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纺锤体检查点功能复合物基因MAD1L1遗传变异与潮汕地区女性乳腺癌易感性研究

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癌变．畸变．突变 2018年第3期30卷 209-213页

作者：杨少宜张庆英吴俊东林秋强王锐锋郑庆元蔡奋汕头大学医学院公共卫生与预防医学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院广东汕头515041 汕头市澄海区人民医院广东汕头515899 汕头市金平区妇幼保健院广东汕头515041

目的:研究纺锤体检查点功能复合物基因MAD1L1基因变异与潮汕地区女性乳腺癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究,收集2015年12月—2017年12月在汕头大学医学院附属肿瘤医院住院的乳腺癌新发病例191例及同期社区健康对照225例,采用Taq... 详细信息

目的:研究纺锤体检查点功能复合物基因MAD1L1基因变异与潮汕地区女性乳腺癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究,收集2015年12月—2017年12月在汕头大学医学院附属肿瘤医院住院的乳腺癌新发病例191例及同期社区健康对照225例,采用TaqMan荧光双标记探针法对MAD1L1基因位点rs1801368进行基因分型。同时收集其人口学特征、女性生理生育相关信息、生活方式、既往病史及乳腺癌患者临床病理指标。结果:MAD1L1 rs1801368位点基因型CC、CT、TT的频率分布在病例组中分别为20.63%、42.86%、36.51%,在对照组中分别为30.14%、41.15%、28.71%,两组中分布的差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析表明,调整了年龄、初潮年龄、绝经状态等混杂因素后,相较于野生型纯合子CC,突变型纯合子TT增加乳腺癌患病风险(OR=3.399,95%CI:1.288-8.973,P=0.013)。结论:MAD1L1基因位点rs1801368多态性与潮汕地区女性乳腺癌易感性可能相关,携带TT基因型的较携带CC或CT基因型的女性患乳腺癌的风险高。

关键词：乳腺癌纺锤体检查点 MAD1L1 遗传易感性

纺锤体检查点蛋白MAD2在上皮性卵巢癌发生中的作用及其机制研究

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纺锤体检查点蛋白MAD2在上皮性卵巢癌发生中的作用及其机制研究

作者：罗洁浙江大学

学位级别：硕士

背景据美国癌症协会统计数据估计2006年美国卵巢癌患者死亡率仍居女性生殖系统肿瘤首位。卵巢癌高死亡率的部分原因在于2/3以上的卵巢癌患者在初次诊断时已是疾病进展期,缺乏有效的早期诊断策略。卵巢肿瘤有很大的异质性,其... 详细信息

背景据美国癌症协会统计数据估计2006年美国卵巢癌患者死亡率仍居女性生殖系统肿瘤首位。卵巢癌高死亡率的部分原因在于2/3以上的卵巢癌患者在初次诊断时已是疾病进展期,缺乏有效的早期诊断策略。卵巢肿瘤有很大的异质性,其中上皮性卵巢肿瘤占多数。随着组织病理学和分子生物学技术的发展,对卵巢肿瘤发生学和自然史的理解有了长足进步,将上皮性卵巢肿瘤的发生学分为两大类:Ⅰ型肿瘤是低分级惰性肿瘤,存在良性—交界性—恶性逐级发生过程,存在前体病变;Ⅱ型肿瘤是发展迅速的高分级侵袭性肿瘤,均直接发展形成,无明显的前体病变。此模型为正确理解卵巢癌这一复杂肿瘤的发生学提供形态学和分子框架,为早期诊断和治疗卵巢癌,改善卵巢癌病人长期生存提供线索。现代细胞遗传学和分子生物学研究表明,染色体不稳定性（chromosomal instability CIN）是大部分癌症的显著特征,是肿瘤发生发展和肿瘤异质性的发动机。随着CIN分子机制研究的不断进展,其中一些维持染色体稳定的分子遗传变异或异常表达,例如纺锤体检查点蛋白异常表达等,也可能导致肿瘤的发生。所以这些异常改变均有可能成为肿瘤诊断标记和治疗靶点。纺锤体检查点确保染色体的稳定性,它包括MAD（Mitotic arrest deficiency）和BUB（budding uninhibited by benzimidazole）等成分,其中MAD2是关键成分,它通过监视微管的粘附和感受压力变化两种方式感知染色体的错误分离,其下游作用点细胞周

关键词：卵巢肿瘤纺锤体检查点 MAD2 cyclin B1 细胞倍性细胞周期

纺锤体检查点蛋白BubR1和Cenp-E与肝癌细胞染色体数目异常的关系

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纺锤体检查点蛋白BubR1和Cenp-E与肝癌细胞染色体数目异常的关系

作者：刘斌重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究纺锤体检查点(spindle checkpoint,SCP)蛋白BubR1和Cenp-E在癌组织和正常肝组织表达差异,利用间接免疫荧光技术与RNAi技术在肝癌细胞系(HepG-2)和正常肝细胞系(LO2)中进一步研究SCP基因BubR1和Cenp-E在肝癌细胞中的定位和作用... 详细信息

目的:研究纺锤体检查点(spindle checkpoint,SCP)蛋白BubR1和Cenp-E在癌组织和正常肝组织表达差异,利用间接免疫荧光技术与RNAi技术在肝癌细胞系(HepG-2)和正常肝细胞系(LO2)中进一步研究SCP基因BubR1和Cenp-E在肝癌细胞中的定位和作用。为进一步阐明肝癌细胞染色体数目异常的机理奠定基础。方法:1.用FQ-PCR和Western-blot,间接免疫荧光来检测SCP基因BubR1和Cenp-E在肝癌组织和正常肝组织基因和蛋白的表达情况。2.用染色体分析技术分析人类肝癌细胞系(HepG-2)和人类正常肝细胞系(LO2)染色体数目异常情况。3.用Nocodazole(诺考达唑)同时处理HepG-2细胞和LO2细胞使两种细胞高度同步在分裂期,流式细胞仪测定处理前后的HepG-2细胞和LO2细胞同步在分裂期情况。4.利用FQ-PCR和Western-blot检测BubR1和Cenp-E基因在两种同步化的细胞mRNA和蛋白的表达水平。5.间接免疫荧光技术观察Cenp-E蛋白在两种细胞中的定位及表达。6.在LO2细胞中用RNAi技术干扰Cenp-E基因后,用FQ-PCR和Western-blot检测BubR1和Cenp-E基因在干扰前后mRNA和蛋白的表达水平。并利用MTT,间接免疫荧光进一步评价干扰后的细胞功能情况。结果:1.FQ-PCR和Western-blot,间接免疫荧光检测BubR1、Cenp-E基因在肝癌组织和正常肝组织表达,发现BubR1和Cenp-E在正常肝组织的表达明显高于肝癌组织,差异有统计学意义。2.染色体分析发现HepG-2细胞染色体数目异常程度明显高于LO2细胞,差异具有统计学意义。3.用流式细胞仪检测用Nocodazole处理前后的HepG-2细胞和LO2细胞发现处理前两种细胞G2-M期的比例差异不显著。处理后两种细胞的G2-M期细胞都大幅增加,但两组细胞中期细胞比例差异不显著。4.FQ-PCR和Western-blot结果显示, Nocodazole处理前BubR1和C-E基因和蛋白在LO2和HepG-2细胞中表达无显著差异,处理后BubR1和Cenp-E基因和蛋白在两种细胞表达都增高,但LO2细胞上调水平大于HepG-2细胞,差异具有统计学意义。5.间接免疫荧光结果显示Cenp-E蛋白主要定位细胞核内,并且在出现异常分裂的细胞核内Cenp-E蛋白的表达明显低于正常分裂的细胞核。6.在干扰Cenp-E后,MTT显示LO2细胞的生长明显减慢。间接免疫荧光显示干扰后的LO2细胞中出现核异常比例明显高于正常细胞。结论:BubR1和Cenp-E在正常肝组织的表达明显高于肝癌组织。BubR1和Cenp-E但LO2细胞应激上调水平大于HepG-2细胞,在LO2细胞干扰Cenp-E基因以后发现细胞增殖受到抑制。BubR1和Cenp-E过低表达可能是肝癌细胞染色体数目异常重要原因之一。

关键词：肝癌纺锤体检查点 Cenp-E BubR1 染色体数目异常

组蛋白去乙酰化酶抑制剂-FK228对人非小细胞肺癌A549细胞纺锤体检查点的影响

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中国细胞生物学学报 2013年第10期35卷 1470-1476页

作者：张旭辉赵名陈国柱成祥于晓妉军事医学科学院基础医学研究所应激医学研究室北京100850

HDACi-FK228是一种新型抗肿瘤药物,但其作用机制研究的尚未十分明确,为进一步阐明FK228杀伤肿瘤细胞的机制,该文应用流式细胞术检测FK228对非小细胞肺癌A549细胞周期的影响;应用免疫荧光染色和免疫印迹检测FK228对检查点蛋白Bub1及BubR... 详细信息

HDACi-FK228是一种新型抗肿瘤药物,但其作用机制研究的尚未十分明确,为进一步阐明FK228杀伤肿瘤细胞的机制,该文应用流式细胞术检测FK228对非小细胞肺癌A549细胞周期的影响;应用免疫荧光染色和免疫印迹检测FK228对检查点蛋白Bub1及BubR1定位和表达的影响;采用纺锤体检查点功能实验检测FK228对细胞检查点功能的影响。结果提示,FK228处理24 h后,G2/M期细胞比例由6.35%增至19.91%;FK228能够抑制检查点蛋白Bub1及BubR1着丝粒定位并上调两种蛋白表达;纺锤体检查点功能实验提示对照组经Nocodazole或Taxol处理后G2/M期细胞比例最高分别达35.74%及29.24%,而FK228处理组经上述两种药物处理后各时间点G2/M期细胞所占比例皆明显减少(最高所占比例分别仅为7.13%及6.03%),失去了随时相点的动态变化,提示FK228抑制了A549细胞纺锤体检查点在监测张力和黏附上的功能。该研究证实FK228能够通过影响纺锤体检查点蛋白着丝粒定位以及抑制纺锤体检查点的功能,进而干涉肿瘤细胞有丝分裂过程,有助于阐明HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。

关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂肿瘤细胞纺锤体检查点

纺锤体检查点蛋白Cenp-E过低表达与肝癌细胞染色体异常的关系

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湖南师范大学学报（医学版） 2011年第4期8卷 19-24页

作者：蔡勇彭爱红湖南博雅眼科医院检验科湖南长沙410007 湖南省临床检验中心湖南长沙410007

目的:探讨纺锤体检查点蛋白E(Cenp-E)基因在肝癌细胞中的定位和作用,为进一步阐明肝癌细胞染色体数目异常的机理奠定基础。方法:利用FQ-PCR检测Cenp-E基因在用Nocodazole(诺考达唑)同时处理HepG-2细胞和LO2细胞中mRNA的表达水平。用间... 详细信息

目的:探讨纺锤体检查点蛋白E(Cenp-E)基因在肝癌细胞中的定位和作用,为进一步阐明肝癌细胞染色体数目异常的机理奠定基础。方法:利用FQ-PCR检测Cenp-E基因在用Nocodazole(诺考达唑)同时处理HepG-2细胞和LO2细胞中mRNA的表达水平。用间接免疫荧光技术观察Cenp-E蛋白在用Nocodazole(诺考达唑)同时处理HepG-2细胞和LO2细胞中的定位及表达。在LO2细胞中用RNAi技术干扰Cenp-E基因后,用FQ-PCR检测Cenp-E基因在干扰前后mRNA表达水平。并利用间接免疫荧光进一步评价干扰后的细胞功能情况。结果:Nocodazole处理前Cenp-E基因和蛋白在LO2和HepG-2细胞中表达无显著差异,处理后Cenp-E基因和蛋白在两种细胞表达都增高,但LO2细胞上调水平大于HepG-2细胞,差异具有统计学意义。间接免疫荧光结果显示Cenp-E蛋白主要定位细胞核内,并且在出现异常分裂的细胞核内Cenp-E蛋白的表达明显低于正常分裂的细胞核。在干扰Cenp-E后,间接免疫荧光显示干扰后的LO2细胞中出现核异常比例明显高于正常细胞。结论:Cenp-E过低表达可能是肝癌细胞染色体数目异常重要原因之一。

关键词：肝癌纺锤体检查点 Cenp-E 染色体数目异常

纺锤体检查点蛋白Cenp-E在肝癌组织的表达及临床意义

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中南医学科学杂志 2014年第5期42卷 459-461页

作者：刘斌刘婧刘卓然汪翼吴广南华大学附属第二医院检验科湖南衡阳421001

目的观察纺锤体检查点蛋白(Cenp-E)在肝癌组织和人类正常肝组织表达水平的差异,以探讨Cenp-E蛋白在肝癌细胞中的表达及临床意义。方法用荧光定量PCR和Western blot分别检测Cenp-E基因和蛋白在肝癌组织和正常肝组织的表达水平。结果正常... 详细信息

目的观察纺锤体检查点蛋白(Cenp-E)在肝癌组织和人类正常肝组织表达水平的差异,以探讨Cenp-E蛋白在肝癌细胞中的表达及临床意义。方法用荧光定量PCR和Western blot分别检测Cenp-E基因和蛋白在肝癌组织和正常肝组织的表达水平。结果正常肝组织中Cenp-E基因mRNA水平(0.023 78±0.009 73)明显高于肝癌组织(0.014 58±0.008 73);Cenp-E蛋白表达量在正常肝组织中(0.656±0.012)明显高于在肝癌组织中的表达(0.301±0.009),且二者有显著性差异。结论 Cenp-E低表达在肝癌的发生过程中起重要作用。

关键词：纺锤体检查点 Cenp—E基因肝癌

纺锤体检查点Mad2基因在大肠癌的表达及临床意义

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中国肛肠病杂志 2002年第12期22卷 10-13页

作者：李刚强张洪福上海第455医院病理科上海200052 安徽医科大学病理教研室

为了解纺锤体检查点Mad2基因在大肠癌的表达概况，分析其临床意义，通过免疫组化法和免疫印迹法，检测大肠癌及大肠正常粘膜中纺锤体检查点Mad2基因的表达。大肠癌组织中Mad2的表达高于正常粘膜中Mad2的表达（P0.05）。腺癌组织Mad2表... 详细信息

为了解纺锤体检查点Mad2基因在大肠癌的表达概况，分析其临床意义，通过免疫组化法和免疫印迹法，检测大肠癌及大肠正常粘膜中纺锤体检查点Mad2基因的表达。大肠癌组织中Mad2的表达高于正常粘膜中Mad2的表达（P0.05）。腺癌组织Mad2表达量（C）/正常粘膜Mad2表达量（N）>2与淋巴结转移有关（P纺锤体检查点Mad2基因表达异常是大肠癌产生的机制之一，并与大肠癌的发生发展有关。C/N>2可能是大肠癌的一个重要预后指标。

关键词：纺锤体检查点 Mad2基因大肠癌表达

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纺锤体检查点生物学特性与肿瘤

国际妇产科学杂志 2011年第2期38卷 108-111页

作者：陈勇华王建六北京大学人民医院妇产科 100044

纺锤体检查点是在细胞有丝分裂期保证染色体正确分离的重要监控机制,维持着基因组稳定性。纺锤体检查点的分子调控机制已逐步明确,许多肿瘤细胞存在纺锤体检查点功能缺陷,纺锤体检查点表达量的失调、基因单核苷酸多态性及启动子甲基化... 详细信息

纺锤体检查点是在细胞有丝分裂期保证染色体正确分离的重要监控机制,维持着基因组稳定性。纺锤体检查点的分子调控机制已逐步明确,许多肿瘤细胞存在纺锤体检查点功能缺陷,纺锤体检查点表达量的失调、基因单核苷酸多态性及启动子甲基化等可能与其功能异常有关。抗肿瘤药物通过影响纺锤体检查点的表达而启动杀伤肿瘤效应。深入了解肿瘤纺锤体检查点调控机制,有助于发现新的杀灭肿瘤细胞的靶向化疗药物。

关键词：纺锤体检查点肿瘤有丝分裂染色体分离细胞周期

内体分选转运复合体:确保有丝分裂正确进行的分子机器

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中国医学科学院学报 2024年第2期46卷 287-292页

作者：高吴陆怡杨玉张鹏霞商宇佳木斯大学基础医学院微生态-免疫调节网络与相关疾病重点实验室黑龙江佳木斯154007

有丝分裂是真核细胞增殖的重要环节。内体分选转运复合体是与膜剪切过程密切相关的多蛋白复合体,其功能涉及内体成熟、病毒出芽、自噬等过程,其结构和功能异常与癌症等疾病发生发展密切相关。本文总结了内体分选转运复合体在细胞有丝分... 详细信息

有丝分裂是真核细胞增殖的重要环节。内体分选转运复合体是与膜剪切过程密切相关的多蛋白复合体,其功能涉及内体成熟、病毒出芽、自噬等过程,其结构和功能异常与癌症等疾病发生发展密切相关。本文总结了内体分选转运复合体在细胞有丝分裂不同阶段所发挥的作用,以及内体分选转运复合体调控有丝分裂作用在疾病方面的研究进展。

关键词：有丝分裂内体分选转运复合体纺锤体检查点癌症

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