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紫花前胡苷在大鼠体内的药代动力学研究

中国药理学通报 2008年第9期24卷 1240-1244页

作者：张鹏杨秀伟北京大学药学院天然药物学系天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100083

目的研究中药狭叶羌活和宽叶羌活主要化学成分之一的紫花前胡苷(ND)在大鼠体内的药代动力学。方法♂SD大鼠(200～220)g随机分组,每组5只,单次尾静脉注射,给药量为***-1,从眼眶静脉丛分时取血、处理。采用反相高效液相色谱法、恒速洗脱,... 详细信息

目的研究中药狭叶羌活和宽叶羌活主要化学成分之一的紫花前胡苷(ND)在大鼠体内的药代动力学。方法♂SD大鼠(200～220)g随机分组,每组5只,单次尾静脉注射,给药量为***-1,从眼眶静脉丛分时取血、处理。采用反相高效液相色谱法、恒速洗脱,应用外标法测定ND在SD系大鼠血浆中的浓度,应用3P87软件计算主要药代动力学参数。结果在所建立的方法学下,ND的保留时间为6.7min;标准曲线为Y=2.0×10-4X+0.4(r=0.9999),在0.2～80mg.L-1的血浆浓度范围内呈良好的线性关系;血浆中最低检测浓度为0.01mg.L-1(S/N=3),最低定量浓度为0.1mg.L-1(S/N=10);在1.0、10.0和40.0mg.L-1低、中、高3个浓度下的提取回收率为76.23～83.72;日内和日间RSD均小于5.60%(n=3)。在室温和冷冻—解冻试验中,ND具有良好的稳定性。按***-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内的药代动力学过程符合开放二房室模型,主要药代动力学参数t1/2α、t1/2β、AUC、Vc、Vp、Vss和CL分别为7.02min、219.27min、***.L-1、***-1、***-1、***-1和***-1。结论所建立的方法快速、准确、简便,能够满足ND药代动力学研究要求。按***-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内分布广泛,消除速度中等。

关键词：紫花前胡苷药代动力学反相高效液相色谱法

紫花前胡苷通过调控CXCL5-ERK/MEK信号轴发挥抗肝癌作用

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天然产物研究与开发 2022年第6期34卷 1014-1020页

作者：王鹏利王国泰闫曙光李京涛罗璐白垚周小燕陕西中医药大学附属医院咸阳712000

本文探讨紫花前胡苷(nodakenin,NK)对肝癌细胞的作用及机制。不同浓度紫花前胡苷处理HepG2和MHCC-97H细胞,CCK-8检测细胞增殖变化,细胞划痕和Trans-wells实验观察细胞迁移和侵袭能力变化。紫花前胡苷能够显著抑制HepG2和MHCC-97H细胞增... 详细信息

本文探讨紫花前胡苷(nodakenin,NK)对肝癌细胞的作用及机制。不同浓度紫花前胡苷处理HepG2和MHCC-97H细胞,CCK-8检测细胞增殖变化,细胞划痕和Trans-wells实验观察细胞迁移和侵袭能力变化。紫花前胡苷能够显著抑制HepG2和MHCC-97H细胞增殖、体外迁移和侵袭;RNA-seq分析紫花前胡苷给药前后各基因表达,qRT-PCR、Western blotting和细胞免疫荧光进行验证分析,结果表明紫花前胡苷给药后趋化因子5(CXCL5)的表达显著降低,同时ERK和MEK磷酸化被抑制。综上所述紫花前胡苷通过下调CXCL5抑制ERK/MEK信号通路从而发挥抗肝癌作用。

关键词：紫花前胡苷 CXCL5 ERK/MEK 肝癌

紫花前胡苷抑制哮喘小鼠气道炎性反应和NF-κB信号传导通路

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基础医学与临床 2014年第5期34卷 690-694页

作者：熊友谊时维静俞浩张孝林安徽科技学院食品药品学院安徽凤阳233100

目的观察紫花前胡苷抗过敏性哮喘鼠气道炎性反应作用。方法 BALB/c小鼠被随机分为对照、模型、紫花前胡苷和地塞米松4组。除对照组外,所有小鼠腹腔注射和雾化吸入卵清蛋白以致敏和诱导气道炎性反应。于每次雾化前1h,给紫花前胡苷组灌胃1... 详细信息

目的观察紫花前胡苷抗过敏性哮喘鼠气道炎性反应作用。方法 BALB/c小鼠被随机分为对照、模型、紫花前胡苷和地塞米松4组。除对照组外,所有小鼠腹腔注射和雾化吸入卵清蛋白以致敏和诱导气道炎性反应。于每次雾化前1h,给紫花前胡苷组灌胃10 mg/kg紫花前胡苷;给地塞米松组腹腔注射1 mg/kg地塞米松。动物肺功能仪分析气道高反应性;细胞计数器和Diff-Quick染色计数支气管灌洗液中白细胞总数及分类;酶联免疫吸附法检测血清或BALF中炎性介质的水平;苏木精-伊红染色法观察气道病理改变;电泳迁移率和免疫印迹法检测肺组织NF-κВ信号通路中蛋白的活力和表达。结果与对照组比较,模型组呈现明显的气道炎性反应,气道反应性显著增高(P紫花前胡苷能够显著抑制气道炎性反应和气道高反应(P紫花前胡苷具有抗过敏性哮喘鼠气道炎性反应。

关键词：紫花前胡苷紫花前胡哮喘核因子κB

高效液相色谱法测定不同产地羌活中紫花前胡苷的含量

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中国中药杂志 2001年第11期26卷 737-738,780页

作者：孙玉茹李先端孙有富中国中医研究院中药研究所北京100700

目的 :测定不同产地羌活中紫花前胡苷含量。方法 :高效液相色谱法。结果 :紫花前胡苷回归方程为Y =- 95 0 9.1+1912 70 9.8X ,r =0 .9998,线性范围 0 .16～ 0 .6 4μg ,平均回收率 99.3% ,RSD 2 .6 4%。结论 :方法简单、快速、重现性好。

关键词：羌活高效液相色谱法紫花前胡苷含量测定

高效液相色谱法测定前胡属植物中紫花前胡苷的含量

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中国中药杂志 2000年第12期25卷 731-732页

作者：徐勤刘布鸣桂林医学院药学系广西桂林541004 广西中医药研究所广西南宁530022

目的 :建立高效液相色谱法测定前胡药材中紫花前胡苷的含量。方法 :Shim PackCLC ODS柱 ,流动相乙腈甲醇水 (2 0∶5∶75 ) ,紫花前胡苷为对照品 ,外标法峰面积定量 ,紫外检测 (λ =334nm)。结果 :6个不同品种前胡中的紫花前胡苷含量... 详细信息

目的 :建立高效液相色谱法测定前胡药材中紫花前胡苷的含量。方法 :Shim PackCLC ODS柱 ,流动相乙腈甲醇水 (2 0∶5∶75 ) ,紫花前胡苷为对照品 ,外标法峰面积定量 ,紫外检测 (λ =334nm)。结果 :6个不同品种前胡中的紫花前胡苷含量为 0 .0 0 5 %～ 3.0 90 %。结论 :紫花前胡苷不能作为评价前胡属植物的药用指标 ,但可以作为紫花前胡的质量控制标准。

关键词：前胡属紫花前胡苷高效液相色谱紫花前胡

紫花前胡苷对尿毒症血清诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及机制研究

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紫花前胡苷对尿毒症血清诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及机...

作者：谭玲玲西南医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨紫花前胡苷(Nodakenin)对尿毒症患者血清诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化(epithelial-mesenchymal transitiontrans-differentiation,EMT)的影响及可能的机制,为防治肾间质纤维化提供新的可能的有效途径。方法:无菌条... 详细信息

目的:探讨紫花前胡苷(Nodakenin)对尿毒症患者血清诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化(epithelial-mesenchymal transitiontrans-differentiation,EMT)的影响及可能的机制,为防治肾间质纤维化提供新的可能的有效途径。方法:无菌条件下收集西南医科大学附属医院肾病内科以及体检中心2016年6月至2016年10月之间的10名尿毒症患者和10名正常人的血清,分别取等量混合在一起备用。将体外培养的HK-2细胞分为正常组(10%正常人血清)、模型组(10%尿毒症血清)、紫花前胡苷对照组(10%正常人血清+紫花前胡苷80 ng/ml)、紫花前胡苷低剂量干预组(10%尿毒症血清+紫花前胡苷20 ng/ml)、紫花前胡苷中剂量干预组(10%尿毒症血清+紫花前胡苷40 ng/ml)、紫花前胡苷高剂量干预组(10%尿毒症血清+紫花前胡苷80 ng/ml)。倒置相差显微镜观察各组细胞形态,应用CCK-8法测定各组细胞的增殖活性,用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assays,ELISA)测定细胞上清液中的转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)蛋白的含量,细胞表达α-SMA、E-钙黏素(E-cadherin)、smad3、P-smad3、上皮紧密连接蛋白(Zonula occludens 1,ZO-1)、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)、白细胞介素-6(Intedeukin-6,IL-6)、Toll样受体4(Toll-Like Recepter 4,TLR4)、IKKβ、P-IKKβ、NF-KB P65、P-NF-KB P65蛋白的表达情况由蛋白印记法(Western blot,WB)检测。免疫荧光(Immunofluorescence,IF)检测P-smad3、ZO-1的表达情况,免疫组化技术(Immunohistochemistry,IHC)检测细胞白细胞介素-6(Intedeukin-6,IL-6)蛋白的表达情况。结果:1.尿毒症患者血清对HK-2细胞的影响:与正常组相比,20%和40%尿毒症血清组细胞的增殖活性明显下降(P紫花前胡苷浓度下时,HK-2细胞的增殖活性无明显差异(P>0.05)。与正常组相比,尿毒症血清刺激48小时后,人肾小管上皮细胞胞体明显变细、变长,呈长梭形,经紫花前胡苷干预后,细胞由长梭形逐渐转变回正常的多边形或者三角形。相较于正常组,尿毒症血清刺激HK-2细胞48小时后,细胞TGF-β、P-smad3、α-SMA、Fibronectin蛋白的表达明显增加,中剂量及高剂量紫花前胡苷作用能使其表达有所减少,且具有显著统计学差异(P紫花前胡苷干预能使其有增加趋势。3.相较于正常组,尿毒症血清刺激24小时后,细胞TLR4、IL-6、P-NF-KB P65、P-IKKβ蛋白的表达明显增加,中剂量及高剂量紫花前胡苷干预能减少其表达,且差异具有统计学意义(P紫花前胡苷可能具有在体外条件下抑制尿毒症患者血清所诱导的热肾小管上皮细胞转分化的作用,其机制可能是通过抑制TLR4/NF-KB通路从而减少炎症因子IL-6的分泌。

关键词：紫花前胡苷尿毒症人肾小管上皮细胞转分化炎症

紫花前胡苷通过抑制Snail表达延缓肾纤维化的实验研究

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紫花前胡苷通过抑制Snail表达延缓肾纤维化的实验研究

作者：王露西南医科大学

学位级别：硕士

目的:肾纤维化不仅是慢性肾病的特征性病变,还是导致肾功能急剧衰竭的关键因素,目前尚无有效的治疗方法。多项研究表明肾间质纤维化的产生都与TGF-?1/Smad信号通路密切相关。本课题组在前期研究中发现:紫花前胡苷(nodakenin)可下调TGF-?... 详细信息

目的:肾纤维化不仅是慢性肾病的特征性病变,还是导致肾功能急剧衰竭的关键因素,目前尚无有效的治疗方法。多项研究表明肾间质纤维化的产生都与TGF-?1/Smad信号通路密切相关。本课题组在前期研究中发现:紫花前胡苷(nodakenin)可下调TGF-?1/Smad信号通路,具有改善肾脏纤维化的作用,但具体机制不清。本实验拟通过小鼠体内和细胞体外实验进一步深入研究紫花前胡苷是否通过抑制snail蛋白表达延缓肾脏纤维化。方法:1.体内实验观察紫花前胡苷对肾纤维化的作用:取6周龄SPF级Balb/c小鼠(雄性)28只,体重170 g,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(unilateral ureteral obstraction,UUO组)、低剂量组(1 mg/kg Noda,L组)、高剂量组(10 mg/kg Noda,H组),每组7只,适应性喂养1周后按照常规方法制作UUO模型,其中Noda组、Sham组、UUO组分别给予紫花前胡苷和等体积10%Tween 80溶剂,连续灌胃7天后处死小鼠,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)变化;HE染色观察肾脏组织结构改变和炎症细胞浸润;糖原染色(PAS染色)、Masson染色、天狼星红染色(Sirius Red)观察肾间质基质沉积和纤维化的严重程度;免疫组织化学、Western blot检测纤维化指标蛋白(α-SMA、TGF-?1、Vimentin、Fibronectin蛋白)、TGF-?1/Smad通路相关蛋白和Snail蛋白。2.体外实验观察紫花前胡苷对肾小管纤维化的作用及其机制:1)体外实验观察紫花前胡苷对肾小管纤维化的作用:采用大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)置于5%CO、37℃和足够湿度的培养箱中,用含10%FBS的DMEM高糖培养液培养,当细胞生长达到到80%-90%融合度,采用0.25 g/L胰蛋白酶消化、传代备用,将细胞分为对照组(CTL组)、模型组(TGF-β1组)、紫花前胡苷低剂量组、中剂量组和高剂量组(TGF-β1+10μm Noda组、TGF-β1+20μm Noda组、TGF-β1+40μm Noda组),6 ng/μL人重组TGF-β1刺激后给于不同浓度紫花前胡苷(nodakenin,Noda)干预,处理48 h后倒置显微镜、免疫荧光染色观察细胞形态变化;Western blot技术和实时荧光定量PCR检测纤维化相关蛋白、TGF-?1/Smad通路相关蛋白和Snai1蛋白的表达。2)慢病毒转染snail观察对肾小管纤维化的作用:慢病毒转染NRK-52E细胞过表达snail蛋白(snail-oe),Western blot验证转染是否成功;将细胞分为snail-oe组,snail-oe+TGF-β1组,snail-oe+TGF-β1+Noda组和snail-oe+Noda组,干预处理48 h后Western blot法检测相关纤维化蛋白、TGF-?1/Smad通路的表达。结果1、体内实验:1)血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)结果显示,与UUO组小鼠相比,高剂量紫花前胡苷组可明显下降,差异有统计学意义;2)病理染色发现,UUO组小鼠的肾脏发生严重的肾小管扩张,肾小管上皮细胞脱落表现,扩张的肾小管区域显示大量基质沉积,出现严重的间质纤维化纤维化区域,H组小鼠与其相比,肾小管扩张、基质沉积以及纤维化区域均出现明显减少,表明紫花前胡苷可显著延缓UUO的病理改变。3)Western blot法检测结果显示,与UUO组结果相比,紫花前胡苷干预可以明显降低UUO小鼠纤维化相关蛋白(α-SMA、TGF-?1、Vimentin和Fbironectin)、TGF-?1/Smad通路和Snail蛋白的过表达;而与UUO组相比,低剂量组(L组)的作用并不明显。2、体外实验:1)与CTL组比较,TGF-β1组刺激48 h后,细胞体积变大,失去极性,E-cadherin的表达相对变少,而加入紫花前胡苷干预后可以抑制这种现象;2)qPCR、Western blot结果显示,与CTL组相比,TGF-β1组纤维化相关蛋白表达明显升高,加入紫花前胡苷干预,尤其是20μm紫花前胡苷可以明显降低这些蛋白的表达;3)实验结果显示,与CTL组相比,TGF-β1组的TGF-β1/Smad信号通路的各蛋白和Snail蛋白表达明显升高,经紫花前胡苷干预可以降低它们在细胞中的表达;4)紫花前胡苷在snail过表达后的干预作用消失,不能有效抑制相关纤维化蛋白和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白的表达。结论:1、紫花前胡苷可延缓肾间质纤维化部分恢复UUO小鼠受损肾功能;2、紫花前胡苷可以降低TGF-β1刺激NRK-52E产生的相关纤维化蛋白和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白的表达;3、紫花前胡苷

关键词：紫花前胡苷 UUO 肾间质纤维化 TGF-β1/Smad Snail

HPLC-荧光检测法测定犬血中紫花前胡苷的浓度及其药代动力学初步研究

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药物分析杂志 2013年第3期33卷 367-370页

作者：李婧孙文霞西南民族大学化学与环境保护工程学院成都610041 四川抗菌素研究所有限公司成都610051

目的:建立HPLC-荧光法测定犬血浆中紫花前胡苷的浓度,初步研究紫花前胡苷在犬体内的药代动力学特征。方法:以乙腈为蛋白沉淀剂,以Hypersil BDS C18柱(200 mm#4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(45∶55);激发波长为360 nm... 详细信息

目的:建立HPLC-荧光法测定犬血浆中紫花前胡苷的浓度,初步研究紫花前胡苷在犬体内的药代动力学特征。方法:以乙腈为蛋白沉淀剂,以Hypersil BDS C18柱(200 mm#4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(45∶55);激发波长为360 nm;发射波长为395 nm。Beagle犬4只,单次静脉注射紫花前胡苷30 mg·kg-1,后肢静脉取血,采用HPLC测定血药浓度,并用DAS 2.0程序计算药代学参数。结果:Beagle犬血浆中内源性成分对测定无干扰,紫花前胡苷的线性范围为0.1～40.0μg·mL-1(r=0.9993),平均相对回收率为89.8%～100.7%,日内和日间RSD均紫花前胡苷在犬体内的药代动力学过程符合开放二房室模型,主要药代动力学参数t1/2α、t1/2β、V1、CL和AUC(0-t)分别为(0.536±0.085)h、(3.048±0.826)h、(0.446±0.038)L·kg-1、(0.417±0.108)L·***-1和(68.966±16.181)mg·L-1.h。结论:本方法准确、灵敏、快速,适用于紫花前胡苷的血药浓度测定和药代动力学研究,为紫花前胡苷的开发和临床应用提供参考。

关键词：紫花前胡苷高效液相色谱法荧光法检测法比格犬血浆样品药代动力学

RP-HPLC法测定5种剂型的九味羌活制剂中紫花前胡苷、异欧前胡素

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中成药 2014年第7期36卷 1458-1461页

作者：张幸福范莹莹王菲杨凤梅骆桂法刘海青青海省食品药品检验所青海西宁810016

目的建立九味羌活（羌活、防风、苍术、黄芩、川芎、白芷、地黄、细辛和甘草）5种不同剂型（大蜜丸、小蜜丸、浓缩丸、水丸、颗粒剂）中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定方法。方法 HPLC分析采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm... 详细信息

目的建立九味羌活（羌活、防风、苍术、黄芩、川芎、白芷、地黄、细辛和甘草）5种不同剂型（大蜜丸、小蜜丸、浓缩丸、水丸、颗粒剂）中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定方法。方法 HPLC分析采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;乙腈-0.5%冰乙酸水溶液为流动相,非线性梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长330 nm。结果采用的方法对5种剂型中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定均适用,其中紫花前胡苷在9.38～469.20 ng、异欧前胡素在12.56～167.48 ng范围内线性良好,相关系数均为0.999 9。结论本法分离效果好,专属性强,准确,可用于九味羌活系列制剂的质量控制。

关键词：九味羌活方紫花前胡苷异欧前胡素高效液相色谱梯度洗脱