检索结果-南通市图书馆

作者：吴艳玲广东工业大学

学位级别：硕士

黄粉虫富含蛋白质等多种营养成分,是一种宝贵的食用昆虫资源,己在人类食品上、保健品、医药和饲料等方面得到广泛应用。黄粉虫生存能力和适应能力强、生长发育快、养殖成本低等优点,己成为当今世界上仅次于养蚕、养蜂业发展最快的养虫... 详细信息

黄粉虫富含蛋白质等多种营养成分,是一种宝贵的食用昆虫资源,己在人类食品上、保健品、医药和饲料等方面得到广泛应用。黄粉虫生存能力和适应能力强、生长发育快、养殖成本低等优点,己成为当今世界上仅次于养蚕、养蜂业发展最快的养虫业之一。已经证明从黄粉虫体内提取出一种活性蛋白,具有很好的溶血栓作用,而癌症和心血管疾病是目前世界上两大生命杀手,希望通过进一步研究该活性蛋白,提供更加完善的基础实验数据,为以后找出一种高效、安全、低价的治疗药物打下基础。本文经匀浆浸提、盐析、阴离子交换和葡聚糖凝胶过滤等方法,从黄粉虫幼虫体内提取分离纯化出一种纤溶活性蛋白(Tenebrio Fibrinolyric Proteins, TFP)纤维平板法显示其有很好的纤溶效果,非变性电泳证明其纯度,为单一组分,变性电泳测出其相对分子量约为56.1kD,蛋白质浓度为6.061mg·mL-1。为进一步了解该酶的酶学性质,本文通过TFP作用于3种底物(BAEE、BAPNA和酪蛋白),测定不同米氏常数Km值,其中以BAEE为底物时Km值为0.182mmol/L,显著小于BAPNA为底物的Km值(1.138 mmol/L),而以酪蛋白为底物时测不出Km值。TFP作用于BAEE时使BAEE上的酯键断裂,表现出酯酶活力;作用于BAPNA时使BAPNA上的酰胺键断裂,表现为非肽类酰胺键的酰胺酶活力;而作用于酪蛋白和纤维蛋白时裂解肽键,表现为肽键酶活力,所以得出：TFP的酯酶活力>酰胺酶活力>肽键酶活力。模拟小肠环境,偏碱性,TFP未被胰蛋白酶降解,可以做肠溶性制剂。为了探讨TFP的酶学种类,丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF作用于TFP,纤维平板法测抑制酶活性,研究结果表明PMSF浓度为5mmol/L可完全抑制TFP纤溶活性,表明PMSF能有效抑制TFP纤溶活性,其对TFP的抑制作用与其浓度呈正相关。同时根据红外光谱检测结果,表明胰蛋白酶与TFP的结构很接近,而胰蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶,蛋白酶活性部位在种系进化上具有严格保守性,因而初步推断TFP也属于丝氨酸蛋白酶。本文还尝试性的对TFP的抗癌作用作了初步研究,通过体外培养动物癌细胞,MTT法检测,结果显示,黄粉虫纤溶活性蛋白对肿瘤细胞A549细胞有较显著的抑制作用,对H22细胞抑制作用不明显,对于癌细胞有选择性。另外,比较TFP和抗癌药物顺铂对肿瘤细胞A549的作用效果,得出：TFP抗癌效果很迅速,短时间就能达到较好的抑制肿瘤生长的效果,这是其它抗癌药物不可比拟的优势。可能两者作用机理不一样,还有待继续深入研究。

关键词：黄粉虫纤溶活性蛋白酶学性质米氏常数Km 丝氨酸蛋白酶抑癌作用

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蚁狮纤溶活性蛋白的发现及理化研究

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江西饲料 2019年第5期 6-10页

作者：徐阿慧方霓梦陈德鸿曹恩刘建涛江西科技师范大学生命科学学院

本实验采用硫酸铵分段盐析法分离和提取得到了具有纤溶活性的蚁狮粗蛋白,使用纤维平板法检测目标蛋白纤溶活性,结果显示三个不同浓度梯度的粗蛋白均具有明显的纤溶活性;测得其最适温度为37℃,最适pH值约为6.0;金属离子Ba^2+、Cu^2+、Mg... 详细信息

本实验采用硫酸铵分段盐析法分离和提取得到了具有纤溶活性的蚁狮粗蛋白,使用纤维平板法检测目标蛋白纤溶活性,结果显示三个不同浓度梯度的粗蛋白均具有明显的纤溶活性;测得其最适温度为37℃,最适pH值约为6.0;金属离子Ba^2+、Cu^2+、Mg^2+、Mn^2+对蚁狮纤溶活性蛋白具有较强的抑制作用,Na^+对其抑制作用较小;抑制剂EGTA对粗蛋白抑制率较高,βME对其影响较小;使用BCA试剂盒测定蚁狮纤溶活性粗蛋白浓度为4mg/mL左右。

关键词：蚁狮纤溶活性蛋白纤溶活性

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黄粉虫纤溶活性蛋白免疫原性与抗血栓作用的研究

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广东工业大学学报 2015年第2期32卷 144-148页

作者：张冰谭竹钧广东工业大学轻工化工学院广东广州510006

为了研究黄粉虫纤溶活性蛋白(Tenebrio Fibrinolytic Proteins,TFP)的免疫原性及其抗血栓作用,本研究将纯化的TFP经皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中的抗体含量及抗体效价;小鼠灌胃TFP后,取血浆检测凝血酶时间(thrombin time... 详细信息

为了研究黄粉虫纤溶活性蛋白(Tenebrio Fibrinolytic Proteins,TFP)的免疫原性及其抗血栓作用,本研究将纯化的TFP经皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中的抗体含量及抗体效价;小鼠灌胃TFP后,取血浆检测凝血酶时间(thrombin time,TT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)和其抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI),角叉菜胶使小鼠尾部形成血栓,测量血栓形成长度.结果显示,TFP免疫小鼠后产生特异性抗体且随着免疫次数的增加,抗体含量逐渐升高,末次免疫后产生的抗体效价为1∶640;TFP可以显著延长TT,增强t-PA的活性,抑制PAI的活性,同时显著抑制由角叉菜胶引起的小鼠尾部血栓的形成.这说明TFP具有良好的免疫原性且具有一定的抗血栓作用.

关键词：黄粉虫纤溶活性蛋白免疫原性抗血栓

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广地龙化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物(Q-Marker)的预测分析

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中草药 2022年第8期53卷 2560-2571页

作者：李思维郝二伟杜正彩韦玮王星圆陈静梅侯小涛邓家刚广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中药药效研究重点实验室广西南宁530200 广西农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西南宁530200 广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西南宁530200

广地龙Pheretima aspergillum为我国常用传统中药材,主要分布于广西、广东,为岭南地区道地药材。广地龙中化学成分包括蛋白质及多肽类、酶类、氨基酸及二肽类、核苷类、脂肪酸类、甾体化合物、溶血磷脂、无机元素等。传统认为广地龙蚓... 详细信息

广地龙Pheretima aspergillum为我国常用传统中药材,主要分布于广西、广东,为岭南地区道地药材。广地龙中化学成分包括蛋白质及多肽类、酶类、氨基酸及二肽类、核苷类、脂肪酸类、甾体化合物、溶血磷脂、无机元素等。传统认为广地龙蚓激酶、次黄嘌呤和琥珀酸为其主要药效成分。对广地龙化学成分、药理作用的研究进展进行总结,并在此基础上,分析酶类、核苷类、脂肪酸类等成分与药效的关联,基于传统功效与现代药理作用预测其质量标志物(quality marker,Q-Marker),初步确定纤溶活性蛋白、蚓激酶、蚯蚓纤溶酶、次黄嘌呤、肌苷、琥珀酸、多不饱和脂肪酸、氨基酸及二肽类成分为其可能的Q-Marker。建议聚焦其有效成分,结合成分化学物质组入血后的协同作用以及化学成分可测性,建立专属性的测定方法,为明确广地龙Q-Marker和制定科学的质量评价体系提供基础。

关键词：广地龙药效物质基础质量标准质量标志物纤溶活性蛋白蚓激酶蚯蚓纤溶酶次黄嘌呤肌苷琥珀酸多不饱和脂肪酸氨基酸及二肽类

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《江西饲料》2019年主要目次

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江西饲料 2019年第6期 53-54页

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