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基于UPLC-MS法及网络药理学预测紫红参质量标志物

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中成药 2023年第2期45卷 613-619页

作者：林源朱雪艳黄豆豆黄宝康王宏瑞卜其涛张成中温岭市中医院浙江温岭317500 中国人民解放军海军军医大学药学系上海200433 上海中医药大学中药研究所上海201203

目的基于UPLC-MS法及网络药理学预测紫红参潜在的质量标志物。方法基于UPLC-Q/TOF-MS法研究紫红参中人参皂苷类成分的变化,运用多元统计分析解析炮制前后差异化合物,运用多种数据库通过网络药理学的方法构建“紫红参-成分-靶点-通路... 详细信息

目的基于UPLC-MS法及网络药理学预测紫红参潜在的质量标志物。方法基于UPLC-Q/TOF-MS法研究紫红参中人参皂苷类成分的变化,运用多元统计分析解析炮制前后差异化合物,运用多种数据库通过网络药理学的方法构建“紫红参-成分-靶点-通路”网络关系,预测潜在的质量标志物。结果 UPLC-MS检测发现,紫红参含有较多其原药材不具有的稀有皂苷,根据其质谱特征鉴定出7个稀有皂苷类化合物,结合数据库文献分析,选择紫红参中皂苷类差异性化合物,通过网络药理学预测发现这些成分具有较好的药理活性,是紫红参潜在的质量标志物。结论基于UPLC-MS及网络药理学预测发现人参皂苷Rg5、Rk1、Rh3、compound K等是紫红参中的差异性化合物,与EGFR、VEGFA、JUN、Akt、PIK3CA、MAPK、MTOR、STAT等关键指标相关,可作用于癌症通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等信号通路,发挥抗癌、降糖等多种药理作用,这些差异性化合物可作为紫红参潜在的质量标志物。

关键词：紫红参质量标志物多元统计分析网络药理学 UPLC-Q/TOF-MS

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紫红参质量标准研究报告

紫红参质量标准研究报告

作者：陈奇延边大学

学位级别：硕士

紫红参为人参的干燥根和根茎的深加工产物之一。紫红参产品外观呈现淡黑褐色或者黑茶褐色,所以紫红参又被称为黑红参或黑参（文中紫红参又记作“黑参”）。最近几年对紫红参的炮制方式、化学成分、药理作用和毒理研究等研究比较深入。... 详细信息

紫红参为人参的干燥根和根茎的深加工产物之一。紫红参产品外观呈现淡黑褐色或者黑茶褐色,所以紫红参又被称为黑红参或黑参（文中紫红参又记作“黑参”）。最近几年对紫红参的炮制方式、化学成分、药理作用和毒理研究等研究比较深入。紫红参与人参相比较,它的炮制工艺中包括了蒸制、晾晒等,这些工艺需要较长的时间,而在这一过程中许多人参固有的人参皂苷就会转化形成稀有人参皂苷,所以人参固有的治疗功能也会发生变化,由于加工过程中蒸制压力、蒸制温度、次数和干燥条件（温度）的不同,这些原因都将影响紫红参成品中化学成分的转化程度。随着国内外对紫红参功效的深入研究,人们更加接受紫红参,更多的使用紫红参,所以迫切要求对不同工艺的紫红产品建立相应的质量控制方法,对其进行严格的质量控制,保证紫红参产品的质量和应用的功效。目前尚没有紫红参的国家标准,我省是人参产业大省,人参深加工产品开发是我省人参产业的主要发展方向,建立紫红参吉林省地方标准是目前亟待解决的事情。在本报告中,对紫红参药材完成了如下研究:1.紫红参药材的性状鉴别;2.紫红参药材显微鉴别——包括紫红参横切面显微鉴别、紫红参粉末显微鉴别;3.建立紫红参薄层鉴别方法;4.按照《中国药典》2015年版四部通则0200项下有关的各项规定,对紫红参进行各项检查,对水分检查暂定限量标准,标准为不允许高于14.0%,对总灰分检查暂定限量标准,标准为不允许高于6.0%,重金属及有害元素暂定限量标准,检测铅不允许高于5 mg/kg;镉不允许高于0.3mg/kg;砷不允许高于2mg/kg;汞不允许高于0.2mg/kg;铜不允许高于20mg/kg。农药残留量检测指标包括含（β-BHC、γ-BHC、α-BHC、δ-BHC之和）总六六六、五氯硝基苯、（p,p’-DDE、o,p’-DDT、p,p’-DDD、p,p’-DDT之和）总滴滴涕,暂定限量标准分别为不允许高于0.2mg/kg、不允许高于0.1 mg/kg、不允许高于0.2mg/kg;5.增设紫红参中的总还原糖检测项,暂定限量标准为:紫红参药材按干燥品计算,含总还原糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计,不得过30%;6.建立紫红参药材HPLC含量测定方法,并确立了色谱条件,选用日本岛津规格为（5 μm,4.6 × 150 mm）,型号为VP-ODS的色谱柱;选择乙腈（A）—水（B）为流动相,按照如下梯度洗脱,梯度洗脱0～25min21%～60%乙腈;25～35 min 60%～65%乙腈;仪器参数设置为1.0 mL/min流速;203 nm作为检测波长;柱温参数为35℃;10 μL进样体积;理论板数按人参皂苷Rg3峰计算不低于100000。暂定紫红参药材含量:按干燥品计算,含人参皂苷Rg3（C42H72013）不得少于0.20%;7.建立紫红参药材HPLC指纹图谱,本研究报告中选用了高效液相色谱法（HPLC）为紫红参建立了稳定、可靠的指纹图谱分析方法,并进行了方法学验证,并确立其色谱条件,选用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱;选择乙腈（A）—水（B）为流动相,按照如下梯度洗脱,0～9min5%～21%乙腈;9～15 min21%～35%乙腈;15～20min35%～42%乙腈;20～28 min42%～47%乙腈;28～38 min47%～60%乙腈;38～42 min 60%～65%乙腈;42～45 min 65%～75%乙腈;45～54 min 75%～95%乙腈;54～59 min 95%乙腈;仪器参数设置流速为0.4 mL/min,203 nm作为检测波长;柱温设置为30℃;3 μL进样体积。在该色谱条件下,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）对十批紫红参进行相似度评价,确立了紫红参样品中的12个共有峰。紫红参药材HPLC指纹图谱,方法简便易行,用于生产过程质量监控,为紫红参生产过程中的质量控制提供了提供了科学参考依据。8.完成紫红参质量标准草案起草。本报告基于紫红参地方标准展开研究,其研究结果将填补吉林省关于紫红参地方标准的空白,也为生产企业生产过程中的质量控制提供了科学、有效、方便、可行的参考依据,进一步完善紫红参质量源头的把控和监管,并对紫红参未来的开发以及临床应用提供了科学保障。

关键词：紫红参质量标准指纹图谱

UPLC-ESI-MS-MS分析生晒参和紫红参中皂苷类成分

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中国实验方剂学杂志 2013年第13期19卷 91-93页

作者：邱楠楠刘金平苏航董刚刘海燕李平亚吉林大学再生医学科学研究所长春130021

目的:采用UPLC-ESI-MS-MS方法比较生晒参和紫红参中人参皂苷类成分的种类及含量,阐明紫红参特异成分。方法:Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相A(0.1%甲酸)-B(乙腈)梯度洗脱,柱温30℃;质谱条件:电喷雾离... 详细信息

目的:采用UPLC-ESI-MS-MS方法比较生晒参和紫红参中人参皂苷类成分的种类及含量,阐明紫红参特异成分。方法:Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相A(0.1%甲酸)-B(乙腈)梯度洗脱,柱温30℃;质谱条件:电喷雾离子化源(ESI),负离子检测模式。结果:与生晒参相比,紫红参中人参皂苷的种类和数量发生了改变,检测出含量较高的人参皂苷为20(S)-人参皂苷Rg3、20(R)-人参皂苷Rg3、20(R)-人参皂苷Rh1、20(R)-人参皂苷Rg2,Rk1,Rg5,Rd,Ro、姜状三七苷R1等。结论:人参加工成紫红参后皂苷类成分发生较大的变化,产生了大量稀有皂苷,人参加工可能产生紫红参的特异成分。

关键词：生晒参紫红参人参皂苷超高液相色谱-电喷雾-串联四级杆质谱联用仪

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紫红参的HPLC指纹图谱研究

辽宁中医杂志 2013年第8期40卷 1671-1673页

作者：邱楠楠卢丹张庆贺高红梅李平亚吉林大学药学院吉林长春130021

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立紫红参的指纹图谱。方法:色谱柱:Aglient Zorbax SB-Aq(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱0～25 min 20%～60%A;25～40 min 60%～90%A;检测波长203 nm;柱温:35℃;流速:1.0 mL/min;进样体积:10μL。结果:在选定的色谱条件下,通过相似度分析软件确定了紫红参指纹图谱有12个共有峰。10批紫红参样品整体相似度较高,相似度为0.885～1.000。结论:实验中所建立的方法稳定、可靠,为紫红参的质量评价与控制提供了依据。

关键词：紫红参指纹图谱高效液相色谱法

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紫红参提取物抗肿瘤作用研究

浙江中医药大学学报 2013年第1期37卷 9-12,17页

作者：张强孙桂波陈荣昌徐惠波温富春高庆海刘伟杰杨艳芳陈素红孙晓波温州医学院浙江温州325035 中国医学科学院药用植物研究所吉林省中医中药研究院长白山皇封参业有限公司

[目的]以中国红参,高丽参为对照探讨紫红参提取物的抗肿瘤活性。[方法]体外实验:HepG 2、A549、BGC823细胞培养,用药后MTT法检测细胞活力;体内试验:制备S180荷瘤小鼠,灌胃给药,称取瘤重计算抑瘤率。[结果]体外实验:紫红参须提取物对肿... 详细信息

[目的]以中国红参,高丽参为对照探讨紫红参提取物的抗肿瘤活性。[方法]体外实验:HepG 2、A549、BGC823细胞培养,用药后MTT法检测细胞活力;体内试验:制备S180荷瘤小鼠,灌胃给药,称取瘤重计算抑瘤率。[结果]体外实验:紫红参须提取物对肿瘤细胞抑制作用较强,在0.9、1.8g.L-1对HepG 2抑制率分别为69.73%、91.10%,对BGC823抑制率分别为73.58%、93.12%,在1.8g.L-1对A549抑制率为88.06%;体内实验:红参、紫红参根、紫红参须、高丽参提取物对S180肉瘤生长具有明显抑制作用,紫红参须提取物抑瘤活性最好,抑瘤率达到44.3%。[结论]紫红参须提取物抑瘤作用较好,具有较大开发应用价值。

关键词：抗肿瘤紫红参 HepG2 A549 BGC823 S180荷瘤小鼠