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提高组织切片标本质量的要点

解剖学杂志 2012年第5期35卷 686-689页

作者：姚建设皖南医学院形态学实验中心芜湖241002

组织切片标本的制作技术既是组织学，也是病理学、法医学、生物学等用来观察和研究组织细胞正常形态结构和病理变化最常用的方法。要制作1张组织切片标本并不难，但要制作1张优质满意的组织切片也并非那么容易。因此，笔者以教学、科研... 详细信息

组织切片标本的制作技术既是组织学，也是病理学、法医学、生物学等用来观察和研究组织细胞正常形态结构和病理变化最常用的方法。要制作1张组织切片标本并不难，但要制作1张优质满意的组织切片也并非那么容易。因此，笔者以教学、科研、临床病理检验工作中应用最广泛、最常用而又最有价值的石蜡切片苏木精、伊红染色法（简称H—E染色）为例，从实用角度出发，对该方法的基本操作程序和主要步骤的技术操作要点及相关事项，谈一点自己的见解。

关键词：组织切片标本质量伊红染色法制作技术基本操作程序病理变化形态结构组织细胞

禽戊型肝炎病毒组织切片免疫荧光检测方法的建立及应用

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畜牧兽医学报 2014年第11期45卷 1851-1857页

作者：陈瑞爱李延鹏同戈郭凯刘正伟华南农业大学兽医学院广州510642 农业部动物疫病防控生物技术与制品创制重点实验室肇庆526238 广东省兽用生物制品生物技术研究与应用企业重点实验室肇庆526238

为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白... 详细信息

为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白的单因子血清具有良好的特异性,利用组织切片免疫荧光方法能够特异地检测禽HEV的感染,从而有效地区分HEV与易混淆的ALV、REV的感染。建立的鉴别诊断禽HEV的组织切片免疫荧光方法,可以有效地诊断禽HEV感染,给实验室诊断带来极大的方便。

关键词：禽戊型肝炎病毒组织切片免疫荧光鉴别诊断

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组织切片微区采样方法研究

组织切片微区采样方法研究

作者：常婉晴东南大学

学位级别：硕士

近年来,单细胞测序、空间转录组测序等技术凭借其能够深入挖掘细胞异质性信息的特点而迅速发展。基于单细胞的组学研究可以获得单细胞分辨率的数据信息,通过对细胞异质性的探究有助于细胞分类、时序分析、肿瘤分析等研究,解决以往通过... 详细信息

近年来,单细胞测序、空间转录组测序等技术凭借其能够深入挖掘细胞异质性信息的特点而迅速发展。基于单细胞的组学研究可以获得单细胞分辨率的数据信息,通过对细胞异质性的探究有助于细胞分类、时序分析、肿瘤分析等研究,解决以往通过多细胞样本研究,用平均数据代替个体研究的传统分析所遇到信息不真实问题。单细胞转录组测序技术的应用大大拓宽了人们的视野,使人们能够深入了解组织中细胞构成的多样性和基因表达状态,使用单细胞转录组测序技术能够解析时间维度上细胞类型和基因表达的变化过程。但是,基因表达还具有空间特异性,传统的单细胞测序丢失了空间信息,空间转录组测序可以保留细胞的空间位置信息,揭示细胞间的相互作用。单细胞测序与空间转录组测序的首要步骤是单细胞分离或组织微区分离,采样的好坏直接决定着后续的分析结果。本文分别探究了基于微针采样和基于激光诱导前向转移(Laser-induced forward transfer,LIFT)的组织切片微区采样方法。微针采样是基于传统机械显微操作的单细胞分离方法;LIFT是基于脉冲激光的一种新技术。论文的主要研究内容如下:一、基于微针的采样方法:采用显微操作装置搭载毛细管微针,在显微镜下实时观察,并进行组织切片微区采样,探究了采样效果以及各项参数对采样的影响。使用PDMS载玻片进行微针采样,有利于保护微针的完整性,进而提高采样成功率。微针尖端尺寸越小,微针直接戳取采样质量越高,成功率也越高。微泵气路控制并搭载毛细管微针采样,不仅提高了采样完整性,而且提升了采样效率。微针采样可以达到单细胞尺寸的组织采样并且采样效率可达80%。二、基于飞秒LIFT的采样方法:首先设计并搭建了LIFT装置,基于飞秒激光器进行光路设计,完成采样前期准备;然后通过采样、收集、扩增、凝胶电泳等实验过程验证LIFT采样可行性。此外,还探究了光圈大小和激光功率对采样尺寸的影响,实验结果表明采样尺寸随光圈、功率的增大而增大。三、皮秒LIFT采样仪器的研制:探讨了纳秒、皮秒和飞秒激光对LIFT的影响,选择了易于集成的微型皮秒光纤激光器作为LIFT的激光光源,组装了LIFT仪器,探究了使用皮秒光纤激光进行LIFT采样的可行性,并探索了激光器电流对采样尺寸的影响。此外,还对LIFT和激光捕获显微切割(Laser capture microdissection,LCM)的优缺点进行了比较,实验结果证明了本文研制的LIFT采样仪器的实用性,突出了LIFT仪器低损伤、高效率等优点。

关键词：组织切片单细胞分离微区采样微针激光诱导前向转移(LIFT)

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组织切片图像的细胞核分割方法

组织切片图像的细胞核分割方法

作者：董丹茹电子科技大学

学位级别：硕士

伴随着整个载玻片成像扫描仪的出现,组织病理学载玻片逐渐实现了数字化并可以用数字图像的形式存储。与之同步的是,一些需要依赖计算机技术才可以执行的病理细胞的检测及辅助医护人员进行病况诊断的新兴科技也吸引着广大的科研人员。在... 详细信息

伴随着整个载玻片成像扫描仪的出现,组织病理学载玻片逐渐实现了数字化并可以用数字图像的形式存储。与之同步的是,一些需要依赖计算机技术才可以执行的病理细胞的检测及辅助医护人员进行病况诊断的新兴科技也吸引着广大的科研人员。在临床医学中,病理切片图像的分割与识别对癌症和疾病的诊断有非常重要的价值,传统的分割方法由病理医生手动进行勾画,但由于数据的复杂性和数量的密集度,无疑对医生的工作构成了挑战,致使错误诊断的情况更容易发生。本文以脑胶质瘤细胞核组织为对象,对临床医学上的数据和细胞核分割挑战赛的数据集进行了处理。主要研究和创新如下:结合切片制作过程的特殊性,对比了几种去噪方法并采用自适应中值滤波器对这些噪声进行了去噪预处理。对于细胞核的初步分割,针对实验数据具有复杂的前景背景以及边界模糊的组织学特征,本文在模糊聚类的思想上改进了一种复杂前景背景分割的聚类算法。首先,构造了多分类到二分类的转换模型,并在该模型的基础上进行了算法的改进,用来解决复杂图像模糊细小边界处的分割问题,同时降低初始聚类中心选择的随机性对分割结果的负面影响;然后,在此基础上对图像进行形态学修补,使细胞核的分割更完整;最后,利用Dice系数对比了改进聚类算法与未改进算法的实现效果。聚类的结果表现为细胞核的边界锯齿化明显,结合水平集算法具有轮廓拟合的性质,本文进一步对细胞核进行了改进水平集方法的准确分割。当对距离相近的多个目标进行演化时,曲线之间会存在相互吸引的情况,因此本文通过增加位置约束避免了曲线融合。同时文中改进了一种快速实现方案,加速了水平集演化的速度,在保证分割准确度的同时可进一步提高分割效率。最后,分析对比了位置约束水平集模型的效果并验证了快速水平集方案的高效性。对粘连性细胞核,文中用同时进行内外标记的距离变换图并结合分水岭算法成功分割。将上述方法中一系列的功能进行了工程实现,方便了病理专家的分析与判断。同时将本文最终结果与医生手动ground truth图进行对比,获得了相对较高的准确率与重叠度。

关键词：细胞核分割组织切片复杂前景背景聚类算法水平集方法分水岭

从组织切片中提取单个细胞DNA进行PCR的方法

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中华病理学杂志 1997年第1期26卷 53-54,71页

作者：邓飞吕广能李甘地刘卫平成都华西医科大学病理学教研室

从组织切片中提取单个细胞ＤＮＡ进行ＰＣＲ的方法邓飞吕广能李甘地刘卫平聚合酶链反应（ＰＣＲ）敏感性极高，微量的ＤＮＡ污染也会导致假阳性的出现，所以对其模板ＤＮＡ纯度要求很高。而何杰金病侵犯的淋巴结中，肿瘤性成分Ｈｏｄｇ... 详细信息

从组织切片中提取单个细胞ＤＮＡ进行ＰＣＲ的方法邓飞吕广能李甘地刘卫平聚合酶链反应（ＰＣＲ）敏感性极高，微量的ＤＮＡ污染也会导致假阳性的出现，所以对其模板ＤＮＡ纯度要求很高。而何杰金病侵犯的淋巴结中，肿瘤性成分ＨｏｄｇＫｉｎ细胞和Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂ...

关键词：组织切片细胞DNA 单个细胞石蜡包埋组织 β-珠蛋白基因聚丙烯酰胺何杰金病基因表达细胞提取微吸管

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组织切片用漂烘应急处理仪的研制及使用

黑龙江畜牧兽医 2018年第2期 89-90页

作者：高雪丽廖秋萍杨朝辉孙赫孔程邓钰蓱牛有龙桂莎周艳清杜奕州安济山阿迪来·买买提井波塔里木大学动物科学学院

为了有效解决实验室突然断电导致组织切片漂烘中断的问题,研制了一种组织切片用漂烘应急处理仪。该漂烘应急处理仪主要由支撑架和箱体组成,箱体分为漂片箱和烤片箱,使用时将已切好的组织块小蜡片一片一片地依次放入漂片箱内进行漂片,一... 详细信息

为了有效解决实验室突然断电导致组织切片漂烘中断的问题,研制了一种组织切片用漂烘应急处理仪。该漂烘应急处理仪主要由支撑架和箱体组成,箱体分为漂片箱和烤片箱,使用时将已切好的组织块小蜡片一片一片地依次放入漂片箱内进行漂片,一定时间后小蜡片在水温的作用下缓缓舒展,然后用载玻片从水中将舒展好的蜡片捞出固定于载玻片之上,装入染色架后放到烤片箱进行烤片,利用乙醇或燃气进行加热达到漂烘的目的。通过使用该组织切片用漂烘应急处理仪有效保证了在突发状况下漂片和烤片流程所需要的条件,保证了实验室临时停电时实验能够有序进行。

关键词：组织切片漂烘漂烘应急处理仪研制应用

用单抗介导的免疫荧光试验检测组织切片中的禽网状内皮组织增生病病毒

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中国兽医学报 2005年第2期25卷 122-124页

作者：张志王锡乐庄国庆崔治中山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

以禽网状内皮组织增生病病毒 (Reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体 1 1B1 5 4作为一抗 ,建立了从组织病理切片中检测 REV的免疫荧光技术 (Mc- IFA)。运用该技术对人工接种 REV的肉鸡和疑似 REV病鸡的肝脏、脾脏、心脏和肾脏... 详细信息

以禽网状内皮组织增生病病毒 (Reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体 1 1B1 5 4作为一抗 ,建立了从组织病理切片中检测 REV的免疫荧光技术 (Mc- IFA)。运用该技术对人工接种 REV的肉鸡和疑似 REV病鸡的肝脏、脾脏、心脏和肾脏等器官的组织切片进行了检测 ,并与病毒分离和斑点杂交试验的敏感性和特异性进行了比较。结果表明 ,在人工接种的感染肉鸡中 ,3种方法均为阳性 ;在 30份疑似 REV的病料中 ,用 Mc- IFA可以检测出 1 0份阳性 ,而病毒分离只有 8份样品为阳性。由此表明 ,Mc- IFA的特异性和敏感性均较高 ,完全可以用于

关键词：禽网状内皮组织增生病病毒单克隆抗体免疫荧光试验组织切片

鼎突多刺蚁脑部组织切片方法初探及其脑部结构

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四川动物 2006年第3期25卷 549-551页

作者：金卓明贺丽清奚耕思陕西师范大学生命科学学院陕西西安710062

膜翅目昆虫蚂蚁具有明显的多态现象,社会性生活中的分工亦非常明确。而作为蚁科中的鼎突多刺蚁还有着较高的药用保健价值。因此对其神经系统的研究有着重要的生物学意义。但蚂蚁脑部坚硬的外骨骼使得对其的组织学切片有一定难度。本试... 详细信息

膜翅目昆虫蚂蚁具有明显的多态现象,社会性生活中的分工亦非常明确。而作为蚁科中的鼎突多刺蚁还有着较高的药用保健价值。因此对其神经系统的研究有着重要的生物学意义。但蚂蚁脑部坚硬的外骨骼使得对其的组织学切片有一定难度。本试验即对鼎突多刺蚁的脑部组织切片方法进行了摸索和研究。

关键词：鼎突多刺蚁脑组织切片方法

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角类药材组织切片方法的改进

沈阳药科大学学报 2016年第4期33卷 317-320页

作者：程海涛王维宁张志诚沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016 辽宁省药品检验检测院辽宁沈阳110023

目的改进制作角类药材组织切片的技术方法。方法采用滑走切片对角类药材进行常规切片取材,用质量分数为1%的番红溶液染色,用蒸馏水冲洗,用无水乙醇-冬青油(体积比为1∶1)溶液透明,最后用加拿大树胶封藏。结果采用此方法制片并在显微镜... 详细信息

目的改进制作角类药材组织切片的技术方法。方法采用滑走切片对角类药材进行常规切片取材,用质量分数为1%的番红溶液染色,用蒸馏水冲洗,用无水乙醇-冬青油(体积比为1∶1)溶液透明,最后用加拿大树胶封藏。结果采用此方法制片并在显微镜下观察发现,切片组织结构完整、细胞形态清晰、染色效果好,药材皮层组织、间质组织以及髓腔都清晰可见。结论该方法可为角类药材的真伪鉴别及教学质量的完善提供参考。

关键词：组织切片染色透明