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纳豆激酶对动脉粥样硬化家兔凝血和纤溶功能的影响

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临床心血管病杂志 2008年第6期24卷 447-451页

作者：迟东升靳凤霞阮新民吴焕林陈秋雄王云飞王侠江巍李新梅吴大嵘林小丽陈可冀广东省中医院心脏中心广州510515 山东省泰山疗养院内科北京西苑医院心内科

目的:观察家兔口服纳豆激酶(NK)对血液凝血和纤溶功能的影响。方法:32只新西兰白兔随机分为4组,每组8只,包括空白对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量NK组(C组)和高剂量NK组(D组),常规高脂饮食构建动脉粥样硬化模型。采用凝固法测定血浆... 详细信息

目的:观察家兔口服纳豆激酶(NK)对血液凝血和纤溶功能的影响。方法:32只新西兰白兔随机分为4组,每组8只,包括空白对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量NK组(C组)和高剂量NK组(D组),常规高脂饮食构建动脉粥样硬化模型。采用凝固法测定血浆凝血酶原(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)和凝血因子Ⅰ(Fg)浓度;ELISA法测定血液纤溶酶原激活剂(tPA)和纤溶酶原激活剂抑制物(PAI-1)浓度、RT-PCR法检测主动脉组织tPA和PAI-1 mRNA的表达、免疫组化法检测主动脉组织PAI-1蛋白表达。结果:与A组相比,B组的PT明显缩短,C、D组的APTT明显延长,Fg含量明显下降(P<0.01),以D组更明显;D组的tPA浓度明显增加[(0.91±0.17)∶(1.25±0.23)μg/L,P<0.05],B组的PAI-1显著增加[(2.00±0.45)∶(2.75±0.84)μg/L,P<0.05];C、D组的tPA mRNA表达较B组明显增加(分别为1.22±0.23和1.33±0.16∶0.64±0.10,P<0.01),PAI-1 mRNA则显著减少(分别为1.34±0.17和1.31±0.09∶1.90±0.18,P<0.01);免疫组化染色显示A组、B组、C组和D组的单位面积动脉内膜及中膜PAI-1阳性染色标记物的平均A值分别为(155.86±28.19)、(190.49±19.80)、(148.52±9.86)和(138.80±3.13),P<0.05或P<0.01。结论:NK可明显提高血液纤溶活性、降低凝血活性,显著增加动脉硬化组织tPA mRNA的表达、减少PAI-1 mRNA和蛋白的表达。

关键词：纳豆激酶纤溶功能凝血功能动脉粥样硬化

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纳豆激酶分子结构与潜在应用价值分析

食品与生物技术学报 2016年第4期35卷 342-349页

作者：马国兴潘峰王庆波温春光吴雅清许瑞安华侨大学分子药物研究院福建厦门361021 分子药物教育部工程研究中心福建厦门361021

纳豆激酶因具有较强的溶血能力而著称。目前国内外大量研究人员聚焦于纳豆激酶研究,其开发利用已经获得了长足发展,但同时许多问题与不足也随之暴露出来。一方面是对纳豆激酶的开发利用大多局限于溶栓活性的利用与开发,低估了纳豆激酶... 详细信息

纳豆激酶因具有较强的溶血能力而著称。目前国内外大量研究人员聚焦于纳豆激酶研究,其开发利用已经获得了长足发展,但同时许多问题与不足也随之暴露出来。一方面是对纳豆激酶的开发利用大多局限于溶栓活性的利用与开发,低估了纳豆激酶应有的整体价值;其次是针对该酶开发和利用的方法过于传统,尚未形成组学大数据和生物信息学技术相结合的探索思维。因此,需要利用更为开阔的研究思路和开发手段来实现纳豆激酶开发利用的最大化。作者从纳豆激酶分子水平和家族分类层次上系统地阐述该酶分子特征,同时对纳豆激酶家族蛋白酶的应用现状进行分析,并对纳豆激酶研发前景进行了展望。

关键词：纳豆激酶保守区域枯草芽孢杆菌蛋白酶 Peptidase-S8-subtilian-subset蛋白酶家族

纳豆激酶生产菌BSNK-5鉴定及发酵条件优化

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生物技术通报 2013年第2期29卷 184-189页

作者：李淑英聂莹杜欢赵仲麟袁超李燕宋晓燕唐选明中国农业科学院农产品加工研究所北京100193 河南农业大学理学院郑州450002 郑州轻工业学院食品与生物工程学院郑州450002 河南农业大学食品科学技术学院郑州450002

对分离的纳豆激酶生产菌BSNK-5进行初步鉴定;并对其液体发酵产酶条件进行了初步研究,旨在提高纳豆激酶的产量。通过鉴定BSNK-5为枯草芽孢杆菌属菌株。试验优化了发酵培养基的最适氮源和碳源种类及百分含量,发酵培养基的起始pH值,最适种... 详细信息

对分离的纳豆激酶生产菌BSNK-5进行初步鉴定;并对其液体发酵产酶条件进行了初步研究,旨在提高纳豆激酶的产量。通过鉴定BSNK-5为枯草芽孢杆菌属菌株。试验优化了发酵培养基的最适氮源和碳源种类及百分含量,发酵培养基的起始pH值,最适种子接种量,发酵温度,培养时间等。最终确定了两个最适的产酶条件,在该条件下,BSNK-5通过液体发酵产纳豆激酶的活力高达1 160 U/mL,比优化前提高283%。

关键词：枯草芽孢杆菌纳豆激酶液体发酵

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纳豆激酶的质量与安全评价研究进展

食品工业科技 2021年第23期42卷 413-419页

作者：王露露陈楠楠曹梦思李斌彭雪菲刘捷张静郭新光刘明别小妹南京农业大学食品科技学院江苏南京210095 中国食品发酵工业研究院北京100015 食品行业生产力促进中心北京100015 全国食品发酵标准化中心北京100015 北京农学院食品科学与工程学院北京102206

纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌在发酵纳豆过程中产生的一种丝氨酸蛋白酶,具有溶解血栓等生理功能。本文就纳豆激酶的溶栓功能及机制做了简要的总结,着重综述纳豆激酶活力测定方法等质量指标及其安全性评价研究进展,展望了纳豆激酶产品开发与... 详细信息

纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌在发酵纳豆过程中产生的一种丝氨酸蛋白酶,具有溶解血栓等生理功能。本文就纳豆激酶的溶栓功能及机制做了简要的总结,着重综述纳豆激酶活力测定方法等质量指标及其安全性评价研究进展,展望了纳豆激酶产品开发与质量安全研究方向,以期为纳豆及其制品(含纳豆激酶产品)标准化提供理论基础。

关键词：纳豆激酶质量与安全评价溶栓功能

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黑豆纳豆激酶冻干保护剂的选择

中国食品学报 2019年第8期19卷 112-118页

作者：韩翠萍刘庆冠刘畅张涵江连洲程建军东北农业大学食品学院

在添加壳聚糖的条件下,考察脱脂乳粉、蔗糖、麦芽糊精、麦芽糖、乳糖、海藻糖、山梨醇、抗坏血酸8种冻干保护剂对黑豆纳豆激酶冻干过程的保护效果。以纳豆激酶酶活保持率和纳豆菌存活率为指标,最终确定4种复合冻干保护剂组合,添加量分别... 详细信息

在添加壳聚糖的条件下,考察脱脂乳粉、蔗糖、麦芽糊精、麦芽糖、乳糖、海藻糖、山梨醇、抗坏血酸8种冻干保护剂对黑豆纳豆激酶冻干过程的保护效果。以纳豆激酶酶活保持率和纳豆菌存活率为指标,最终确定4种复合冻干保护剂组合,添加量分别为:脱脂乳粉16%,抗坏血酸1.2%,麦芽糊精8%,蔗糖8%。在此条件下,冻干后的纳豆激酶酶活保持率为79.8%,纳豆菌存活率为83.2%,效果较单一保护剂有较大提升。

关键词：纳豆激酶冻干保护剂酶活纳豆菌保护效果

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纳豆菌固态发酵青稞产纳豆激酶工艺优化研究

青海农林科技 2023年第3期 15-21页

作者：党斌青海大学农林科学院青海西宁810016 青海省青藏高原农产品加工重点实验室青海省农林科学院青海西宁810016 青藏高原种质资源研究与利用实验室青海西宁810016

以青稞(昆仑20号)为发酵基料,纳豆枯草芽孢杆菌BSCZ-4为发酵菌株,采用单因素试验及响应面设计优化了纳豆菌固态发酵青稞生产纳豆激酶的最佳工艺参数。结果表明,纳豆菌固态发酵青稞生产纳豆激酶的最佳工艺条件为:浸泡时间为48 h,蒸煮时间... 详细信息

以青稞(昆仑20号)为发酵基料,纳豆枯草芽孢杆菌BSCZ-4为发酵菌株,采用单因素试验及响应面设计优化了纳豆菌固态发酵青稞生产纳豆激酶的最佳工艺参数。结果表明,纳豆菌固态发酵青稞生产纳豆激酶的最佳工艺条件为:浸泡时间为48 h,蒸煮时间为40 min,加水量为10%,接种量为6%,发酵温度为34℃,发酵时间为64 h,在此条件下得到纳豆激酶酶活力为5320.93 U/g。该结果可为青海青稞的深加工提供参考。

关键词：青稞纳豆激酶枯草芽孢杆菌固态发酵工艺优化

纳豆中纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶的分离过程研究

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高校化学工程学报 2005年第4期19卷 518-522页

作者：黄俊梅乐和胡升盛清许静吴晖姚善泾浙江大学化学工程与生物工程系浙江杭州310027 浙江理工大学生命科学学院浙江杭州310018 中美华东制药有限公司浙江杭州310011

采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株,与国内公开报道的不同菌株相比,有更好的产酶能力。菌株经过液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵盐析及SephadexG-75凝胶层析... 详细信息

采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株,与国内公开报道的不同菌株相比,有更好的产酶能力。菌株经过液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵盐析及SephadexG-75凝胶层析、SepharoseCMFastFlow离子交换层析对纳豆激酶进行了分离纯化,两步层析的纯化倍数和酶活回收率分别达到4.75、74.3%和1.32、77%,获得了纯度很高的纳豆激酶。

关键词：纳豆纳豆激酶纳豆枯草杆菌分离纯化

纳豆激酶固态发酵工艺参数的两种不同设计方法优化

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食品与发酵工业 2013年第1期39卷 134-141页

作者：田智斌董超史延茂张聪莎李君华河北工业大学化工学院生物工程系天津300100 河北省生物研究所细胞与生化研究室河北石家庄050081

采用响应面法和人工神经网络耦合遗传算法,对影响固态发酵产纳豆激酶的工艺参数进行了优化,并对这两种方法的优化效果进行评价。结果表明:在纳豆激酶固态发酵工艺参数优化中,采用人工神经网络耦合遗传算法较响应面法具有更好的数据拟合... 详细信息

采用响应面法和人工神经网络耦合遗传算法,对影响固态发酵产纳豆激酶的工艺参数进行了优化,并对这两种方法的优化效果进行评价。结果表明:在纳豆激酶固态发酵工艺参数优化中,采用人工神经网络耦合遗传算法较响应面法具有更好的数据拟合能力和预测准确度,纳豆激酶固态发酵工艺最佳参数:接种量4%,初始含水量55%,大豆装量90 g/250 mL,发酵温度36.09℃,蔗糖添加量1.5%,MgSO4.7H2O添加量0.21%,CaCl2添加量0.27%,发酵时间24 h。在该条件下发酵产物的最大酶活可达7 631.28±219.54 U/g,较单因素试验的最高水平提高了29.02%。

关键词：纳豆激酶固态发酵响应面法人工神经网络遗传算法

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纳豆激酶液态发酵生产的研究进展

食品与发酵工业 2017年第10期43卷 256-262页

作者：吴燕李英波梁向峰刘会洲肖建辉遵义医学院附属医院医药生物技术研究所贵州遵义563003 中国科学院过程工程研究所中国科学院绿色过程与工程院重点实验室北京100190 中国科学院青岛生物能源与过程研究所中国科学院生物基材料重点实验室山东青岛266101

纳豆激酶(EC 3.***.21.62)是一种具有强大溶栓活性的丝氨酸蛋白酶。与临床一线溶栓药物(尿激酶和链激酶)相比,纳豆激酶具有安全性好、成本低、半衰期长和可口服等优点,作为溶栓药物或保健食品备受关注。纳豆激酶主要通过固态和液态发酵生... 详细信息

纳豆激酶(EC 3.***.21.62)是一种具有强大溶栓活性的丝氨酸蛋白酶。与临床一线溶栓药物(尿激酶和链激酶)相比,纳豆激酶具有安全性好、成本低、半衰期长和可口服等优点,作为溶栓药物或保健食品备受关注。纳豆激酶主要通过固态和液态发酵生产来制备,但现有生产能力偏低,远不能满足市场需求。文中从高产纳豆激酶的菌株选育、培养基优化、发酵条件优化和培养方式等4个方面对近年来相关研究进行了综述,以期为纳豆激酶的生产和应用提供支持。

关键词：纳豆激酶微生物液态发酵溶栓药物