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运动性疲劳状态下线粒体膜生物学特征的研究──Ⅱ．大鼠心肌和骨骼肌线粒体内膜流动性改变对内膜ATP酶活性的影响

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中国运动医学杂志 1996年第2期15卷 110-113页

作者：张勇李静先陈家琦吕梅张薇天津运动医学研究所

采用递增负荷力竭性运动模型，观察了ＳＤ大鼠急性运动至力竭后心肌和骨骼肌线粒体内膜流动性和ＡＴＰ酶活性的变化。发现心肌和骨骼肌线粒体内膜荧光偏振值和微粘度均较安静时增高，示内膜流动性显著降低（均Ｐ＜０．０１）；心肌和骨... 详细信息

采用递增负荷力竭性运动模型，观察了ＳＤ大鼠急性运动至力竭后心肌和骨骼肌线粒体内膜流动性和ＡＴＰ酶活性的变化。发现心肌和骨骼肌线粒体内膜荧光偏振值和微粘度均较安静时增高，示内膜流动性显著降低（均Ｐ＜０．０１）；心肌和骨骼肌线粒体内膜ＡＴＰ酶活性分别较安静时下降７４．３％和４５．７％（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。研究提示，力竭性运动后大鼠心肌和骨骼肌线粒体呼吸链内膜分子动力学改变直接影响内膜磷酸化过程，可能是运动性疲劳的线粒体膜分子特征之一。

关键词：疲劳运动心肌骨骼肌线粒体内膜 ATP酶

人类卵丘细胞线粒体内膜完整性对卵子及胚胎体外发育的影响

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人类卵丘细胞线粒体内膜完整性对卵子及胚胎体外发育的影响

作者：于红玲山东大学

学位级别：硕士

目的:通过检测人类卵子周围卵丘细胞的线粒体膜电位(△ψ m) 的改变,反映线粒体内膜的完整性,研究卵丘细胞线粒体内膜完整性及线粒体存活状态对卵子及胚胎体外发育的影响。方法:进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的23位患者常规超促... 详细信息

目的:通过检测人类卵子周围卵丘细胞的线粒体膜电位(△ψ m) 的改变,反映线粒体内膜的完整性,研究卵丘细胞线粒体内膜完整性及线粒体存活状态对卵子及胚胎体外发育的影响。方法:进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的23位患者常规超促排卵后取得155个卵子,用透明质酸酶拆除卵子周围的卵丘细胞,并对卵子进行成熟度的评估。对成熟的MⅡ期卵子进行ICSI操作后将卵子置于5%CO2、 37℃二氧化碳培养箱中培养。同时分别收集每个卵子的卵丘细胞,用磷酸盐缓冲液离心洗涤后,应用差速离心法抽提线粒体。吸取等量抽提好的线粒体样本采用亲脂性阳离子荧光染料JC-1(Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide) 染色,荧光分光光度计测定荧光强度值,并分别计算出相同细胞数下的荧光强度值。荧光强度值反映出线粒体膜电位的大小,进一步反映出线粒体内膜的完整性。ICSI后14-16小时观察记录卵子的受精情况, 继续培养观察胚胎的进一步发育情况。根据卵子成熟度、受精及胚胎发育情况将卵子及胚胎分组,对比各组间卵丘细胞线粒体荧光强度值,从而反映各组间线粒体膜电位的差异,由此分析人类卵丘细胞线粒体内膜完整性对卵子及胚胎体外发育的影响。结果:(1) GV期卵子较MⅠ期、MⅡ期卵子周围卵丘细胞的荧光强度值显著降低,MⅠ期卵子较MⅡ期卵子周围卵丘细胞的荧光强度山东大学硕士学位论文值显著降低,说明GV期、Ml期卵子卵丘细胞线粒体内膜完整性较 MH期卵子降低。(2)未受精MH期卵子组卵子周围卵丘细胞的荧光强度显著低于受精组,说明未受精组卵子周围卵丘细胞的线粒体内膜完整性较受精组MH期卵子组降低。(3)死亡的胚胎、含碎片较多的胚胎、发育停滞的胚胎同其他胚胎相比卵子周围卵丘细胞的荧光强度值显著性降低,说明死亡的胚胎、含碎片较多的胚胎、发育停滞的胚胎卵丘细胞线粒体内膜完整性较其他胚胎的卵子降低。结论:卵丘细胞线粒体内膜完整性反映线粒体的存活状态,内膜完整性降低影响卵子的成熟、受精及胚胎的体外发育。关键词:卵丘细胞;线粒体内膜;线粒体膜电位;卵母细胞;受精;胚胎发育;细胞凋亡

关键词：卵丘细胞线粒体内膜线粒体膜电位卵母细胞受精胚胎发育细胞凋亡

运动性疲劳状态下大鼠心肌线粒体内膜变化的研究

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中国应用生理学杂志 1995年第2期11卷 117-120页

作者：张勇李静先陈家琦张薇天津体育学院运动医学研究所

采用递增负荷力竭性运动模型，观察了Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠急性运动至力竭后心肌线粒体内膜流动性、ＮＡＤＨ－ＣｏＱ还原酶及ＡＴＰ酶活性的变化。结果表明，大鼠心肌线粒体内膜荧光偏振值较安静时显著增高（Ｐ＜０．０１... 详细信息

采用递增负荷力竭性运动模型，观察了Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠急性运动至力竭后心肌线粒体内膜流动性、ＮＡＤＨ－ＣｏＱ还原酶及ＡＴＰ酶活性的变化。结果表明，大鼠心肌线粒体内膜荧光偏振值较安静时显著增高（Ｐ＜０．０１），示膜流功性降低。线粒体内膜ＮＡＤＨ－ＣｏＱ还原酶和ＡＴＰ酶活性分别较安静时下降６１．６％和７４．３％（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。提示，力竭性运动后大鼠心肌线粒体内膜功能改变，其膜流动性和呼吸链酶活性变化，可能是运动性疲劳的重要膜分子机制之一。

关键词：力竭性运动线粒体内膜心肌

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线粒体内膜的结构和功能

惠阳师专学报 1992年第3期14卷 60-64页

作者：柴素芬

一、前言: 线粒体是各类真核细胞中广泛存在的一种细胞器,是在动物细胞中首先被发现的,1897年,Benda将其命名为“mitochondrion”。线粒体的形状是多种多样的,常因细胞种类不同和生理状况而异,在一般情况下呈条形或粒状,在电镜下呈“香... 详细信息

一、前言: 线粒体是各类真核细胞中广泛存在的一种细胞器,是在动物细胞中首先被发现的,1897年,Benda将其命名为“mitochondrion”。线粒体的形状是多种多样的,常因细胞种类不同和生理状况而异,在一般情况下呈条形或粒状,在电镜下呈“香肠”状,一般直径为0.5～1.0μ,长度为2—8μ。

关键词：线粒体内膜细胞种类电子传递细胞色素 NADH 寡霉素活性分析柄部还原酶铁硫蛋白

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琥珀酸脱氢酶与线粒体内膜的结合

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1976年第2期 137-149页

作者： BIOMEMBRANE GROUP, SHANGHAI BIOCHEMICAL INSTITUTE, ACADEMIA SINICA, SHANGHAI 中国科学院上海生物化学研究所生物膜组

1.从正丁醇抽提琥珀酸脱氢酶的pH曲线说明它与内膜结合的pK值为8.7;正丁醇的浓度有一临界值在3℃时约为8%;从抽提的温度曲线说明琥珀酸脱氢酶与内膜通过离子键结合的解离活化热甚低而通过疏水键结合的解离活化热在11℃以上时为26,000卡... 详细信息

1.从正丁醇抽提琥珀酸脱氢酶的pH曲线说明它与内膜结合的pK值为8.7;正丁醇的浓度有一临界值在3℃时约为8%;从抽提的温度曲线说明琥珀酸脱氢酶与内膜通过离子键结合的解离活化热甚低而通过疏水键结合的解离活化热在11℃以上时为26,000卡左右;抽提量与醇碳链长短没有直接关系。2.盐类如氯化钾、氯化钠抑制水溶性琥珀酸脱氢酶与碱处理心肌制剂的重组,醇类及非离子型去污剂则促进重组达130%左右,除了促进重组外,它们还明显地激活重组后的琥珀酸脱氢酶把电子递给细胞色素c的能力。3.硫茂甲酰基三氟丙酮(以下简称TTFA)对心肌制剂琥珀酸-细胞色素c还原酶活力的抑制作用受pH的影响。根据抑制百分数的pH曲线求得的pK值在5～10℃时约为8.5。4.通过以上三方面的实验结果说明琥珀酸脱氢酶主要以离子键与线粒体内膜结合而疏水键則起着辅助的作用。

关键词：琥珀酸脱氢酶制剂碱处理还原酶线粒体内膜细胞色素正常心肌正丁醇

琥珀酸脱氢酶与线粒体内膜的结合——泛醌的影响

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1981年第3期 259-266页

作者：汪静英唐海伦吴文土中国科学院上海生物化学研究所

猪心肌制剂经含水4%丙酮抽提除去泛醌(Q)及部分脂后,其琥珀酸细胞色素c还原酶活力丧失,但在反应系统中添加Q可恢复此活力。去Q制剂再经碱处理除去琥珀酸脱氢酶后,与新鲜制备的水溶性琥珀酸脱氢酶重组,其重组活力,包括结合的琥珀酸脱氢... 详细信息

猪心肌制剂经含水4%丙酮抽提除去泛醌(Q)及部分脂后,其琥珀酸细胞色素c还原酶活力丧失,但在反应系统中添加Q可恢复此活力。去Q制剂再经碱处理除去琥珀酸脱氢酶后,与新鲜制备的水溶性琥珀酸脱氢酶重组,其重组活力,包括结合的琥珀酸脱氢酶和琥珀酸细胞色素还原酶活力,与正常重组(未去除Q的)相比,结果相似,指出Q对琥珀酸脱氢酶与膜的结合无明显的影响,脂环境也不是重要因素。

关键词：琥珀酸脱氢酶泛醌 SDH 还原酶线粒体内膜

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能量化时线粒体内膜表面电荷的变化

生物物理学报 1986年第2期 94-100页

作者：程伯基曲肖武樊景禹林克椿沈子威王非沈淑敏北京医学院生物物理教研室清毕大学生物科学和技术系

本文报告用荧光探剂1,8—ANS和电泳激光光散射技术,研究鼠肝线粒体内膜在加入ATP的能量化过程中其膜表面电荷的变化。实验结果表明在加入ATP后线粒体内膜的能量化使其膜表面的负电荷减少。作者论讨了用上述二种方法研究线粒体内膜在能... 详细信息

本文报告用荧光探剂1,8—ANS和电泳激光光散射技术,研究鼠肝线粒体内膜在加入ATP的能量化过程中其膜表面电荷的变化。实验结果表明在加入ATP后线粒体内膜的能量化使其膜表面的负电荷减少。作者论讨了用上述二种方法研究线粒体内膜在能量化时表面电荷变化的有关问题。

关键词：线粒体内膜 ATP 负电荷电泳迁移阴电荷 ANS HEPES 表面电荷

生物膜能量偶联ATP酶的比较研究——Ⅱ.鼠肝线粒体ATP酶(F1)与人原发性肝癌线粒体内膜的杂交重组及其对肝癌发生的遗传控制的初步分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1976年第4期 307-317+400-402页

作者：刘树森蔡惠罗周德明高福鸿中国科学院北京动物研究所细胞室生物膜组

1974到1975年,我们用人原发性肝癌细胞的线粒体内膜进行ATP酶活力测定,结果证明人肝癌线粒体ATP酶活力极低(0.04～0.1微克分子/分/毫克蛋白)只相当于正常大鼠线粒体的1/10～1/25(0.49～1.07微克分子/分/毫克蛋白)。Walker肉瘤和人肝硬... 详细信息

1974到1975年,我们用人原发性肝癌细胞的线粒体内膜进行ATP酶活力测定,结果证明人肝癌线粒体ATP酶活力极低(0.04～0.1微克分子/分/毫克蛋白)只相当于正常大鼠线粒体的1/10～1/25(0.49～1.07微克分子/分/毫克蛋白)。Walker肉瘤和人肝硬变组织的线粒体与人肝癌的酶活力相近。电镜负染标本观察证明肝癌线粒体内膜大部分失去特征性的直径为90(?)的ATP酶颗粒,表现为光滑膜。ANS萤光探针的发射萤光光谱测定和2,4-二硝基酚的激活试验均证明人肝癌细胞线粒体内膜的ATP酶大量消失是肝癌细胞的特征之一。用提取的大鼠肝线粒体ATP酶(F)与人肝癌线粒体内膜进行人工杂交重组,结果证明,重组后的杂交膜的ATP酶活力比人肝癌线粒体内膜高6～11倍;寡霉素敏感性也显著提高。电镜负染标本观察表明杂交膜出现了典型的直径为90(?)的ATP酶的颗粒形态;ANS萤光增强效应测定证明杂交膜的萤光强度比肝癌膜高276%(相对单位);0℃低温处理2小时,ANS萤光强度不变;酶活力在0℃2小时后,仍相当于原来活力的90%。此项试验结果证明杂交重组获得成功。鼠肝线粒体ATP酶与人肝癌线粒体内膜杂交后的特性表现了与天然线粒体内膜的ATP酶的一系列相似的特性。讨论了ATP酶复合体杂交重组试验在探索肝癌发生与细胞中两个遗传系统控制的可能关系问题。

关键词：线粒体内膜 ANS 负染酶活力标本酶活性 F1 线粒体抗体 ATP 人原发性肝癌肝癌发生鼠肝生物膜偶联

呼吸链底物和抑制剂对线粒体内膜流动性的影响

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生物化学杂志 1986年第3期 37-43页

作者：程伯基冯元怡林克椿北京医科大学生物物理教研室

用DPH和ANS标记大鼠肝线粒体内膜,以稳态荧光偏振法,研究了呼吸链底物和抑制剂对内膜流动性的影响。1.苹果酸+谷氨酸、琥珀酸分别为底物,均能引起内膜流动性增加。2.琥珀酸对含心磷脂的脂质体的膜流动性无影响。3.在鱼藤酮存在的条件下... 详细信息

用DPH和ANS标记大鼠肝线粒体内膜,以稳态荧光偏振法,研究了呼吸链底物和抑制剂对内膜流动性的影响。1.苹果酸+谷氨酸、琥珀酸分别为底物,均能引起内膜流动性增加。2.琥珀酸对含心磷脂的脂质体的膜流动性无影响。3.在鱼藤酮存在的条件下,苹果酸+谷氨酸对内膜流动性的增加作用消失,但琥珀酸的作用仍然存在。有氰化钾时则琥珀酸的作用消失。4.不论外加底物存在与否,鱼藤酮使内膜的流动性下降,而氰化钾则使之增加。抗霉素A亦可使内膜的流动性增加。上述结果表明:线粒体内膜流动性与其功能密切相关。电子沿呼吸链传递使线粒体内膜流动性增加,这种变化可能与呼吸链成分的氧化还原态有关。

关键词：膜流动性线粒体内膜荧光偏振呼吸链电子传递氧化还原态