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紫外线a照射差异性损伤皮肤角质形成细胞和成纤维细胞

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生物物理学报 2010年第11期26卷 959-965页

作者：许若颀邓林红杨力钟莉重庆大学生物工程学院"111计划"生物力学与组织修复工程基地教育部生物流变学与技术重点实验室重庆400044

紫外线a(ultraviolet A,UVA)照射皮肤可产生红斑、色素沉着以及光敏性损伤,导致光老化甚至诱导皮肤癌。研究发现,UVA(320～400 nm)照射对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞造成损伤的反应和损伤程度都有所不同。本文结合近年来的相关研究,对... 详细信息

紫外线a(ultraviolet A,UVA)照射皮肤可产生红斑、色素沉着以及光敏性损伤,导致光老化甚至诱导皮肤癌。研究发现,UVA(320～400 nm)照射对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞造成损伤的反应和损伤程度都有所不同。本文结合近年来的相关研究,对UVA照射导致的上述两种细胞的形态、细胞膜损伤、血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)活性、HO-1表达、细胞内有害自由铁形成,以及其它抗氧化物水平的不同反应等进行阐述,总结分析了同等剂量UVA照射后对角质形成细胞和成纤维细胞损伤的差异性,这些分析可能为皮肤抗UVA照射损伤以及寻找新型防晒剂的开发提供新思路和实验依据。

关键词：皮肤细胞紫外线a 血红素氧合酶自由铁

核黄素-紫外线a照射加速巩膜交联治疗豚鼠实验性近视

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中华实验眼科杂志 2018年第10期36卷 767-772页

作者：徐海铭刘辉余洁贺金晶杭州医学院附属人民医院浙江省人民医院眼科杭州310014

目的评估口服核黄素联合脉冲和持续紫外线a（UVA）照射加速巩膜交联对实验性豚鼠进展性近视的治疗作用以及对巩膜生物力学和组织学改变作用。方法30只4周龄豚鼠按照随机数字表法分为空白对照组、非交联组、传统交联组、脉冲光加速交联... 详细信息

目的评估口服核黄素联合脉冲和持续紫外线a（UVA）照射加速巩膜交联对实验性豚鼠进展性近视的治疗作用以及对巩膜生物力学和组织学改变作用。方法30只4周龄豚鼠按照随机数字表法分为空白对照组、非交联组、传统交联组、脉冲光加速交联组和持续光加速交联组，每组均为6只。3个组巩膜交联组豚鼠均连续服用核黄素和维生素C 3 d后，进行右眼近视眼建模和UVA照射。照射参数分别为传统交联组波长370 nm，功率为0.67 mW/cm 2，连续照射1 h；脉冲光加速交联组波长370 nm，功率为10 mW/cm 2，共照射8 min，脉冲模式为1 s开/1 s关；持续光加速交联组波长370 m，功率为10 mW/cm 2，连续照射4 min。非交联组仅接受右眼近视眼建模，但未服用核黄素及维生素C，也不接受UVA照射；空白对照组不接受任何处理。分别测量5个组基线及建模后的屈光度和眼轴长度。2周后颈椎脱臼法处死豚鼠，摘除右眼行巩膜生物力学和组织病理学检查。结果实验2周后，与空白对照组相比较，非交联组眼轴明显伸长，近视屈光度明显增加，巩膜最大载荷及最大应力显著下降，巩膜胶原纤维粗细不均匀，部分溶解，巩膜Collagen 1A及TIMP-2阳性染色减少，MMP2阳性染色增加，提示近视造模成功。传统交联组、脉冲光加速交联组和持续光加速交联组，交联组豚鼠眼球眼轴长度短于非交联组，和近视屈光度明显高于非交联组，差异均有统计学意义（均P<0.01）；3个交联组豚鼠眼球最大载荷值及最大应力值均高于非交联组[最大应力：（2.20±0.03)、（2.67±0.05）、（2.41±0.04）Mpa vs.(1.30±0.02）Mpa；最大载荷：（1.93±0.03）、（2.33±0.28）和（1.91±0.03）P vs.(1.54±0.06）P]，差异均有统计学意义（均P<0.01）；巩膜组织病理学检查显示脉冲光加速交联组和持续光加速交联组巩膜胶原纤维粗细均匀，更接近空白对照组巩膜形态。免疫组织化学染色显示，与非交联组比较，3个组交联组巩膜Collagen1A阳性染色均增多，脉冲光加速交联组和持续光加速交联组MMP2阳性染色减少及TIMP-2阳性染色增加。结论口服核黄素联合脉冲和持续UVA照射加速巩膜交联可以通过增强巩膜生物力学强度，有效地阻止豚鼠实验性近视的进展。

关键词：核黄素紫外线a 巩膜交联近视豚鼠

微创核黄素-紫外线a巩膜胶原交联对巩膜生物力学强度的增强作用及安全性

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中华实验眼科杂志 2018年第2期36卷 96-101页

作者：王红燕肖博楚艳华韩泉洪天津医科大学眼科临床学院天津市眼科医院天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所 300020

目的研究微创核黄素－紫外线a行巩膜胶原交联后巩膜生物力学特性的改变及其安全性。方法采用计算机取随机数法将56只清洁级新西兰大白兔随机分为非交联对照组和交联后1 d、7 d、15 d、1个月、2个月和3个月组，每组8只，其中6只用于巩膜... 详细信息

目的研究微创核黄素－紫外线a行巩膜胶原交联后巩膜生物力学特性的改变及其安全性。方法采用计算机取随机数法将56只清洁级新西兰大白兔随机分为非交联对照组和交联后1 d、7 d、15 d、1个月、2个月和3个月组，每组8只，其中6只用于巩膜生物力学性能检测，2只分别用于组织病理学检查和细胞凋亡检测。各组兔均取右眼为实验眼，左眼为正常对照眼。兔实验眼以质量分数0.1%核黄素溶液（不含右旋糖酐）作为光敏感剂点眼，1次/2 min，共10次，然后制作微创结膜切口，微创紫外线巩膜交联仪发光二极管（LED）端插入并贴近眼球后部巩膜照射30 min，紫外线波长为370 nm，辐照度为3 mW/cm2。照射期间用医用体温计测量巩膜温度；按照分组时间点获取实验兔球壁组织，采用千分尺测定巩膜厚度；采用微材料力学性能测试系统对巩膜条带行预拉伸、拉伸破坏试验，测定巩膜的极限应力、极限应变和8%弹性模量；制备兔眼球组织切片并行苏木精－伊红染色，评估眼球组织病理学变化；采用TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况。结果非交联对照组和交联后1 d、7 d、15 d、1个月、2个月和3个月组实验兔及其左右眼间巩膜厚度的总体比较差异均无统计学意义（F眼别＝0.02，P〉0.05；F组别＝1.71，P〉0.05）。与非交联对照组比较，兔右眼交联后1 d、7 d、15 d、1个月、2个月和3个月组巩膜极限应力和8%弹性模量均明显增加，极限应变均明显下降，差异均有统计学意义（均P〈0.05），与交联后1 d、7 d、15 d、1个月和2个月组比较，交联后3个月组实验眼极限应力、8%弹性模量值均下降，极限应变均增加，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；与非交联的左眼比较，交联后各时间点右眼极限应力、8%弹性模量值均增加，极限应变均下降，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。组织病理学检查显示，交联后实验兔眼角膜、巩膜、虹膜、睫状体和脉络膜组织均无明显病理学改变。细胞凋亡检测结果显示，非交联对照组和交联后1 d、7 d、15 d、1个月、2个月和3个月组实验眼视网膜细胞凋亡率分别为（11.00±0.33）%、（12.33±1.58）%、（12.02±0.45）%、（11.81±0.85）%、（12.15±0.61）%、（12.14±0.25）%和（11.74±0.63）%，组间总体比较差异无统计学意义（F＝1.78，P＝0.14）。结论微创核黄素－紫外线a巩膜胶原交联术可有效增强兔巩膜的生物力学强度，且对眼球各组织无明显病理性损害。

关键词：微创核黄素紫外线a 巩膜胶原交联生物力学

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紫外线对人角朊细胞的氧化损伤及防护研究

环境与健康杂志 2001年第4期18卷 212-214页

作者：倪建华周华戴修道郑悦复旦大学医学院环境卫生教研室 200032

目的　探讨紫外线 A(U VA)对原代培养人皮肤角朊细胞的氧化损伤及防晒化妆品的防护效果。方法　利用原代培养人皮肤角朊细胞 ,采用不同剂量的 UVA照射 ,测定细胞上清液丙二醛 ,细胞内过氧化氢酶和超氧化物歧化酶 ,并对防晒化妆品的防护... 详细信息

目的　探讨紫外线 A(U VA)对原代培养人皮肤角朊细胞的氧化损伤及防晒化妆品的防护效果。方法　利用原代培养人皮肤角朊细胞 ,采用不同剂量的 UVA照射 ,测定细胞上清液丙二醛 ,细胞内过氧化氢酶和超氧化物歧化酶 ,并对防晒化妆品的防护作用进行评价。结果　 UVA照射剂量从 2 .88J/ cm2到 11.5 2 J/ cm2 ,MDA含量由 2 .5 4μmol/ L增加到 6 .75μmol/ L ,CAT含量由 15 .76 U/ mg(prot)减少至 6 .33U/ mg(prot) ,SOD含量由 2 5 .5 5 NU/ mg(prot)降至2 3.81NU/ mg(prot)。涂抹广谱防晒化妆品后照射同样剂量的 UVA,MDA由 2 .18μmol/ L增至 4.82μmol/ L ,CAT由17.19U/ mg(prot)减少至 10 .35 U/ mg(prot) ,SOD由 2 6 .5 2 NU/ m g(prot)降至 2 4.5 1NU/ mg(prot)。结论　 UVA对人皮肤角朊细胞具有明显的氧化损伤作用 ,本实验条件下的广谱防晒化妆品对细胞具有一定的防护功能。

关键词：紫外线a 角蛋白质细胞晒伤化妆品氧化损伤防护人体皮肤

姜黄素对核转录因子-κB表达的影响及小鼠角膜紫外线照射损伤的抑制作用

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眼科新进展 2017年第11期37卷 1015-1017页

作者：陈月芹黄振平程莹莹薛春燕南京大学医学院临床学院南京总医院眼科江苏省南京市210002

目的探讨姜黄素对紫外线a(ultraviolet A,UVA)照射小鼠角膜损伤的抑制作用。方法取C57 BL/6小鼠30只,随机分为3组,每组各10只;UVA照射组双眼接受位于前上方的UVA照射,波长为320~400 nm,照射强度为0.05 W·cm^(-2),照射距离固定,照射时间... 详细信息

目的探讨姜黄素对紫外线a(ultraviolet A,UVA)照射小鼠角膜损伤的抑制作用。方法取C57 BL/6小鼠30只,随机分为3组,每组各10只;UVA照射组双眼接受位于前上方的UVA照射,波长为320~400 nm,照射强度为0.05 W·cm^(-2),照射距离固定,照射时间24 h。姜黄素干预组在UVA照射前3 d给予小鼠姜黄素30 mg·kg^(-1)腹腔内注射,并持续至照射后48 h。对照组不做任何处理。利用裂隙灯观察角膜病变并对角膜混浊进行分级;照射后48 h取小鼠角膜组织,使用电泳迁移率实验检测核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的表达。结果照射后48 h,UVA照射组角膜混浊临床评分(3.10±0.74)均高于对照组(0)及姜黄素干预组(0.35±0.24)。两两比较发现对照组与姜黄素干预组间角膜混浊临床评分差异无统计学意义(P>0.05);UVA照射组与对照组以及姜黄素干预组间差异均有统计学意义(均为P0.05);UVA照射组与对照组以及姜黄素干预组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论姜黄素可以减轻UVA照射对小鼠角膜造成的损伤,其作用可能是通过抑制角膜组织内NF-κB表达实现的。

关键词：紫外线a 角膜核转录因子-κB

核黄素—紫外线a巩膜交联对实验性近视的影响研究

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核黄素—紫外线A巩膜交联对实验性近视的影响研究

作者：贺美男天津医科大学

学位级别：硕士

目的近视是发病率最高的眼病之一,近视发病率在全球范围内居高不下,并且呈现快速增长的趋势。近视程度越深,与高度近视相关的眼部并发症如视网膜脱离、视网膜下新生血管、白内障和青光眼等的风险也随之显著上升,这些并发症可引起严重视... 详细信息

目的近视是发病率最高的眼病之一,近视发病率在全球范围内居高不下,并且呈现快速增长的趋势。近视程度越深,与高度近视相关的眼部并发症如视网膜脱离、视网膜下新生血管、白内障和青光眼等的风险也随之显著上升,这些并发症可引起严重视力下降和不可逆性视力损伤。近视眼巩膜结构发生改变,巩膜干重减少,胶原排列紊乱,直径变细,巩膜抗张力变差。巩膜胶原交联可以使巩膜组织的胶原之间发生共价键重新结合,从而增强巩膜组织的机械性能,增强巩膜的抗牵拉能力,进而阻止眼轴的进一步延长。本研究采用面罩法形觉剥夺制作豚鼠近视模型,并通过核黄素-紫外线a诱导后极部巩膜胶原交联,观察后极部巩膜交联对豚鼠实验性近视的影响研究,有望为临床上近视的根本治疗提供新的可靠方法。方法1.选取3周龄三色豚鼠9只,随机分为正常对照组(NOR组,n=4)和形觉剥夺近视组(FDM组,n=5),FDM组配戴气球制作的面罩,暴露左眼、双耳及口鼻,遮盖右眼,NOR组不做任何处理,右眼为实验眼,分别于遮盖前、遮盖1周、2周进行生物学检测,包括屈光度和眼轴长度。2.选取出生3周的三色豚鼠9只,右眼为实验眼,左眼为自身对照。进行右眼单眼核黄素-紫外线a后极部巩膜胶原交联手术,1周后处死豚鼠,取巩膜做成条带,行巩膜生物力学检测。3.选取出生3周的三色豚鼠25只,由丹阳市吕城镇奥臣实验动物养殖场提供(批号:SCXk(京2013-0007)),屈光度范围在08.00D之间,双眼屈光参差小于2.5D,随机分为空白对照组NOR(n=7)、形觉剥夺组FDM(n=7)、单纯交联组NOR+CL(n=5)和近视交联组FDM+CL(n=6),选取右眼为实验眼,左眼为自身对照眼。NOR组不做任何处理,FDM组进行右眼单眼面罩法形觉剥夺,NOR+CL组只进行右眼单眼核黄素-紫外线a后极部巩膜胶原交联,FDM+CL组先进行右眼单眼核黄素-紫外线a后极部巩膜胶原交联,后进行右眼单眼面罩法形觉剥夺。分别于实验前、遮盖1周、2周、3周、4周进行豚鼠眼球光学生物测量,包括屈光度、眼轴长度和角膜曲率,4周测量结束后,处死豚鼠,每组选取2只行组织病理学检测,其余取巩膜条带行生物力学检测。结果1.面罩法形觉剥夺可以成功制作豚鼠实验性近视模型。形觉剥夺2周可以诱导约-2.50D的近视,眼轴延长约0.2mm,FDM组实验眼(OD)与对照眼(OS)相比,更趋近于近视,双眼屈光参差向近视方向发展,NOR组双眼间无明显差异,FDM组与NOR组相比,双眼屈光参差具有明显差异,有统计学意义。2.核黄素-紫外线a诱导的后极部巩膜胶原交联可以成功诱导巩膜胶原交联,有效增强巩膜的机械性能,巩膜的极限应力和弹性模量增大,极限应变减小。3.核黄素-紫外线a诱导的后极部巩膜胶原交联可以延缓豚鼠实验性近视的进展速度。核黄素-紫外线a交联可以延缓近视屈光度增长约35%。FDM组与其他3组相比,实验眼的眼轴较对侧眼明显延长,差异有统计学意义,而FDM+CL组与NOR组相比,眼轴几乎无明显增长。4组组织病理学检测结果显示,视网膜和RPE细胞未见明显损伤。结论核黄素-紫外线a诱导的后极部巩膜胶原交联可以通过增强巩膜的机械性质进而延缓豚鼠实验性近视的进展速度,且对视网膜和RPE细胞无明显损伤。

关键词：近视豚鼠核黄素紫外线a 巩膜交联生物力学

视蛋白3在紫外线a诱导光老化中的作用及机制研究

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视蛋白3在紫外线A诱导光老化中的作用及机制研究

作者：兰应华贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:检测视蛋白(opsins,OPNs)是否在人皮肤成纤维细胞中表达,进一步探索OPNs是否参与调控紫外线a(UVA)诱导的光老化形成,并明确其分子调控机制。方法:贴壁法分离培养人原代皮肤成纤维细胞,传至第3代,利用形态学观察、特异性波形蛋白荧... 详细信息

目的:检测视蛋白(opsins,OPNs)是否在人皮肤成纤维细胞中表达,进一步探索OPNs是否参与调控紫外线a(UVA)诱导的光老化形成,并明确其分子调控机制。方法:贴壁法分离培养人原代皮肤成纤维细胞,传至第3代,利用形态学观察、特异性波形蛋白荧光染色鉴定后进行后续实验。免疫荧光检测OPNs在成纤维细胞中的表达及定位;实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)检测OPNs的核酸水平;蛋白质印迹法(Western-blot)在蛋白水平上验证OPNs的表达。不同剂量UVA照射人皮肤成纤维细胞后,形态学观察细胞状态,并利用CCK8检测细胞存活率,Western-blot检测照射后OPNs的表达变化;根据CCK8及OPNs表达变化的结果,以10J/cm UVA反复照射人皮肤成纤维细胞,构建成纤维细胞光老化模型;通过形态学、细胞周期及β半乳糖苷酶染色确定光老化模型建立成功。利用Western-blot检测OPN3、基质金属蛋白酶-1(Matrix metalloproteinase-1,MMP1)及基质金属蛋白酶-3(Matrix metalloproteinase-3,MMP3)在光老化模型中表达情况;免疫荧光检测OPN3分别与MMP1、MMP3在成纤维细胞上的共表达定位。接下来,利用RT-PCR和Western-blot检测siRNA靶向沉默OPN3的效率。siRNA靶向成功沉默OPN3后,再予UVA照射,Western-blot检测MMP1及MMP3的表达变化。另外分别UVA照射细胞、siRNA靶向沉默细胞OPN3后再予UVA照射及使用PLC抑制剂U73122处理细胞后再予UVA照射,利用Fluo-3-AM探针处理后,免疫荧光和流式细胞术检测胞内Ca浓度;Western-blot检测MAPK/AP-1信号通路相关蛋白表达。结果:相差显微镜下可见成纤维细胞呈长梭形生长,免疫荧光染色波形蛋白阳性。免疫荧光显示视蛋白亚单位(OPN1-SW,OPN2,OPN3,OPN4,OPN5)以半圆或圆的形式排列在成纤维细胞膜上的表达,并且OPN3的免疫荧光强度显著高于其他视蛋白。通过Western-blot和RT-PCR分别分析视蛋白的蛋白表达水平和mRNA水平,结果与免疫荧光的结果一致(p<0.05)。5J/cm至25J/cm UVA单一剂量照射成纤维细胞后检测了OPN3的蛋白表达水平,在5J/cm的剂量下增加,在10J/cm达到峰值,然后逐渐下降。同时用CCK-8测定法测试不同剂量的UVA照射成纤维细胞后的细胞增殖情况。在10J/cm UVA照射后,超过75%的细胞保持活力。结合以前的文献报道,我们选择10J/cm UVA进行后续研究。单次剂量10J/cm UVA照射后OPN3的表达显着高于其他OPN的蛋白表达水平。在光老化模型中的OPN3蛋白表达水平也显著高于对照组(p<0.01)。另外,光老化模型中的MMP1、MMP3蛋白表达水平也显著高于对照组(p<0.01)。我们进一步探讨OPN3和MMP1、MMP3的相关性;免疫荧光染色证实了OPN3分别与MMP1和MMP3在成纤维细胞中共表达。Western-blot对沉默OPN3前后的成纤维细胞内诱导光老化相关的基因进行检测,结果发现UVA照射靶向沉默OPN3的成纤维细胞后,MMP1和MMP3在蛋白水平的表达无明显变化。我们进一步研究该机制,根据先前的研究表明G蛋白偶联受体(GPCRs)的激活导致钙通量的增加。在本实验中,UVA照射成纤维细胞后,用Fluo-3AM探针测量细胞内钙水平,免疫荧光和流式细胞术结果为细胞内钙水平显著增加,以及相关p-CAMKⅡ、p-CREB蛋白表达水平也显著增加。另外,UVA照射靶向沉默OPN3的成纤维细胞后,细胞内钙水平及相关p-CAMKⅡ、p-CREB蛋白表达水平无明显变化。为了弄清楚OPN3是通过何种信号通路对MMP1和MMP3的表达进行调控,我们进一步采用Ca信号通路抑制剂(PLC抑制剂U73122)处理成纤维细胞,然后在蛋白水平检测MMP1和MMP3表达;结果显示:抑制PLC通路可以降低MMP1和MMP3表达;同时抑制PLC通路再行UVA照射后,MMP1和MMP3蛋白表达水平无明显变化。以前的研究表明下游的p38MAPK、ERK、JNK信号转导通路参与MMPs的调控。我们使用siRNA沉默成纤维细胞中OPN3表达后再行UVA照射,结果显示p38MAPK、ERK及JNK信号转导通路的相关蛋白表达无明显变化;而UVA激活OPN3后,p38MAPK、ERK及JNK信号转导通路的相关蛋白表达上调,从而触发MMP1和MMP3高表达降解胶原纤维导致光老化。结论:我们的研究表明UVA通过OPN3-钙依赖信号转导通路及下游MAPK/AP-1信号相关蛋白磷酸化,上调MMP1和MMP3的表达。并揭示了OPN3作为UVA关键传感器并可能用于皮肤光老化预防或

关键词：视蛋白紫外线a 人皮肤成纤维细胞光老化

微创核黄素—紫外线a兔巩膜胶原交联的实验研究

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微创核黄素—紫外线A兔巩膜胶原交联的实验研究

作者：王红燕天津医科大学

学位级别：硕士

目的核黄素-紫外线a诱导的巩膜胶原交联疗法已在体外及活体动物实验中证明了其增强巩膜生物力学强度的长期有效性与安全性,但既往手术操作创伤大,且无法暴露解剖上较为靠后极的巩膜区域,本文旨在研究一种操作创伤小、可有效照射至后巩... 详细信息

目的核黄素-紫外线a诱导的巩膜胶原交联疗法已在体外及活体动物实验中证明了其增强巩膜生物力学强度的长期有效性与安全性,但既往手术操作创伤大,且无法暴露解剖上较为靠后极的巩膜区域,本文旨在研究一种操作创伤小、可有效照射至后巩膜区域的微创核黄素-紫外线a巩膜胶原交联法,通过设计合适的实验参数,在活体兔上展开一系列的实验研究,以验证其有效性与安全性。方法选用70只体重为2.0Kg.5Kg的成年清洁级新西兰大白兔,雌雄各半,无任何眼部疾病。随机分为7组,每组各10只,分别为非交联对照组(Ⅰ)、交联后1天组(Ⅱ)、交联后7天组(Ⅲ)、交联后15天组(Ⅳ)、交联后1月组(Ⅴ)、交联后2月组(Ⅵ)、交联后3月组(Ⅶ)。交联组(Ⅱ至Ⅶ组)和非交联对照组皆选择右眼作为实验眼,左眼作为对照眼。应用微创核黄素-紫外线a巩膜交联仪器对交联组行巩膜胶原交联实验,具体实验参数设置如下:紫外线波长为370nm,能量密度设置为3m W/cm2,照射时间为30分钟;通过微创结膜切口插入特制LED光源并贴近巩膜照射;每隔2分钟滴加1次浓度为0.1%的核黄素溶液(不含右旋糖酐)作为光敏感剂。分别在各交联组所规定的术后时间处死对应各交联组的兔子,摘取眼球,每组随机选取6只用于生物力学检测以比较各组巩膜生物力学指标变化(极限应力、极限应变和8%弹性模量),剩余4只用于HE染色、TUNEL细胞凋亡检测,以分析其组织病理学变化。结果1.各组(Ⅰ至Ⅶ组)左右眼巩膜厚度比较,组别差异无统计学意义(P>0.05),眼别差异无统计学意义(P>0.05),组别和眼别间不存在交互作用(P>0.05)。2.各组(Ⅰ至Ⅶ组)巩膜生物力学指标比较:组别差异均有统计学意义(均P0.05),右眼生物力学指标差异均有统计学意义(均P0.05),右眼生物力学指标差异均无统计学意义(均P0.05),右眼生物力学指标差异均有统计学意义(均P0.05);Ⅱ至Ⅶ组各组组内比较,左右眼的生物力学指标差异均有统计学意义(均P0.05)。结论交联组各组的兔巩膜生物力学强度均得到有效提高,眼球各组织无明显病理损害,微创核黄素-紫外线a巩膜胶原交联法可安全、有效地提高兔巩膜的生物力学强度,此外,交联组各组兔巩膜的交联效果会随交联后时间的增加而出现减弱。

关键词：生物力学微创核黄素紫外线a 巩膜胶原交联

核黄素联合紫外线a照射对血浆中伪狂犬病毒的灭活效果

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中国输血杂志 2007年第5期20卷 361-364页

作者：聂咏梅张晓敏周豪杰付涌水江朝富汪传喜陶黎阳张甜曹开源田小东广州血液中心广东广州510095 中山大学临床检验标准化研究中心

目的考察核黄素联合紫外线a对血浆中伪狂犬病毒的灭活效果。方法以伪狂犬病毒为模拟病毒,以Vero细胞为培养细胞,用病毒感染细胞,制备病毒增殖液;分别采用5、10、15及20J/cm2联合核黄素处理血浆,观察处理前后血浆病毒灭活的效果,筛选灭... 详细信息

目的考察核黄素联合紫外线a对血浆中伪狂犬病毒的灭活效果。方法以伪狂犬病毒为模拟病毒,以Vero细胞为培养细胞,用病毒感染细胞,制备病毒增殖液;分别采用5、10、15及20J/cm2联合核黄素处理血浆,观察处理前后血浆病毒灭活的效果,筛选灭活病毒合适的紫外线剂量;将含有伪狂犬病毒血浆的样本分为实验组:采用上述筛选的紫外线强度照射联合核黄素处理;对照组1:单独采用紫外线a照射;对照组2:单独采用核黄素处理;阴性对照组:未采用紫外线照射和核黄素处理;分别在实验前后采用96孔细胞病变法,对照细胞病变效应,根据Reed-Muench公式计算病毒滴度。结果采用不同强度的紫外线联合核黄素处理血浆,紫外线强度为15及20J/cm2的灭活血浆病毒的效果明显,处理后病毒滴度分别下降4.55和4.39logs;实验组和对照组1病毒滴度分别下降4.55和4.28logs,有统计学意义(P紫外线可灭活血浆中伪狂犬病毒,单独紫外线照射也具有灭活血浆伪狂犬病毒的效果;而仅单独采用核黄素处理而未联合紫外线照射,对血浆中伪狂犬病毒灭活效果不明显。

关键词：病毒灭活血浆核黄素紫外线a 模拟病毒伪狂犬病毒 Vero细胞