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趋化因子CCL11-糖胺聚糖GAGs-趋化因子受体CCR3的相互作用研究

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生物化学与生物物理进展 2023年

作者：李冠霖刘恒姮丁彦之李计强葛保胜中国石油大学(华东)化学工程学院生物工程与技术中心重质油国家重点实验室

目的：探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖GAGs相互作用过程及机制，为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供的理论参考。方法：利用基因工程技术，构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系，利用全内反射荧光成像（T... 详细信息

目的：探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖GAGs相互作用过程及机制，为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供的理论参考。方法：利用基因工程技术，构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系，利用全内反射荧光成像（Total Internal Reflection Fluorescence，TIRF）与等温滴定量热（Isothermal Titration Calorimetry，ITC）技术研究了不同体外溶液条件下GAGs与CCL11的相互作用，并利用趋化实验及活细胞单分子成像实验考察了GAGs-CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞趋化行为的调控及CCR3-EGFP在细胞膜上聚集状态的影响。结果：随着硫酸软骨素链长度的增加，其与CCL11结合放热增多，表明其相互作用力增强，其促进CCL11聚集作用增强。单分子荧光成像技术结合趋化试验研究发现，不同种类及不同比例的GAGs均会影响CCL11与CCR3的相互作用，GAGs的加入，抑制了CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞的趋化效应及促CCR3-EGFP聚集的能力，且随着硫酸软骨素分子量的增加，抑制作用显著增强。结论：GAGs的存在可以显著调控CCL11的聚集状态，进而影响其与受体CCR3的相互作用，本研究为进一步阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供了一定的实验基础。

关键词：趋化因子CCL11 趋化因子受体CCR3 趋化糖胺聚糖单分子成像

2种颜色仿刺参Apostichopus japonicus中糖胺聚糖表达谱的差异性研究

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中国海洋药物 2023年第2期42卷 1-9页

作者：韩青周涵王维雯黄曦玥陈刚陈四清于广利李国云中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室山东省糖科学与糖工程重点实验室医药学院山东青岛266003 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266237 青岛金海富源海洋实业有限公司山东青岛266075 中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071

目的基于液质联用和糖组学分析技术,比较2种颜色仿刺参中的糖胺聚糖(GAGs)组成,获得2种颜色仿刺参的糖胺聚糖表达谱,从而完善海参糖链表达谱信息,促进无脊椎动物的糖链组成研究。方法对2种颜色仿刺参进行脱脂和蛋白酶酶解处理,采用离子... 详细信息

目的基于液质联用和糖组学分析技术,比较2种颜色仿刺参中的糖胺聚糖(GAGs)组成,获得2种颜色仿刺参的糖胺聚糖表达谱,从而完善海参糖链表达谱信息,促进无脊椎动物的糖链组成研究。方法对2种颜色仿刺参进行脱脂和蛋白酶酶解处理,采用离子交换柱纯化以去除蛋白和高硫酸化聚糖等杂质并获得糖胺聚糖。采用GAGs酶解获得GAGs二糖并对其进行2-AMAC荧光标记,基于RP-C18-MS/MS-MRM方法进行GAGs表达谱差异分析。结果在2种颜色仿刺参中CS含量均最高,为2.5~4.5μg/g,HA含量次之,HS的含量最低。海参中GAGs总量远低于海参中岩藻糖基化硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯的含量,白色仿刺参的GAGs总量明显高于青色仿刺参。2种仿刺参中CS二糖以CS-0S、CS-4S、CS-6S为主,HS二糖主要是HS-NS6S和HS-TriS,但是两者在GAGs二糖含量、质量分数、硫酸化模式和硫酸化程度上均存在较大差异。结论首次获得2种颜色仿刺参糖胺聚糖表达谱信息,有助于了解2种颜色仿刺参来源内源性糖链结构信息,为海参活性成分的研究开发提供依据。

关键词：液质联用技术糖胺聚糖仿刺参差异性比较

糖胺聚糖化学交换饱和转移成像对软骨成分的定量研究进展

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国际医学放射学杂志 2019年第2期42卷 185-188,226页

作者：杨佳伟邵泓达诸静其汤光宇同济大学附属第十人民医院放射科上海200072

关节软骨进行性退变是骨关节炎(OA)主要特点,而软骨基质中糖胺聚糖(GAG)的过度降解和丢失是软骨退变中最早出现的代谢变化。常规影像检查对其不敏感,发现时OA多已到晚期且不可逆。GAG化学交换饱和转移成像(MR gagCEST)作为一种最新软骨... 详细信息

关节软骨进行性退变是骨关节炎(OA)主要特点,而软骨基质中糖胺聚糖(GAG)的过度降解和丢失是软骨退变中最早出现的代谢变化。常规影像检查对其不敏感,发现时OA多已到晚期且不可逆。GAG化学交换饱和转移成像(MR gagCEST)作为一种最新软骨成分定量成像技术,能实现对软骨GAG成分无创、准确的定量,在OA早期诊断和治疗监测方面具有良好应用前景。对MR gagCEST技术的原理、优缺点及在OA中的临床应用进行综述。

关键词：骨关节炎软骨磁共振成像磁共振糖胺聚糖化学交换饱和转移成像糖胺聚糖

天然生物质材料的制备、性质与应用(Ⅲ)——医护两用的糖胺聚糖:透明质酸

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日用化学工业 2022年第3期52卷 237-244页

作者：石晶冯云包杰樊建茹徐桂云范金石青岛科技大学海洋科学与生物工程学院山东青岛266042 青岛科技大学化学与分子工程学院山东青岛266042 青岛科技大学省部共建生态化工国家重点实验室培育基地山东青岛266042

透明质酸是一种广泛存在于生物体内的糖胺聚糖,具有保湿、抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、润滑关节、调节渗透压等多种生理功能。天然无毒、生物相容性优异、可生物降解的透明质酸具有独特的螺旋柱分子构型,且分子结构中含有可进行分子修饰... 详细信息

透明质酸是一种广泛存在于生物体内的糖胺聚糖,具有保湿、抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、润滑关节、调节渗透压等多种生理功能。天然无毒、生物相容性优异、可生物降解的透明质酸具有独特的螺旋柱分子构型,且分子结构中含有可进行分子修饰并赋予其更多更强功能性质的羟基、酰胺基、糖苷键等活性位点,作为一类重要生物活性物质,透明质酸及其衍生物、复合物、掺混物在医疗、化妆品、食品等领域已得到广泛应用。本文阐述了透明质酸的名称、结构和来源,以及理化性质、生理功能、制备方法和近期的应用进展情况,并指出了透明质酸的发展前景和研究方向。

关键词：透明质酸糖胺聚糖天然生物质材料制备性质应用化妆品

趋化因子CCL11-糖胺聚糖-趋化因子受体CCR3的相互作用研究

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生物化学与生物物理进展 2023年第11期50卷 2709-2720页

作者：李冠霖刘恒姮丁彦之李计强葛保胜中国石油大学(华东)化学工程学院生物工程与技术中心重质油国家重点实验室青岛266580

目的探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)相互作用过程及机制,为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供理论参考。方法利用基因工程技术,构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系,利用全内... 详细信息

目的探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)相互作用过程及机制,为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供理论参考。方法利用基因工程技术,构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系,利用全内反射荧光成像(total internal reflection fluorescence,TIRF)与等温滴定量热(isothermal titration calorimetry,ITC)技术研究了不同体外溶液条件下GAGs与CCL11的相互作用,并利用趋化实验及活细胞单分子成像实验考察了GAGs-CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞趋化行为的调控及CCR3-EGFP在细胞膜上聚集状态的影响。结果随着硫酸软骨素链长度的增加,其与CCL11结合放热增多,表明其相互作用力增强,其促进CCL11聚集作用增强。单分子荧光成像技术结合趋化试验研究发现,不同种类及不同比例的GAGs均会影响CCL11与CCR3的相互作用,GAGs的加入,抑制了CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞的趋化效应及促CCR3-EGFP聚集的能力,且随着硫酸软骨素分子质量的增加,抑制作用显著增强。结论 GAGs的存在可以显著调控CCL11的聚集状态,进而影响其与受体CCR3的相互作用,本研究为进一步阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供了一定的实验基础。

关键词：趋化因子CCL11 趋化因子受体CCR3 趋化糖胺聚糖单分子成像

基于液相色谱-质谱联用技术的2型糖尿病小鼠皮肤中糖胺聚糖表达谱分析

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药学学报 2021年第10期56卷 2841-2848页

作者：丁琅张昕李芹英王晨尚庆森蔡超李国云于广利中国海洋大学医药学院山东省糖科学与糖工程重点实验室海洋药物教育部重点实验室山东青岛266003 海洋药物与生物制品实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室山东青岛266237

2型糖尿病是一种常见的糖尿病,对于糖尿病患者而言,由于身体机能受损导致其伤口不能正常愈合,可能引起严重后果。糖胺聚糖(GAGs)广泛存在于皮肤组织中,由于其糖醛酸C6异构化和不同硫酸基取代,GAGs的结构较为复杂,目前尚未对糖尿病患者... 详细信息

2型糖尿病是一种常见的糖尿病,对于糖尿病患者而言,由于身体机能受损导致其伤口不能正常愈合,可能引起严重后果。糖胺聚糖(GAGs)广泛存在于皮肤组织中,由于其糖醛酸C6异构化和不同硫酸基取代,GAGs的结构较为复杂,目前尚未对糖尿病患者皮肤中GAGs的精细结构进行研究。本研究通过液相-质谱联用技术(LC-MS/MS)对链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病小鼠皮肤中GAGs精细结构进行表征。动物实验操作均遵循中国海洋大学动物伦理委员会的规定。结果表明,STZ-诱导型糖尿病小鼠皮肤中透明质酸(HA)含量显著低于正常组。糖尿病小鼠皮肤中硫酸软骨素(CS)和硫酸乙酰肝素(HS)含量与正常组虽然没有显著性差异,但是其二糖精细结构含量存在差异。糖尿病小鼠皮肤中CS-4S6S、HS-0S、HS-NS和HS-6S等二糖的表达均显著增多,HS-NS6S显著减少,另外,其HS的硫酸化程度也显著低于正常组。这些结果为糖尿病的病理机制的阐明及糖尿病患者伤口愈合敷料的开发提供了依据。

关键词：糖尿病糖胺聚糖液相色谱-质谱法皮肤

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菲律宾蛤仔糖胺聚糖的分离纯化及结构表征

食品研究与开发 2022年第15期43卷 31-37页

作者：詹雯琦刘淑集李水根蔡水淋路海霞王茵刘智禹福建师范大学福建福州350007 福建省水产研究所国家海水鱼类加工技术研发分中心(厦门) 福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心福建厦门361013 福建省海洋职业技术学校福建福州350000

为研究菲律宾蛤仔中糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)的结构特征,采用水酶法提取菲律宾蛤仔粗多糖,利用二乙胺基乙基纤维素-650M(diethylaminoethyl cellulose-650M,DEAE-650M)离子交换柱层析进行分离纯化后,通过紫外光谱(ultraviolet,UV)、红外光谱(infrared,IR)和核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)等方法对纯化后的菲律宾蛤仔GAG-1进行结构表征与分析。结果表明,采用水酶法提取的菲律宾蛤仔GAGs粗品,得率为1.04%。应用DEAE-650M离子交换柱层析分离纯化得到峰GAG-1和峰GAG-2。其中GAG-1的含量为89.56%,比粗品提高了82.43%,而GAG-2含量很低。紫外光谱分析结果表明,菲律宾蛤仔GAG-1中含微量核酸或蛋白质杂质;红外光谱分析表明GAG-1含有羧基、乙酰氨基、硫酸基等基团,其单体为吡喃型;1H-NMR和13C-NMR图谱分析结果显示GAG-1以β-D-Glc(1→4)-为主要连接方式。

关键词：菲律宾蛤仔糖胺聚糖分离纯化红外光谱核磁共振

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海洋动物来源糖胺聚糖生物活性研究进展

中国海洋药物 2022年第5期41卷 82-90页

作者：王培培张真庆迟连利于广利上海海洋大学食品学院海201306 中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室山东省糖科学与糖工程重点实验室医药学院山东青岛266003 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266237 苏州大学医学部药学院江苏苏州215123 山东大学山东省糖化学与生物学重点实验室山东青岛266200

糖胺聚糖具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、神经保护、调节肠道菌群及预防和治疗代谢性疾病等多种生物活性,在生物医药、功能食品及日化用品等领域具有广阔应用前景。我国海洋动物资源丰富,所含糖胺聚糖含量高且结构独特,是糖胺聚糖类... 详细信息

糖胺聚糖具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、神经保护、调节肠道菌群及预防和治疗代谢性疾病等多种生物活性,在生物医药、功能食品及日化用品等领域具有广阔应用前景。我国海洋动物资源丰富,所含糖胺聚糖含量高且结构独特,是糖胺聚糖类新药开发的重要资源。对海洋动物中糖胺聚糖的来源、结构特征、生物活性及潜在应用价值进行综述,以期为海洋动物来源糖氨聚糖的高值化利用提供科学依据。

关键词：海洋动物糖胺聚糖结构特征生物活性

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东北林蛙皮糖胺聚糖分析及其体外免疫活性

中成药 2022年第11期44卷 3728-3732页

作者：于奇郑冉张怡李波刘达李宜平焦丽丽长春中医药大学药学院吉林长春130117 长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

目的研究东北林蛙皮糖胺聚糖基础结构,并验证其体外免疫活性。方法采用水提醇沉法提取多糖,Sepharose^(TM) CL-6B凝胶柱分离纯化,对所得多糖进行分子量、单糖组成、红外光谱以及体外免疫活性考察。结果粗多糖DGP、纯化后多糖DGPA由甘露... 详细信息

目的研究东北林蛙皮糖胺聚糖基础结构,并验证其体外免疫活性。方法采用水提醇沉法提取多糖,Sepharose^(TM) CL-6B凝胶柱分离纯化,对所得多糖进行分子量、单糖组成、红外光谱以及体外免疫活性考察。结果粗多糖DGP、纯化后多糖DGPA由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖构成,摩尔比分别为0.30∶2.05∶0.17∶1∶0.23、0.41∶2.67∶0.16∶1∶0.25,后者分子量为141 kDa。纯化后,DGPA为糖胺聚糖。DGP、DGPA均可促进小鼠T、B淋巴细胞增殖,并能促进小鼠巨噬细胞吞噬功能及分泌NO、TNF-α能力。结论纯化后,东北林蛙皮多糖DGPA为糖胺聚糖,具有免疫调节活性,在同一质量浓度下比粗多糖DGP显示出更强的免疫激活作用。

关键词：东北林蛙皮糖胺聚糖体外免疫活性