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红景天甙对低氧诱导肾小管上皮细胞转分化的作用研究

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四川大学学报（医学版） 2010年第1期41卷 43-48页

作者：张蕾谢席胜李飞燕张和平刘畅樊均明四川大学华西医院肾内科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041

目的观察红景天甙(salidroside,Sal)对氯化钴(cobaltous chloride,CoCl2.6 H2O,Co)诱导的低氧状态下正常大鼠近端肾小管上皮细胞(normal rat kidney tubular epithelia cell,NRK52E)转分化的影响并分析其可能的机制。方法体外培养NRK52E细胞,分为正常对照组,氯化钴低氧组,10、50、100μmol/L不同浓度红景天甙组。观察低氧标志蛋白低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible foctor-1α,HIF-1α)的表达。倒置相差显微镜观察细胞形态变化;荧光免疫及细胞免疫法检测NRK52E细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达情况;RT-PCR检测NRK52E细胞α-SMA、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA的表达;Western blot蛋白印迹检测HIF-1α和α-SMA蛋白的表达;酶联免疫吸附法检测细胞上清液胶原Ⅰ(collagenⅠ,Col-Ⅰ)和纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)的含量。结果100μmol/L Co诱导NRK52E细胞表达HIF-1α。Co组细胞明显肥大、拉长,呈肌成纤维细胞外观。不同浓度Sal组细胞形态介于正常与Co组之间。Co组α-SMA基因、蛋白和TGF-β1mRNA表达量较对照组升高(P<0.05),不同浓度Sal组α-SMA基因、蛋白和TGF-β1mRNA表达量较Co组减少(P<0.05)。Co组细胞上清液Col-Ⅰ和FN的含量较对照组增加(P<0.05),不同浓度Sal组Col-Ⅰ和FN的含量明显下降(P<0.05),以高剂量组最为明显。结论Sal可在一定程度上改善Co诱导的低氧状态和细胞转分化,减少细胞外基质的增加。其机制可能是通过抑制TGF-β1和HIF-1α的表达实现的。

关键词：低氧红景天甙肾小管上皮细胞转分化低氧诱导因子-1α转化生长因子-β1

离子液体中β-葡萄糖苷酶生物催化合成红景天甙

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催化学报 2011年第6期32卷 1051-1055页

作者：王梦亮郭春侠山西大学应用化学研究所山西太原030006

比较了聚乙二醇修饰的β-葡萄糖苷酶在三种离子液体([bmim]PF6,[bmim]BF4,[bmim]Tf2N)及两种常用有机溶剂(1,4-二氧六环、正己烷)中的催化性能,确定了适宜的反应介质;考察了底物浓度、温度、体系含水量和反应时间等因素对β-葡萄糖苷酶... 详细信息

比较了聚乙二醇修饰的β-葡萄糖苷酶在三种离子液体([bmim]PF6,[bmim]BF4,[bmim]Tf2N)及两种常用有机溶剂(1,4-二氧六环、正己烷)中的催化性能,确定了适宜的反应介质;考察了底物浓度、温度、体系含水量和反应时间等因素对β-葡萄糖苷酶催化合成红景天甙反应的影响.结果表明,在最佳反应介质[bmim]PF6存在下,底物酪醇浓度为70mmol/L,体系含水量2%,于50oC,反应24h时,高达88.5%的酪醇转化为红景天甙(即61.93mmo1/L).与有机溶剂相比,以[bmim]PF6为反应介质对酶促合成红景天甙的反应过程具有明显的强化作用.

关键词：离子液体 β-葡萄糖苷酶红景天甙生物催化酪醇

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红景天甙对体外培养的腺样囊性癌细胞的作用

华西口腔医学杂志 2008年第3期26卷 312-315,319页

作者：李美华张桂珍王医术吉林大学第三临床学院口腔科吉林长春130031 吉林大学第三临床学院中心研究室吉林长春130031 吉林大学病理生物学教育部重点实验室吉林长春130021

目的体外研究红景天甙对唾液腺腺样囊性癌细胞SACC-2生长的影响作用及其机制。方法采用CCK-8法测定红景天甙对体外培养的SACC-2细胞增殖的作用,并绘制细胞生长曲线;采用免疫组化方法检测红景天甙作用后SACC-2细胞中半胱氨酸蛋白酶(Caspa... 详细信息

目的体外研究红景天甙对唾液腺腺样囊性癌细胞SACC-2生长的影响作用及其机制。方法采用CCK-8法测定红景天甙对体外培养的SACC-2细胞增殖的作用,并绘制细胞生长曲线;采用免疫组化方法检测红景天甙作用后SACC-2细胞中半胱氨酸蛋白酶(Caspase 3和Caspase 8)及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果根据CCK-8测定法,红景天甙对SACC-2细胞增殖有抑制作用,IC50值为(4.99±0.23)μg/mL。生长曲线显示红景天甙组活细胞数随着培养天数增加而降低;红景天甙组SACC-2细胞的Caspase 3及Caspase 8蛋白表达均呈强阳性表达,对照组均为弱阳性表达,二组间差异显著(P红景天甙组SACC-2细胞的PCNA阳性细胞数较对照组少,二组间差异显著(P红景天甙可能抑制了SACC-2细胞增殖及诱发其凋亡,有望成为临床抗癌药物之一。

关键词：红景天甙唾液腺腺样囊性癌半胱氨酸蛋白酶类增殖细胞核抗原

利用高山红景天培养细胞生物转化外源酪醇生产红景天甙的研究

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Acta Botanica Sinica 1998年第12期40卷 1129-1135页

作者：许建峰苏志国冯朴荪中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室大连理工大学生化工程研究所

高山红景天（ＲｈｏｄｉｏｌａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ．Ｂｏｒ．）培养细胞中，甙元酪醇在细胞生长静止期大量积累，而此时糖基化反应的效率很低，因而红景天甙（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ）产量较低。考虑到培养细胞中酪醇葡萄糖... 详细信息

高山红景天（ＲｈｏｄｉｏｌａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ．Ｂｏｒ．）培养细胞中，甙元酪醇在细胞生长静止期大量积累，而此时糖基化反应的效率很低，因而红景天甙（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ）产量较低。考虑到培养细胞中酪醇葡萄糖基转移酶的活性在指数生长期达到最高，考察了在指数生长期添加外源酪醇生物转化生产红景天甙的可能性，并探讨了酪醇添加浓度、添加方法及细胞密度对酪醇转化率及红景天甙产量的影响。结果表明，细胞在酪醇浓度为１ｍｍｏｌ／Ｌ的培养基中培养２４ｈ后可使酪醇转化率达到９５％；过高的酪醇浓度（＞３ｍｍｏｌ／Ｌ）对细胞生长及酪醇转化率都有明显抑制作用；通过较低浓度酪醇的３次重复添加，可使细胞密度为６ｇＤＷ／Ｌ、１２ｇＤＷ／Ｌ及１８ｇＤＷ／Ｌ的培养物中的红景天甙产量分别达到１３２０ｍｇ／Ｌ、１７４０ｍｇ／Ｌ和１９８０ｍｇ／Ｌ。

关键词：高山红景天红景天甙酪醇生物转化

红景天甙体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2011年第7期39卷 21-27页

作者：龙玲吴达霍生东西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030 甘肃出入境检验检疫局甘肃兰州730020

【目的】探讨红景天甙(Salidroside)体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】以体外培养的人肝癌QGY-7703细胞作为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测红景天甙对QGY-7703细胞生长的抑制作用,采用吖啶橙... 详细信息

【目的】探讨红景天甙(Salidroside)体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】以体外培养的人肝癌QGY-7703细胞作为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测红景天甙对QGY-7703细胞生长的抑制作用,采用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术,分析红景天甙对QGY-7703细胞凋亡的诱导作用;采用Western blot免疫印迹法探讨红景天甙诱导QGY-7703细胞凋亡的可能机制。【结果】MTT比色法试验结果表明,0.01,0.1,1,10和100μg/mL红景天甙对QGY-7703细胞生长均有不同程度的抑制作用,细胞生长抑制率分别为13.2%,21.9%,31.4%,46.8%和60.9%,半数抑制质量浓度(IC50)为18.56μg/mL;用10μg/mL红景天甙处理QGY-7703细胞48 h,AO/EB荧光双染后,可观察到个别QGY-7703细胞呈现亮绿色或橘红色,表明细胞发生了凋亡;琼脂糖凝胶电泳结果显示,10μg/mL红景天甙作用QGY-7703细胞24,48和72 h均可导致细胞核内DNA产生有序断裂,形成DNA梯形带;流式细胞术试验结果表明,10μg/mL红景天甙的加入量为100和200μL时,QGY-7703细胞凋亡数分别为178和331个,相应的凋亡率分别为1.8%和3.5%,阴性对照组(10μg/mL红景天甙加入量为0μL)凋亡细胞数为105个,凋亡率仅为1.1%;Western blot免疫印迹分析结果表明,红景天甙下调了Bcl-2和PCNA蛋白的表达量,而使凋亡活化基因Bax与肿瘤抑制基因p53的蛋白表达量增高。【结论】红景天甙对体外培养的QGY-7703细胞具有明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用,其诱导凋亡作用与Bcl-2家族成员、p53、Bax和PCNA基因调控有关。

关键词：红景天甙体外诱导 QGY-7703细胞细胞凋亡

红景天甙对肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响

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世界华人消化杂志 2005年第3期13卷 341-345页

作者：曾维政吴晓玲蒋明德王丕龙褚桂珍成都军区总医院消化内科四川省成都市610083 重庆医科大学附一院消化内科重庆市400016 四川大学华西医学中心细胞生物学教研室四川省成都市610054

目的:研究红景天甙对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响. 方法:SD大鼠90只分为3组:正常对照组(C组)、模型组(M组)和红景天甙干预组(T组).以CCl4SC诱导肝纤维化,T组在造模同时给予红景天甙溶液***和Masson染色观察肝... 详细信息

目的:研究红景天甙对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响. 方法:SD大鼠90只分为3组:正常对照组(C组)、模型组(M组)和红景天甙干预组(T组).以CCl4SC诱导肝纤维化,T组在造模同时给予红景天甙溶液***和Masson染色观察肝脏胶原沉积情况,原位杂交和免疫组化检测肝组织Smad 3,Smad 7和CBP基因表达. 结果:T组肝脏组织学积分减少(2.1±0.3 vs 3.6±0.8, P=0.041),胶原平均面积显著减少(1 38±66 vs 691±189 μm2,P=0.046);肝脏Smad 7蛋白表达阳性率增加[(4.27±0.43)%vs(2.86±0.86)%,P=0.035, P红景天甙能有效抑制Smad 3和CBP基因表达, 促进Smad 7表达,从而干扰肝纤维化的形成.

关键词：红景天甙肝纤维化肝组织 CBP Smad 基因表达

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红景天甙对拟高原缺氧大鼠肝损伤的保护作用

中国组织工程研究与临床康复 2010年第31期14卷 5813-5817页

作者：荣黎戴立里曾维政蒋明德吴晓玲张华重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆市400016 解放军成都军区总医院消化内科四川省成都市610083

背景:大量流行病学调查表明,高原低氧环境可能导致肝脏损伤,但对其发病机制的研究还相对较少。红景天甙为藏药红景天的主要活性成分,具有清除氧自由基,保护细胞膜等功能。目的:以肝动脉结扎模拟高原肝脏缺氧,了解高原缺氧对大鼠肝损伤... 详细信息

背景:大量流行病学调查表明,高原低氧环境可能导致肝脏损伤,但对其发病机制的研究还相对较少。红景天甙为藏药红景天的主要活性成分,具有清除氧自由基,保护细胞膜等功能。目的:以肝动脉结扎模拟高原肝脏缺氧,了解高原缺氧对大鼠肝损伤的影响,并验证药物红景天甙对拟高原缺氧大鼠肝损伤的保护作用。方法:将Wistar大鼠按随机数字表法分为3组,结扎组制备肝动脉结扎模型;红景天甙+结扎组分别于结扎前2d,1d、结扎前2h腹腔注射红景天甙灭菌水溶液,两组分别分为结扎1,2,4,6,8h五个时间段;设正常对照组。以全自动生化分析仪检测血清肝功能变化,硫代巴比妥酸法检测丙二醛含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学变化,免疫组化检测肝组织缺氧诱导因子1α蛋白水平变化,TUNEL法观察肝组织凋亡情况。结果与结论:通过大鼠肝动脉结扎模拟高原肝脏缺氧可引起肝脏急性损伤。红景天甙干预处理可使大鼠血清肝功指标得到改善(P红景天甙可通过抗氧化应激损伤,抑制细胞凋亡起到对拟高原缺氧大鼠急性肝损伤的保护作用。

关键词：高原缺氧肝损伤红景天甙肝动脉结扎氧化应激凋亡

微生物催化D-葡萄糖与酪醇葡糖基转移合成红景天甙的初步研究

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催化学报 2006年第3期27卷 233-236页

作者：王梦亮张芳刘滇生山西大学现代化学研究所山西太原030006

为了探讨微生物催化合成红景天甙的可能性,从红景天根系土壤中筛选出了五个菌株,比较了它们合成红景天甙的能力,确定F1菌株为合成红景天甙的出发菌株,经鉴定该菌株为米曲霉(Aspergillus oryzae).以D-葡萄糖和酪醇为底物,研究了底物浓度... 详细信息

为了探讨微生物催化合成红景天甙的可能性,从红景天根系土壤中筛选出了五个菌株,比较了它们合成红景天甙的能力,确定F1菌株为合成红景天甙的出发菌株,经鉴定该菌株为米曲霉(Aspergillus oryzae).以D-葡萄糖和酪醇为底物,研究了底物浓度、反应时间、细胞浓度和pH对红景天甙产量的影响.结果表明,最适底物浓度为酪醇5 g/L,D-葡萄糖与酪醇的摩尔比为1∶1,酪醇浓度高于5 g/L不利于菌体生长.最佳反应时间为48 h,最适细胞浓度为150 g/L,最适pH为7.红景天甙最高产量为0.7 g/L.

关键词：红景天甙微生物米曲霉生物催化酪醇葡萄糖葡糖基转移

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红景天甙减轻大鼠酒精性肝损伤

中国病理生理杂志 2018年第7期34卷 1311-1316页

作者：张华周光群遵义医学院附属医院消化内科贵州遵义563000 遵义医学院附属医院内镜科贵州遵义563000

目的:探讨红景天甙对大鼠酒精性肝损伤的作用及其可能机制。方法:将100只SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、联苯双酯滴丸组及红景天甙低剂量(20 mg/kg)和高剂量(40 mg/kg)组,除空白组给予生理盐水外,其余各组均给予56%乙醇灌胃,建立... 详细信息

目的:探讨红景天甙对大鼠酒精性肝损伤的作用及其可能机制。方法:将100只SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、联苯双酯滴丸组及红景天甙低剂量(20 mg/kg)和高剂量(40 mg/kg)组,除空白组给予生理盐水外,其余各组均给予56%乙醇灌胃,建立酒精性肝损伤大鼠动物模型,给药组同时予以相应药物灌胃,于末次给药后12 h采血,处死动物后取出肝脏,采用全自动生化仪测定血清甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学改变,试剂盒测定肝组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA法测定各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核因子κB(NF-κB)水平,Western blot法和RT-PCR测定肝组织TNF-α和NF-κB的蛋白和mRNA表达。结果:与模型组比较,红景天甙高、低剂量组肝组织损伤程度明显减轻;红景天甙对酒精性肝损伤大鼠血清TG、ALT及AST水平均具有明显抑制作用(P红景天甙各剂量组大鼠血清TNF-α和NF-κB含量降低(P红景天甙能够改善大鼠酒精性肝损伤病理变化,减轻肝组织炎症反应,增加抗氧化酶的活性,降低脂质过氧化,该作用可能与调节NF-κB介导的炎症反应有关。

关键词：红景天甙酒精性肝病 NF-κB信号通路肿瘤坏死因子α