoVo细胞;转染成功的HT29细胞及LoVo细胞采用WesternBlo... 详细信息

目的分析组织因子(TF)表达对人类大肠癌细胞侵袭和血行转移能力的影响。方法利用构建有正义/反义组织因子cDNA(TFcDNA)的质粒pcDNA3.1/Zeo,以脂质体法转染人类大肠癌细胞HT29细胞及LoVo细胞;转染成功的HT29细胞及LoVo细胞采用WesternBlot检测TF表达水平,通过裸鼠皮下成瘤观察细胞体内侵袭能力的变化;通过建立裸鼠体内肺转移及肝转移模型观察细胞体内血行转移能力的变化。结果转染了正义TFcDNA的HT29细胞及LoVo细胞的TF表达水平较未转染的HT29细胞及LoVo细胞升高,转染了反义TFcDNA的HT29细胞及LoVo细胞的TF表达水平则降低;转染了正义TFcDNA的HT29细胞的体内侵袭能力较未转染的HT29细胞增强,转染了反义TFcDNA的HT29细胞的体内侵袭能力则减弱;转染了正义TFcDNA的LoVo细胞的体内血行转移能力较未转染的LoVo细胞增强,转染了反义TFcDNA的LoVo细胞的体内血行转移能力能力则减弱。结论TF可以促进人类大肠癌细胞的侵袭和血行转移的能力。

关键词：凝血致活酶肠肿瘤转染 HT-29细胞 Lovo细胞癌细胞侵袭大肠癌细胞血行转移组织因子 LoVo细胞

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组织因子与肿瘤患者静脉血栓栓塞

浙江大学学报（医学版） 2020年第6期49卷 772-778页

作者：朱慧琦应可净浙江大学医学院附属邵逸夫医院呼吸内科国家呼吸疾病区域医疗中心浙江杭州310016

恶性肿瘤是静脉血栓栓塞(VTE)的重要获得性危险因素之一。组织因子作为体内凝血因子Ⅶ和活化形式的凝血因子Ⅶa的跨膜受体,是机体外源性凝血过程的主要起始物。肿瘤细胞表达释放的组织因子阳性微粒进入循环参与介导手术治疗和肿瘤远处... 详细信息

恶性肿瘤是静脉血栓栓塞(VTE)的重要获得性危险因素之一。组织因子作为体内凝血因子Ⅶ和活化形式的凝血因子Ⅶa的跨膜受体,是机体外源性凝血过程的主要起始物。肿瘤细胞表达释放的组织因子阳性微粒进入循环参与介导手术治疗和肿瘤远处转移患者的血栓形成;化疗后组织因子促凝活性增强导致很多肿瘤患者接受化疗后更容易发生血栓栓塞性疾病。在胰腺癌、结直肠癌和卵巢癌等肿瘤中,组织因子还可以用于预测患者VTE风险。本文总结了近年来组织因子在不同治疗阶段的肿瘤患者VTE中的作用,进一步明确组织因子与肿瘤患者VTE风险之间的关系。

关键词：静脉血栓栓塞组织因子肿瘤治疗肿瘤转移风险预测综述