检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

纳米疫苗在禽流感防控中的研究进展

中国畜牧兽医 2023年第2期50卷 684-692页

作者：李琦田野黄涛刘存霞山东省农业科学院家禽研究所济南250100 西南大学动物医学院重庆402460

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)因其具有变异性强、亚型种类多、感染宿主多样性等特点,对畜牧业发展及公共卫生安全具有巨大的影响。目前,传统灭活疫苗在预防禽流感中虽起着重要作用,但仍存在免疫失败、多次接种及易出现不良反... 详细信息

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)因其具有变异性强、亚型种类多、感染宿主多样性等特点,对畜牧业发展及公共卫生安全具有巨大的影响。目前,传统灭活疫苗在预防禽流感中虽起着重要作用,但仍存在免疫失败、多次接种及易出现不良反应等弊端,因此,研制新型疫苗来弥补传统疫苗的不足非常有必要。纳米颗粒疫苗具有包裹性好、结构稳定、靶向性高和免疫原性强等优点,可作为新型流感病毒疫苗的候选。笔者首先介绍了禽流感难以防控的原因及纳米疫苗的特点,然后对病毒样颗粒疫苗、自组装蛋白疫苗、聚合物纳米颗粒疫苗、无机纳米颗粒疫苗及纳米颗粒的毒性机制方面进行综述,概述了近年来AIV纳米颗粒疫苗的研究进展,并简述了采用不同抗原、不同纳米材料及不同给药方式对免疫效果的影响,结合目前纳米疫苗的研究,预测了未来纳米颗粒疫苗可作为AIV防控的一种新途径,对禽流感纳米疫苗在兽医临床的应用前景进行了分析和展望。

关键词：禽流感纳米疫苗纳米材料抗原类型接种方式

纳米疫苗联合免疫检查点阻断协同增效肿瘤免疫治疗

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

纳米疫苗联合免疫检查点阻断协同增效肿瘤免疫治疗

作者：姜明霞潍坊医学院

学位级别：硕士

目的:肿瘤疫苗是肿瘤免疫治疗领域的研究热点,但由于体内传递效率低,其治疗效果受到严重影响。此外,肿瘤细胞可以通过多种机制逃避机体免疫系统的识别和攻击,肿瘤免疫逃避效应严重增加了肿瘤治疗的难度。为解决上述问题,本研究开发了纳... 详细信息

目的:肿瘤疫苗是肿瘤免疫治疗领域的研究热点,但由于体内传递效率低,其治疗效果受到严重影响。此外,肿瘤细胞可以通过多种机制逃避机体免疫系统的识别和攻击,肿瘤免疫逃避效应严重增加了肿瘤治疗的难度。为解决上述问题,本研究开发了纳米疫苗与免疫检查点阻断联合的治疗策略,以期协同提高肿瘤治疗疗效。方法:(1)利用天然多聚阳离子鱼精蛋白(PRT)作为载体材料,通过静电吸附作用结合带负电的肿瘤模型抗原卵清蛋白(OVA)和非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(Cp G)免疫佐剂,构成抗原和佐剂共递送纳米疫苗。通过Zeta电位及粒度分析仪和透射电子显微镜对纳米疫苗的物理性质进行了表征;在细胞水平上考察了纳米疫苗对骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)的毒性、纳米疫苗在BMDCs中的摄取、胞内定位及内涵体逃逸,研究了纳米疫苗刺激BMDCs的成熟作用。建立小鼠黑色素瘤模型,选用PD-1抗体(a PD-1),将纳米疫苗与a PD-1治疗相结合,探讨其联合治疗效果和协同作用机制,并对其生物安全性进行评价。(2)在我们前期工作的基础上,进一步构建了一种p H响应的载基因传递体系,将带负电的PD-L1沉默基因与聚乙烯亚胺(PEI)通过静电作用形成载基因复合物,进一步借助醛基化的聚乙二醇(PEG)原位遮蔽在载基因复合物表面,形成载基因纳米颗粒。在细胞水平上考察了载基因纳米颗粒在不同p H下对B16-OVA细胞的毒性、纳米颗粒在B16-OVA细胞中的摄取、胞内定位及DNA基因转染。建立小鼠黑色素瘤模型,将纳米疫苗与载基因纳米颗粒搭配给药,探讨其联合治疗效果和协同作用机制,并对其生物安全性进行评价。结果:(1)制得的PRT/Cp G/OVA纳米疫苗呈球形,颗粒大小均匀。纳米疫苗的粒径为133.5±15.3 nm,Zeta电位值在12.7±7.5 m V。体外细胞实验显示PRT/Cp G/OVA纳米疫苗具有良好的细胞相容性,可以有效地被树突状细胞(DCs)摄取,实现内涵体逃逸。此外,PRT/Cp G/OVA纳米疫苗可以明显上调DCs表面标志物CD80和CD86的表达,促进细胞因子TNF-α和IL-6的分泌。动物实验结果显示,与其他治疗组相比,PRT/Cp G/OVA纳米疫苗与a PD-1结合治疗组的肿瘤体积生长明显受到抑制。荷瘤小鼠在经免疫治疗后,小鼠肿瘤组织中的T细胞和OVA-CD8T细胞的浸润明显增加,小鼠肿瘤组织中的IFN-γ和TNF-α的分泌明显增加。H&E染色结果显示,PRT/Cp G/OVA纳米疫苗与a PD-1结合治疗组的肿瘤组织中细胞核皱缩凝聚,出现大量细胞坏死。(2)制得的PEG/PEI/DNA纳米颗粒对B16-OVA具有一定杀伤作用且在p H 6.8条件下细胞毒性更强;纳米颗粒在p H 6.8时能够被肿瘤细胞高效摄取,实现高效的DNA转染,大量药物可被载体携带进入细胞并分布于细胞及细胞核中。动物实验结果显示,与其他治疗组相比,PEG/PEI/DNA纳米颗粒与PRT/Cp G/OVA纳米疫苗结合治疗组的肿瘤的体积明显减小。荷瘤小鼠在经治疗后,小鼠肿瘤组织中的T细胞和CD8T细胞的浸润明显增加,PD-L1蛋白的表达明显降低,小鼠肿瘤组织中的IFN-γ和TNF-α的分泌明显增加。H&E染色结果显示,PEG/PEI/DNA纳米颗粒与PRT/Cp G/OVA纳米疫苗结合治疗组的肿瘤组织结构疏松,细胞呈现明显坏死。结论:(1)成功制备了PRT/Cp G/OVA纳米疫苗,该纳米疫苗无明显的细胞毒性,更容易被抗原提呈细胞(APCs)摄取,能够诱导未成熟DCs成熟,促进细胞因子释放,与a PD-1相结合具有较好的抑制肿瘤生长效果,利用疫苗激发产生强效的抗肿瘤免疫反应,同时借助抗体封锁肿瘤免疫逃逸效应,协同产生抗肿瘤免疫治疗效果。(2)成功制备了PEG/PEI/DNA载基因纳米颗粒,该纳米颗粒具有较高的肿瘤细胞杀伤力,可以响应肿瘤外弱酸性p H脱去PEG层,更容易被细胞摄取,并且具有较高的基因转染,纳米疫苗与PD-L1基因沉默结合可同步刺激机体抗肿瘤免疫应答,减少免疫逃逸,协同提高肿瘤免疫治疗效果。本研究将为纳米疫苗、免疫检查点阻断疗法和癌症免疫治疗的研究提供新的思路。

关键词：纳米疫苗免疫检查点阻断免疫治疗基因治疗

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

衣原体纳米疫苗的研究进展

中国人兽共患病学报 2022年第1期38卷 48-54,61页

作者：谢丽娟谢小平孙珍洁陆春雪南华大学病原生物学研究所衡阳421001 南华大学附属第一医院衡阳421001

衣原体疫苗接种的最终目的是刺激机体体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫应答的有机结合,以发挥抗感染保护作用、减少炎症病理的形成。衣原体抗原成分单独接种或与佐剂联合应用均不能全面激发机体的免疫应答。纳米粒子因具有降低毒副作用、... 详细信息

衣原体疫苗接种的最终目的是刺激机体体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫应答的有机结合,以发挥抗感染保护作用、减少炎症病理的形成。衣原体抗原成分单独接种或与佐剂联合应用均不能全面激发机体的免疫应答。纳米粒子因具有降低毒副作用、靶向输送、缓释、避免被酶降解、提高活性和稳定性等独特优势,为衣原体疫苗设计提供了新策略。应用于医学领域的纳米材料种类繁多,衣原体纳米疫苗已取得一定程度的进展,本文主要对纳米粒子脂质体和多聚体微粒在衣原体疫苗中的研究进展作简要概述。

关键词：衣原体纳米疫苗脂质体多聚体微粒

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

纳米疫苗的发展与应用

医药导报 2022年第11期41卷 1605-1614页

作者：吕蔚林陈朝霞雍土莹甘璐杨祥良华中科技大学生命科学与技术学院武汉430074 国家纳米药物工程技术研究中心武汉430074

传统疫苗在传染病防治领域发挥了重要作用,但其仍不同程度地存在安全性差、免疫原性低、稳定性差、难以诱导持久免疫反应等问题。纳米递送系统可提高抗原稳定性并靶向抗原提呈细胞,促进抗原提呈细胞成熟并激活特异性免疫反应。目前已有... 详细信息

传统疫苗在传染病防治领域发挥了重要作用,但其仍不同程度地存在安全性差、免疫原性低、稳定性差、难以诱导持久免疫反应等问题。纳米递送系统可提高抗原稳定性并靶向抗原提呈细胞,促进抗原提呈细胞成熟并激活特异性免疫反应。目前已有大量研究利用纳米递送载体制备高效疫苗。该文简要阐述纳米递送载体在增强疫苗免疫效应中的应用。

关键词：纳米递送系统纳米疫苗免疫激活响应

基于递送载体的纳米疫苗在传染病和癌症防治中的应用与展望

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药物评价研究 2024年第9期47卷 2168-2175页

作者：林锦闲张屹坤卜佳玉黄芝瑛耿兴超李芊芊潘东升中国食品药品检定研究院安全评价研究所药物非临床安全评价研究北京市重点实验室北京100176 中山大学药学院广东广州510006

传统灭活、减毒疫苗的感染风险和亚单位疫苗的低免疫原性限制了疫苗的临床应用,近年来,基于纳米递送载体的疫苗因其优秀的靶向递送、抗原呈递效果受到广泛关注。通过调控纳米递送载体的物理化学性质,基于纳米递送载体的疫苗可以模拟天... 详细信息

传统灭活、减毒疫苗的感染风险和亚单位疫苗的低免疫原性限制了疫苗的临床应用,近年来,基于纳米递送载体的疫苗因其优秀的靶向递送、抗原呈递效果受到广泛关注。通过调控纳米递送载体的物理化学性质,基于纳米递送载体的疫苗可以模拟天然感染过程,精准将特异性抗原快速递送到淋巴结或靶部位,促进抗原呈递细胞的成熟和抗原的交叉呈递,激活效应免疫细胞,诱导强大的免疫反应,纳米疫苗还能与免疫检查点抑制剂、肿瘤血管生成抑制剂等药物进行联合治疗,预防疾病的复发,降低其不良反应。综述了纳米递送载体的被动靶向、生物相容性、主动靶向、改善免疫应答和诱导黏膜免疫应答的功能,以及近年来基于纳米递送载体的疫苗在肿瘤免疫治疗、自身免疫性疾病和传染病预防等方面的应用进展,并讨论其未来发展与面临的挑战。

关键词：纳米递送载体纳米疫苗免疫应答免疫治疗传染病预防

基于生物素-亲和素系统的纳米疫苗用于肿瘤免疫治疗的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于生物素-亲和素系统的纳米疫苗用于肿瘤免疫治疗的研究

作者：张艳伟海南医学院

学位级别：硕士

目的:肿瘤疫苗是肿瘤免疫疗法中通过改善患者自身免疫系统治疗肿瘤的方法之一,它主要是利用肿瘤抗原刺激免疫系统达到杀死肿瘤细胞的目的,并可产生持续的免疫反应,以防止肿瘤转移和复发。然而,肿瘤抗原的免疫原性较低,不足以激活有效的... 详细信息

目的:肿瘤疫苗是肿瘤免疫疗法中通过改善患者自身免疫系统治疗肿瘤的方法之一,它主要是利用肿瘤抗原刺激免疫系统达到杀死肿瘤细胞的目的,并可产生持续的免疫反应,以防止肿瘤转移和复发。然而,肿瘤抗原的免疫原性较低,不足以激活有效的抗肿瘤免疫反应。因此,肿瘤疫苗往往需要通过理想载体共递送免疫佐剂和肿瘤相关抗原到体内,激发相应的免疫应答。纳米材料是一类理想的载体,不仅可以装载各种肿瘤抗原和佐剂,还能利用免疫细胞对纳米尺度颗粒物的天然摄取习性,提高免疫系统对肿瘤抗原的摄取、处理和递呈能力。在本研究中,我们设计了一种基于亲和素的纳米粒子Cy5.5-n Avidin-G250,利用生物素-亲和素的相互作用,在纳米粒子上分别装载生物素化的肿瘤模式抗原卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)以及生物素化的免疫佐剂Cp G寡脱氧核苷酸(Cp G oligonucleotide,Cp G ODN)制备出针对肿瘤模式抗原的纳米肿瘤疫苗,并应用于肿瘤的治疗和预防。方法:首先,我们将考马斯亮蓝G250(Coomassie brilliant blue G250,G250)和花青素5.5(Cyanine 5.5,Cy5.5)修饰到中性亲和素(Neutravidin,n Avidin)上,自组装形成Cy5.5-n Avidin-G250纳米颗粒,并将生物素化的OVA和Cp G装载到Cy5.5-n Avidin-G250纳米粒子上,最终获得Cy5.5-n Avidin-G250-OVA-Cp G纳米疫苗。然后通过透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)和纳米粒度分析仪对纳米疫苗的形貌和尺寸进行表征,同时观察纳米疫苗在不同溶液中的稳定性。在体外细胞实验中,通过CCK-8细胞毒性实验来评估纳米疫苗对正常细胞和免疫细胞增殖活力的影响;通过共聚焦显微镜和流式细胞仪观察树突状细胞吞噬纳米疫苗的情况;通过流式细胞仪检测纳米疫苗处理的细胞中表达共刺激分子CD80、CD86、CD40的骨髓来源树突状细胞(Bone marrow dendritic cell,BMDCs)的百分比以及免疫细胞分泌细胞因子的情况,评估纳米疫苗刺激树突状细胞成熟的情况;通过流式细胞仪检测细胞中H-2K-SIINFEKL阳性BMDCs的百分比,研究经纳米疫苗处理后BMDCs的抗原提呈情况。在体内动物实验中,通过小动物活体成像仪观察小鼠脏器与淋巴结的荧光强度,评估纳米疫苗的淋巴结靶向性;通过共聚焦显微镜观察淋巴结内树突状细胞的荧光强度,评估纳米疫苗是否进入淋巴结内的树突状细胞;通过流式细胞仪检测OVA特异性CD8T细胞,评估纳米疫苗是否刺激树突状细胞呈递抗原并生成OVA特异性CD8T细胞;通过流式细胞仪检测小鼠血清中细胞因子的表达水平以及通过ELISA法检测抗原特异性Ig G、Ig G2a和Ig G1的相对表达水平,分析抗原特异性抗体反应;通过建立表达OVA的B16黑色素瘤小鼠肿瘤模型,验证纳米疫苗Cy5.5-n Avidin-G250-OVA-Cp G对荷瘤小鼠的治疗效果及生物安全性。结果:透射电子显微镜显示纳米疫苗是形态均一的纳米粒子,纳米粒度仪测量的结果显示Cy5.5-n Avidin-G250-OVA-Cp G纳米疫苗水合直径约为41.78 nm、zeta电位为-15.71和多分散指数(Polydispersity index,PDI)为0.308。纳米疫苗在HO、PBS、RPMI 1640培养基和10%胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)中放置30天,仍保持良好的分散性,表明纳米疫苗有较好的稳定性。CCK-8细胞毒性实验结果表明纳米疫苗对正常细胞没有毒性,且在Cy5.5-n Avidin-G250-OVA-Cp G纳米疫苗浓度>50 mg L时,促进巨噬细胞和树突状细胞的增殖活力。体外研究表明经Cy5.5-n Avidin-G250-OVA(RB)-Cp G(FAM)处理的BMDCs内的荧光强度远高于游离RB-OVA组和FAM-Cp G ODN组的荧光强度,表明纳米疫苗更容易被树突状细胞吞噬(罗丹明B:Rhodamine B,RB)。共刺激分子的检测结果表明经纳米疫苗处理后,CD80CD86BMDCs的百分比明显高于其它组,且BMDCs中表达CD40的细胞百分比也明显高于其它组,表明纳米疫苗能有效地刺激树突状细胞成熟。纳米疫苗处理的细胞中H-2K-SIINFEKL阳性BMDCs的比例为11.1%,要远高于其它组,表明纳米疫苗能增强BMDCs的抗原提呈。流式液相多重蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测结果表明纳米疫苗可以诱导树突状细胞和巨噬细胞分泌大量的细胞因子(TNF-α、MCP-1、IL-6和IL-1

关键词：纳米疫苗生物素-亲和素系统肿瘤相关抗原佐剂

新型冠状病毒rS1-E-PLGA多价纳米疫苗的研发与免疫效果评价

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

新型冠状病毒rS1-E-PLGA多价纳米疫苗的研发与免疫效果评价

作者：黄佳璐南华大学

学位级别：硕士

[背景与目的]新型冠状病毒传染病是2019年发现并暴发的重大传染病。它严重影响我国乃至世界经济、社会发展。在新型冠状病毒疫情下,全世界感染甚至死亡人数每天都会发生。我国实施有效的防疫政策以及对疫苗研发的重大投入与全民免费接... 详细信息

[背景与目的]新型冠状病毒传染病是2019年发现并暴发的重大传染病。它严重影响我国乃至世界经济、社会发展。在新型冠状病毒疫情下,全世界感染甚至死亡人数每天都会发生。我国实施有效的防疫政策以及对疫苗研发的重大投入与全民免费接种政策让我国疫情得以快速控制。然而,疫情在国外迅速蔓延,全球许多国家被新型冠状病毒疫情所波及,疫苗远远供不应求。甚至,全球各地报告的新型冠状病毒变体不断出现,包括传染力极强的德尔塔株、奥密克戎株等这些变体导致的全球疫情二次暴发。在我国,仍然有部分人被这些变体感染。以新型冠状病毒变异株引起的疫情又有卷土重来的迹象。所以,为了应对全球疫苗不公以及新型冠状病毒突变,我们将设计研发一种生产工艺简单、再组装能力强的有效的纳米疫苗。它将以刺突蛋白的S1亚基和包膜蛋白拼接形成融合蛋白,并包覆在PLGA纳米粒上。[方法]在NCBI基因文库中找到SAR-Co V-2的基因组序列,挑选其中S1序列与E序列用Linker进行拼接成S1-E序列。将设计的S1-E序列进行生物信息学分析,主要是疏水性、抗原表位、三级结构预测。合成S1-E序列并且构建S1-E p ET-28a(+)重组质粒并进行转化、克隆和质粒提取。将提取的质粒验证后转入感受态细胞Rosetta(DE3)经IPTG诱导表达重组S1-E蛋白,并纯化该蛋白。用双乳蒸发法将重组S1-E蛋白包被在PLGA纳米粒上制成S1-E-PLGA纳米疫苗,并对纳米疫苗的表征进行检测。免疫小鼠并评价重组S1-E蛋白、S1-E-PLGA纳米疫苗的免疫效果。[结果]带有S1-E序列的重组质粒被成功构建并且重组S1-E蛋白在原核表达系统中成功表达,蛋白大小在50k Da左右。S1-E-PLGA纳米疫苗在扫描电镜下呈现球形,载药量为8.8,包封率为63.6%,粒径分布在670±145 nm,Zeta电位为-22.3±6.89m V。重组S1-E蛋白、重组S1-E蛋白+弗氏佐剂、S1-E-PLGA纳米疫苗分别接种于BALB/c小鼠后,相比于对照组,产生抗S1、E抗体和有效抗体有显著升高(P0.05)。[结论]重组S1-E蛋白、S1-EPLGA纳米疫苗能够刺激小鼠产生免疫应答;重组S1-E蛋白、S1-EPLGA纳米疫苗能够产生SARS-Co V-2中和抗体;PLGA作为疫苗递送载体在增强免疫效果上更优于弗氏佐剂。

关键词：新型冠状病毒刺突蛋白包膜蛋白 PLGA 纳米疫苗

不同抗骨髓瘤纳米疫苗的制备及其诱导的免疫应答研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同抗骨髓瘤纳米疫苗的制备及其诱导的免疫应答研究

作者：董文娟电子科技大学

学位级别：硕士

MART-1疫苗多肽特异性的细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,CTL)能有效裂解表达HM1.24的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞,但是该多肽的半衰期较短,以致其免疫原性较差,不能有效诱导肿瘤特异性CTL免疫应答的产生。寻找疫苗多肽的优... 详细信息

MART-1疫苗多肽特异性的细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,CTL)能有效裂解表达HM1.24的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞,但是该多肽的半衰期较短,以致其免疫原性较差,不能有效诱导肿瘤特异性CTL免疫应答的产生。寻找疫苗多肽的优良载体以保护疫苗多肽快速有效的到达抗原递呈细胞(Antigen-presenting cell,APC),以被APCs快速大量摄取与加工递呈,是提高抗肿瘤疫苗疗效的关键研究策略。脂质体(Liposome,LP)和非离子表面活性剂囊泡(Nonionic surfactant vesicle,NS)是最常用的纳米递送系统,具有生物相容性、生物可降解性、靶向性、延长血液循环时间、低毒性等优点。更重要的是,其可以模拟肿瘤细胞的尺寸、形态等特性,能最大程度的激活抗肿瘤免疫反应以消除肿瘤细胞。因此,本研究利用LP和NS包载MART-1多肽,研究这两种纳米疫苗诱导MART-1特异性CTL免疫应答的效果以及差异,为进一步研究和推广肿瘤纳米疫苗奠定基础。研究方法:(1)建立反相高效液相色谱法(RP-HLPC)测定MART-1的体外分析方法,并采用薄膜分散法制备MART-1脂质体纳米疫苗(MART-1-LP)和MART-1类脂囊泡纳米疫苗(MART-1-NS),以及利用正交试验优化纳米疫苗的制备处方和工艺。最后,对所制备得到的MART-1-LP和MART-1-NS进行包括外观、形态、粒径、Zeta电位、多分散系数(Polydispersity indices,PDI)、包封率以及载药量等药剂学性质方面的表征。(2)采用健康供者外周血作为标本,从中分离外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cell,PBMNC)。其中一部分用于冻存,用作T细胞来源使用;另一部分进行体外培养、诱导形成非成熟树突状细胞(Immature dendritic cell,imDC)后,将其平均分成7个实验组,每个组分别给予MART-1-LP、MART-1-NS、空白LP(LP-Blank)、空白NS(NS-Blank)、游离MART-1(MART-1-PBS)、PBS以及阳性给药处理,以刺激、诱导形成成熟DC(Mature dendritic cell,mDC)。此后,将诱导形成的各组mDCs,分别与等量的T细胞(之前冻存备用的PBMNCs)共同培养,以进行DCs细胞刺激特异性T细胞活化增殖。最后,收集各组T细胞,并分离出各组CD56CD8T细胞,研究并比较各组活化的特异性CD56CD8CTL细胞的数目、颗粒酶B(granzyme B)的量、DC细胞表面成熟相关标志物的表达。研究结果与结论:(1)本研究通过薄膜分散法制备了MART-1-LP,并通过正交试验优化了MART-1-LP的制备处方和工艺。结果显示,MART-1-LP的最优制备处方和工艺是磷脂终浓度为10μg/mL、磷脂与胆固醇质量比为6:1、多肽终浓度为1mg/mL以及水合时间为30min。(2)本研究通过RP-HLPC建立了MART-1的体外分析方法,并通过粒径分析仪和透射电镜对制备的MART-1-LP和MART-1-NS进行了表征。结果显示,MART-1-LP和MART-1-NS的平均包封率分别为49.4%、52.89%,平均载药量分别为4.06%、6.22%,平均粒径分别为192.4nm、207.50nm,平均Zeta电位分别为-9.41mv、-12.50mv,平均PDI分别为0.27、0.15。(3)本研究通过体外人源细胞实验检测了MART-1-LP、MART-1-NS和MART-1-PBS等诱导的CTL免疫应答。结果显示,MART-1-LP和MART-1-NS均能显著促进CD80在DC表面的表达,并能显著提高CD56CD8CTLs数目,且这些CD56CD8CTLs会产生大量的granzyme B。

关键词： MART-1aa26-35*A27L 多发性骨髓瘤纳米疫苗脂质体类脂囊泡

达沙替尼对DCs的影响及其与抗原肽共载的纳米疫苗的制备

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

达沙替尼对DCs的影响及其与抗原肽共载的纳米疫苗的制备

作者：曹婉君川北医学院

学位级别：硕士

目的:制备共载Melan-A(aa26-35*A27L)多肽类似物(P多肽)与达沙替尼的新型类脂囊泡疫苗,为抗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)治疗提供新的潜在治疗方案。方法:(1)流式细胞术检测达沙替尼对树突状细胞(DCs)成熟相关表面标志物表达的影... 详细信息

目的:制备共载Melan-A(aa26-35*A27L)多肽类似物(P多肽)与达沙替尼的新型类脂囊泡疫苗,为抗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)治疗提供新的潜在治疗方案。方法:(1)流式细胞术检测达沙替尼对树突状细胞(DCs)成熟相关表面标志物表达的影响,ELISA法分析达沙替尼对DCs分泌细胞因子的影响。(2)采用薄膜水合法联合探头超声制备共载P多肽与达沙替尼类脂囊泡疫苗并对其进行表征。结果:(1)25nmol/L浓度的达沙替尼增加了健康供者来源的DCs表面标志物CD40和HLA-DR的表达,增加了慢性粒细胞白血病患者来源的DCs表面的CD40、CD83和HLA-DR的表达。然而,达沙替尼对DCs分泌细胞因子和趋化因子的水平没有影响。(2)正交实验确定了类脂囊泡疫苗最佳处方与制备工艺。最终制备了共载囊泡疫苗,P多肽平均包封率为(74.14±0.16)%,达沙替尼平均包封率为(68.06±0.10)%,囊泡平均粒径为(133.05±1.33)nm,平均 PDI 为(22.79±0.93)%,平均Zeta电位为-22.66±0.67。囊泡于4℃保存10天,表现出良好的物理稳定性。结论:达沙替尼促进了 DCs成熟,其可作为DCs佐剂应用于以DCs为基础的治疗中,如DCs疫苗。成功制备了共载P多肽与达沙替尼新型类脂囊泡疫苗,包封率高、稳定性好,为进一步探讨其功效提供了基础。

关键词：多发性骨髓瘤 Melan-A(aa26-35*A27L)多肽类似物达沙替尼纳米疫苗佐剂类脂囊泡疫苗