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乙型肝炎病毒全S蛋白与纤维蛋白原α链的相互作用

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世界华人消化杂志 2008年第23期16卷 2581-2586页

作者：周飞任建林卢雅丕陈美娅许鸿志潘金水蔡稼燕董菁厦门大学附属中山医院消化内科厦门大学消化疾病研究所厦门市消化疾病中心福建省厦门市361004

目的:筛选人肝细胞cDNA文库中与乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白相互作用蛋白的基因,并反向验证HBV全S蛋白候选结合蛋白之间相互作用.方法:将全S基因定向克隆到酵母表达载体pDEST32,构建正向筛选的诱饵质粒并Westernblot法验证其在酵母中的表... 详细信息

目的:筛选人肝细胞cDNA文库中与乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白相互作用蛋白的基因,并反向验证HBV全S蛋白候选结合蛋白之间相互作用.方法:将全S基因定向克隆到酵母表达载体pDEST32,构建正向筛选的诱饵质粒并Westernblot法验证其在酵母中的表达.将诱饵质粒与人肝细胞cDNA文库质粒共同转化MaV203酵母细胞,在人肝细胞cDNA文库筛选候选结合蛋白,提取阳性菌落质粒测序,并分析其生物学性质.将筛选出的纤维蛋白原α链中下游序列及不同全S变异株基因,分别定向克隆到pDEST32及pDEST22载体中,利用Westernblot法验证表达.将诱饵质粒与猎物质粒共同转化MaV203酵母细胞,以反向酵母双杂交方法验证初筛结果的可靠性及正确性.结果:正向的酵母双杂交实验,经初筛和再转染实验纤维蛋白原α链可与HBV全S蛋白发生相互作用.再以纤维蛋白原α链为靶基因设计诱饵质粒,以四种变异的HBV全S蛋白为靶基因设计猎物质粒,反向酵母双杂交法证实维蛋白原α链中下游可与不同全S变异体(总差异率2%)发生相互作用,纤维蛋白原α链与全S蛋白的结合域可能为病毒蛋白的前268aa.结论:纤维蛋白原α链中下游可与HBV全S蛋白产生特异性结合,其结合域可能与病毒蛋白的前268aa产生相互作用.

关键词：乙型肝炎病毒全S基因纤维蛋白原α链酵母细胞双杂交技术

培土清心颗粒治疗特应性皮炎的蛋白质组学研究

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中药新药与临床药理 2024年第2期35卷 191-199页

作者：刘俊峰张凯莫秀梅王赛娅晏烽根叶思琪贾金靖张瑜陈达灿于晓波省部共建中医湿证国家重点实验室/广州中医药大学第二附属医院广东广州510120 河北大学生命科学学院河北保定071002 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东广州510120 蛋白质组学国家重点实验室/北京蛋白质组研究中心/国家蛋白质科学中心·北京(凤凰中心)/军事科学院军事医学研究院生命组学研究所北京102206

目的采用血清蛋白质组学方法探讨培土清心颗粒(白术、连翘、白茅根、太子参等)治疗特应性皮炎的作用靶点。方法选择特应性皮炎患者5例,以培土清心颗粒治疗12周,并以健康志愿者5例作为对照。对特应性皮炎患者治疗后的临床核心评价指标包... 详细信息

目的采用血清蛋白质组学方法探讨培土清心颗粒(白术、连翘、白茅根、太子参等)治疗特应性皮炎的作用靶点。方法选择特应性皮炎患者5例,以培土清心颗粒治疗12周,并以健康志愿者5例作为对照。对特应性皮炎患者治疗后的临床核心评价指标包括病情严重程度评分(EASI、SCORAD)、瘙痒程度评分、患者自评(POEM)、生活质量指数等进行评估。采用数据非依赖采集质谱(DIA-MS)技术检测血清样本,并根据P1.2筛选出特应性皮炎患者与健康人群的血清差异蛋白,以及培土清心颗粒治疗前后特应性皮炎患者的血清差异蛋白。对差异蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果(1)与治疗前比较,特应性皮炎患者治疗后的临床核心评价指标包括病情严重程度评分(EASI、SCORAD)、瘙痒程度评分、患者自评(POEM)、生活质量指数等均得到明显改善,差异均有统计学意义(P蛋白,其中12个蛋白表达水平上升,16个蛋白表达水平下降,包括ALAD(δ-氨基乙酰丙酸脱水酶)、LTA4H(白三烯A-4水解酶)、CA1(碳酸酐酶1)、F11(凝血因子XI)、LCP1(淋巴细胞胞浆蛋白1)等。主要涉及PI3K-AKT信号通路、脂质与动脉粥样硬化、ECM-受体相互作用、血小板活化、NF-κB信号通路、中性粒细胞外陷阱形成等信号通路。(3)特应性皮炎患者经培土清心颗粒治疗前后共分析出12个差异蛋白,其中8个蛋白表达水平上升,4个蛋白表达水平下降,包括ALAD、FGA(纤维蛋白原α链)、IGHV3-64D及IGHV3-38等。主要涉及脂质与动脉粥样硬化、补体途径、金黄色葡萄球菌感染、NF-κB信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化等信号通路。(4)ALAD、FGA、IGHV3-64D等3个蛋白靶点在特应性皮炎患者中的表达显著下调,而在培土清心颗粒治疗后显著上调。结论差异表达蛋白ALAD、FGA、IGHV3-64D可能是培土清心颗粒治疗特应性皮炎的作用靶点,为进一步实验验证奠定了基础。

关键词：特应性皮炎培土清心颗粒蛋白质组学数据非依赖采集质谱 δ-氨基乙酰丙酸脱水酶纤维蛋白原α链 IGHV3-64D

血清CD147,FGA,PSA检测在结直肠癌辅助诊断和疗效监测中的价值

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现代消化及介入诊疗 2024年第4期29卷 470-474页

作者：王德超杨田刘云华笪荣峰沈永祥张万里天门市第一人民医院消化内科 431700 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化肿瘤外科 430022

目的探究血清细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、纤维蛋白原α链(FGA)、前列腺特异性抗原(PSA)水平对结直肠癌(CRC)的辅助诊断和疗效监测中的价值。方法选取2021年2月至2023年6月本院收治的138例CRC患者作为CRC组,另选取同期结直肠... 详细信息

目的探究血清细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、纤维蛋白原α链(FGA)、前列腺特异性抗原(PSA)水平对结直肠癌(CRC)的辅助诊断和疗效监测中的价值。方法选取2021年2月至2023年6月本院收治的138例CRC患者作为CRC组,另选取同期结直肠良性疾病者146例作为良性组。ELISA检测血清CD147和FGA水平;化学发光法检测PSA。根据术后化疗疗效分为有效组(n=105)和无效组(n=33)。CRC术后化疗疗效的影响因素采用多因素Logistic回归分析;ROC对血清CD147、FGA、PSA对CRC的诊断价值及对CRC化疗疗效的预测价值进行分析。结果与良性组相比,CRC组血清CD147、FGA、PSA水平均显著较高(t=10.359、9.104、11.161,P<0.05)。无效组化疗前后血清CD147、FGA、PSA水平均明显较有效组高(P<0.05)。有效组和无效组患者在临床分期、分化程度和淋巴结转移方面存在显著差异(χ^(2)=6.195、4.108、7.468,P<0.05)。多因素Logistic分析显示,血清CD147(OR=1.428)、FGA(OR=1.241)、PSA水平(OR=1.634)、临床分期(OR=1.326)、淋巴结转移(OR=2.055)为CRC术后化疗疗效的影响因素(P<0.05)。ROC结果显示,血清CD147、FGA、PSA联合诊断CRC的敏感度为83.33%、特异度为81.51%、AUC为0.894;血清CD147、FGA、PSA联合预测CRC术后化疗无效的敏感度为87.88%、特异度为82.86%、AUC为0.894。结论结直肠癌患者血清CD147、FGA、PSA水平均明显较高,血清CD147、FGA、PSA联合对结直肠癌具有一定诊断价值,且对结直肠癌术后化疗疗效具有一定预测价值。

关键词：结直肠癌诊断疗效监测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子纤维蛋白原α链前列腺特异性抗原

血清中AFP、FGA、PG、PSA在预测早期胃癌患者淋巴结转移和手术疗效监测中的临床意义

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中国老年学杂志 2022年第5期42卷 1081-1084页

作者：罗东明陈德伦汪志华诸葛冬桂邹世镇柳州市工人医院普通外科广西柳州545005

目的探究血清中甲胎蛋白(AFP)、纤维蛋白原α链(FGA)、胃蛋白酶原(PG)和前列腺特异性抗原(PSA)在预测早期老年胃癌患者淋巴结转移和手术疗效监测中的临床意义。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测94例早期老年胃癌患者血清中AFP、FGA、PG... 详细信息

目的探究血清中甲胎蛋白(AFP)、纤维蛋白原α链(FGA)、胃蛋白酶原(PG)和前列腺特异性抗原(PSA)在预测早期老年胃癌患者淋巴结转移和手术疗效监测中的临床意义。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测94例早期老年胃癌患者血清中AFP、FGA、PG、PSA的表达水平,并与40例胃良性病变患者及36例健康对照人群进行比较。比较早期老年胃癌患者肿瘤不同分化程度血清中各指标变化。比较常规化疗1个疗程后患者血清中各指标水平。通过Logistic多元回归分析评估各指标在预测早期老年胃癌患者淋巴结转移中的价值。结果与胃良性病变患者及健康对照人群相比较,胃癌患者血清中AFP、FGA和PSA表达量显著上升(P<0.05),PGⅠ/PGⅡ比例显著降低(P<0.05)。患者肿瘤分化程度越高,患者血清中FGA、PSA和AFP表达及PGⅠ/PGⅡ比例越低(P<0.05)。常规化疗1个疗程后患者血清中FGA、PSA和AFP表达均显著降低(P<0.05),PGⅠ/PGⅡ比例显著增加(P<0.05)。发生淋巴结转移的患者相较于未发生淋巴结转移的患者血清中FGA、PSA和AFP含量显著增加(P<0.05),PGⅠ/PGⅡ比值明显下降(P<0.05)。Logistic多元回归分析结果显示,血清FGA、PSA和AFP水平及PGⅠ/PGⅡ比例是预测早期胃癌患者淋巴是否发生转移的独立预测因素,同时此方法预测患者是否发生淋巴结转移具有较高的准确性、灵敏度和特异性。结论血清AFP、FGA、和PSA的表达及PGⅠ/PGⅡ比值可作为早期老年胃癌患者化疗效果监测和预测淋巴结转移的指标。

关键词：早期胃癌纤维蛋白原α链甲胎蛋白胃蛋白酶原前列腺特异性抗原

血清sCD14-ST、PGLYRP2及FGA联合指标用于耐药结核病诊断的潜在价值

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标记免疫分析与临床 2022年第2期29卷 296-300,315页

作者：麦精兰冯雄云飞吴克长海口市疾病预防控制中心职业体检门诊海南海口570203 海口市人民医院结核病门诊海南海口570208 海口市疾病预防控制中心结核病预防控制科海南海口570203

目的探究血清可溶性CD14(sCD14)亚型(sCD14-ST,Presepsin)、肽聚糖识别蛋白2(PGLYRP2)、纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain,FGA)在耐药结核病诊断中的潜在价值。方法收集2019年1月至2020年12月我院诊断为肺结核(PTB)且初治患者(≥18岁)416例的临床信息,包括患者的性别、年龄、职业、吸烟史等临床基本信息和痰培养阳性患者的固体培养结果。采用χ^(2)检验进行单因素分析,应用Logistic回归分析及绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析曲线下面积。结果耐药组患者血清待检测标志物sCD14-ST[28.54(26.48,31.51)pg/mL vs 12.24(11.71,14.30)pg/mL]、PGLYRP2[554.70(390.29,764.95)pg/mL vs 158.45(106.37,219.72)pg/mL]、FGA[73.33(66.0,99.73)pg/mL vs 39.0(35.65,42.65)pg/mL]水平均高于敏感组(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,血清sCD14-ST、PGLYRP2、FGA都是影响PTB患者耐药性的独立危险因素(P<0.05)。经ROC曲线分析,血清sCD14-ST、PGLYRP2、FGA用于耐药PTB诊断的曲线下面积分别为0.975(0.960~0.990)、0.983(0.972~0.994)、0.959(0.936~0.983),cut-off值分别为17.85pg/mL、283.84pg/mL、47.80pg/mL,在该阈值下,灵敏度分别为98.2%、96.4%、96.4%,特异性分别为95.0%、90.3%、91.4%。结论血清标志物sCD14-ST、PGLYRP2、FGA在耐药PTB中有较高的诊断价值。

关键词：可溶性CD14亚型肽聚糖识别蛋白2 纤维蛋白原α链耐药结核病

顺铂诱导的急性肾损伤中肾脏组织m^(6)A甲基化水平的变化

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第12期41卷 1602-1611页

作者：沈剑箫王万鹏邵兴华吴晶魁李舒车霞静倪兆慧上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科上海200127 江苏省涟水县人民医院肾脏科涟水223400

目的·探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化修饰在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤进程中的作用。方法·选择4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射顺铂(20 mg/kg)诱导急性肾损伤(损伤组);另取4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射等量生理盐水(对... 详细信息

目的·探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化修饰在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤进程中的作用。方法·选择4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射顺铂(20 mg/kg)诱导急性肾损伤(损伤组);另取4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射等量生理盐水(对照组)。检测2组小鼠血清肌酐及血尿素氮水平变化,观察小鼠肾脏组织切片中病理损伤情况,评估模型是否成功。进一步运用甲基化RNA免疫共沉淀技术(methylatedRNAimmunoprecipitation,MeRIP)与RNA测序技术分别检测2组小鼠肾脏组织中m^(6)A甲基化水平与RNA表达变化。运用基因本体论及京都基因和基因组数据库进行结果可视化和综合研究,并将RNA测序技术所得转录组数据与MeRIP技术检测所得表观遗传数据联合分析,寻找参与顺铂诱导急性肾损伤病理变化过程的候选基因。结果·顺铂可诱导小鼠血清肌酐与血尿素氮水平显著升高。光学显微镜观察肾组织发现广泛的肾小管空泡变性,上皮细胞剥脱,肾小管坏死,提示造模成功。MeRIP检测发现损伤组与对照组小鼠肾脏中共有2227个基因含有2981个差异化表达的m^(6)A甲基化位点(表达变化倍数≥2且P纤维蛋白原α链、溶质载体12家族成员1和甲肝病毒细胞受体1等。结论·顺铂可诱导肾脏组织中基因mRNA上m^(6)A甲基化位点的甲基化水平变化,促进急性肾损伤进程。

关键词： N^(6)-甲基腺嘌呤甲基化顺铂诱导急性肾损伤纤维蛋白原α链溶质载体12家族成员1 甲肝病毒细胞受体1

肝郁血瘀型宫环出血病蛋白标志物的建立及出血机理研究

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肝郁血瘀型宫环出血病蛋白标志物的建立及出血机理研究

作者：窦宁湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的寻找并确定肝郁血瘀型宫环出血病的血清标志蛋白,并从血清蛋白表达水平探讨肝郁血瘀型宫环出血病发生发展的分子机理。方法本课题通过对置IUD妇女的追踪随访,收集置IUD前后不同阶段的各类血清样本共310份,其中确定有效血清样本85份... 详细信息

目的寻找并确定肝郁血瘀型宫环出血病的血清标志蛋白,并从血清蛋白表达水平探讨肝郁血瘀型宫环出血病发生发展的分子机理。方法本课题通过对置IUD妇女的追踪随访,收集置IUD前后不同阶段的各类血清样本共310份,其中确定有效血清样本85份,并对这些血清样本采用蛋白质芯片-飞行质谱技术(SELDI-TOF-MS)进行检测和结果分析。比较各血清蛋白质图谱,寻找并建立肝郁血瘀型宫环出血病的标志蛋白,并检索蛋白质组学实验数据库(EPO—KB),结合生物信息学分析,了解其生物学意义。研究在宫环出血病发生发展过程中血清蛋白质表达水平上的变化,探讨肝郁血瘀型宫环出血病可能的发生发展分子机理。结果1、通过比较肝郁血瘀型宫环出血病妇女和正常妇女置IUD前后血清蛋白质表达的差异,筛选出4个差异峰(质荷比分别13797.1、6443.20、5934.95、3989.69),建立了包括6个终结点的决策树模型,可以对肝郁血瘀型宫环出血病做出较为准确的预测判断,预测的正确率为91.8%,灵敏度为94.3%,特异性为90.0%。2、质荷比分别为3440.12、3949.87、5934.95的三种血清蛋白在置环前后,肝郁血瘀型宫环出血妇女与正常妇女的表达均有差异,可能与肝郁血瘀型宫环出血妇女易于发病的体质相关,有可能解释肝郁血瘀型宫环出血妇女发病的原因,有进一步研究的价值。3、质荷比分别为7794.88、12870.7、13982.3的三种血清蛋白在置环后,含量均增加,但肝郁血瘀型宫环出血妇女较正常妇女增加的更高,可能与肝郁血瘀型宫环出血的发病直接相关。结论通过查询蛋白质组学实验数据库(EPO—KB),质荷比分别为3440.12的血清蛋白为中性粒细胞防御素3 (neutrophil defensin 3 ND3),质荷比为5934.95的血清蛋白为纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain Fg a),质荷比为7794.88的血清蛋白为血小板因子4(platelet factor 4 PF4).这三种血清蛋白可能与肝郁血瘀型宫环出血病的发病机理有关,为下一步研究指明了方向。其它血清蛋白未能匹配,可能与数据库不完善或有实验误差有关。

关键词：肝郁血瘀宫环出血病蛋白质芯片-飞行质谱技术血清蛋白蛋白质组学实验数据库中性粒细胞防御素3 纤维蛋白原α链血小板因子4

褪黑素通过抑制FGA调节FAK/AKT/MMP-2通路对人子宫内膜间质细胞的作用研究

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徐州医科大学学报 2021年第12期41卷 865-872页

作者：江小霞方燕玲李仲均东莞市人民医院妇产科广东东莞523018

目的探究褪黑素对子宫内膜异位症在位子宫内膜间质细胞(ESC)的作用及其可能的作用机制。方法收集13例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜组织进行ESC细胞原代分离培养。分别加入0.25、0.5、1mmol/L褪黑素处理细胞后,CCK-8检测细胞活力,Tr... 详细信息

目的探究褪黑素对子宫内膜异位症在位子宫内膜间质细胞(ESC)的作用及其可能的作用机制。方法收集13例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜组织进行ESC细胞原代分离培养。分别加入0.25、0.5、1mmol/L褪黑素处理细胞后,CCK-8检测细胞活力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR检测细胞中纤维蛋白原α链(FGA)mRNA表达,Western blot检测细胞角蛋白(Keratin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)、FGA、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、黏着斑激酶(FAK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果成功分离培养ESC细胞。与空白对照组相比,0.25mmol/L、0.5mmol/L和1mmol/L褪黑素处理ESC细胞后细胞活力、细胞迁移数和侵袭数明显降低(P蛋白表达明显升高(P蛋白表达明显降低(P蛋白表达明显降低(P蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论褪黑素可能通过抑制FGA介导的FAK/AKT/MMP-2通路激活从而抑制ESC细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化,从而抑制子宫内膜异位症疾病进展。

关键词：褪黑素子宫内膜异位症子宫内膜间质细胞纤维蛋白原α链