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紫苏醛经PI3K/Akt通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

紫苏醛经PI3K/Akt通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

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作者：张小赏湖北医药学院

学位级别：硕士

背景:急性心肌梗死后通过介入治疗实现血运重建,但再灌注后的心律失常、心力衰竭等并发症,若不及时有效的干预,会严重影响患者的心功能,甚至威胁生命安全。我们旨在确定紫苏醛对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响,并分析其作用机制。目的:... 详细信息

背景:急性心肌梗死后通过介入治疗实现血运重建,但再灌注后的心律失常、心力衰竭等并发症,若不及时有效的干预,会严重影响患者的心功能,甚至威胁生命安全。我们旨在确定紫苏醛对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响,并分析其作用机制。目的:通过建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,研究紫苏醛对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其作用机制,为临床干预心肌缺血/再灌注损伤提供重要的理论依据,寻找药物治疗靶点。方法:采用左前降支结扎方法制作大鼠心肌缺血/再灌注模型。将大鼠随机分为假手术组（SO组）、缺血再灌注组（I/R组）、紫苏醛18.0、36.0、72.0 mg/kg预处理组及PI3K/Akt通路抑制剂（LY294002）组,药物连续灌胃（Ig）7天后建立动物模型:SO组手术时只穿线不结扎,SO组、I/R组术前使用0.5%羧基纤维素灌胃1周（W）,PAH组术前分别使用18.0、36.0、72.0 mg/kg PAH灌胃1W,检测大鼠血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）水平,评估心肌损伤评分,筛选出紫苏醛对大鼠心肌缺血/再灌注损伤影响的最适剂量,使用最适剂量,建立PI3K/Akt通路抑制剂（LY294002）组（0.3mg/kg LY294002+PAH最适剂量+I/R组）,术前PAH灌胃1W,结扎前30min鼠尾静脉注射抑制剂,检测血清cTnI、CK、LDH水平,ELISA法检测血肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-?、白介素6（IL-6）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH-Px）水平,Western blot测定细胞凋亡与自噬相关蛋白（Bcl-2、Bax、LC3B、Beclin-1）及PI3K/Akt信号通路蛋白等的表达水平,计算细胞凋亡指数等并比较。结果:不同剂量组结果比较:PAH36+I/R组、PAH72+I/R组cTnI水平均低于I/R组,PAH18+I/R组、PAH36+I/R组、PAH72+I/R各组CK、LDH水平均低于I/R组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与PAH18+I/R组相比,PAH36+I/R组及PAH72+I/R组cTnI、CK水平均降低,PAH72+I/R组大鼠血清LDH水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与PAH36+I/R组相比,PAH72+I/R组大鼠血清CK、LDH水平均降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）PAH36+I/R损伤组、PAH72+I/R损伤组大鼠心肌损伤评分低于I/R损伤组、PAH18+I/R损伤组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结合以上结果,筛选出紫苏醛的最适剂量为36.0 mg/kg。使用最适剂量后检测结果比较:与I/R组相比,PAH36+I/R组、LYPAH36+I/R组cTnI、CK、LDH、TNF-α、IFN-?、IL-6水平均降低,SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低,LC3B、Beclin1水平降低,Bcl2升高,Bax的水平降低,细胞凋亡指数降低,PAKT水平升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与PAH36+I/R组相比LYPAH36+I/R组cTnI、CK、LDH、TNF-α、IL-6水平均升高,SOD、GSH-Px水平降低,MDA水平升高,LC3B、Beclin1水平升高,Bcl2水平降低,Bax水平升高,Bcl2/Bax比值降低,细胞凋亡指数增加,PAKT水平降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:紫苏醛可以减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤,且PAH的心肌保护作用可能与其通过PI3K/Akt途径调节炎症反应、降低细胞自噬有关,该信号通路的激活最终抑制了心肌缺血/再灌注诱导的细胞凋亡。

关键词：紫苏醛,心肌缺血再灌注损伤,PI3K Akt

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