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南京医科大学学报（自然科学版） 2023年第6期43卷 764-771页

作者：夏芷晴张紫晨付麒何云强杨涛孙敏南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029 盐城市第三人民医院内分泌科江苏盐城224000

目的:探讨精氨酸代琥珀酸合成酶⁃1(argininosuccinate synthetase 1,ASS1)对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:利用siRNA和慢病毒载体在胰岛β⁃TC6细胞中分别敲低和过表达ASS1;5⁃乙炔基⁃2′⁃脱氧尿嘧啶核苷(5⁃ethynyl⁃2′⁃deoxyu... 详细信息

目的:探讨精氨酸代琥珀酸合成酶⁃1(argininosuccinate synthetase 1,ASS1)对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:利用siRNA和慢病毒载体在胰岛β⁃TC6细胞中分别敲低和过表达ASS1;5⁃乙炔基⁃2′⁃脱氧尿嘧啶核苷(5⁃ethynyl⁃2′⁃deoxyuridine,EdU)和CCK⁃8检测细胞增殖能力;Annexin V⁃PI流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(terminal dUTP nick⁃end labeling assay,TUNEL)检测细胞凋亡水平;Western blot检测B细胞淋巴瘤⁃2(B⁃cell leukaemia⁃2,Bcl⁃2)蛋白、Bcl⁃2相关X蛋白(Bcl⁃2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase3)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶⁃3(cleaved Caspase⁃3)、凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)、细胞核增殖抗原(Ki67)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)的表达水平;RT⁃qPCR检测AIF、Ki67和mTOR mRNA水平。结果:①与对照相比,敲低ASS1后,胰岛β细胞EdU阳性率和CCK⁃8细胞增殖活力降低,TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率升高。胰岛β细胞内AIF表达量明显升高,Bax/Bcl⁃2比值下降,Caspase⁃3活性降低。②过表达ASS1后,TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率均较对照组降低,伴随胰岛β细胞内Ki67和mTOR表达量升高。但胰岛β细胞EdU阳性率和CCK⁃8细胞增殖活力无明显变化。结论:ASS1过表达可能激活mTOR信号通路促进胰岛β细胞增殖;ASS1表达降低时,胰岛β细胞可通过AIF途径启动细胞凋亡。ASS1可能在胰岛β细胞的增殖和凋亡中发挥一定调控作用。

关键词：精氨酸代琥珀酸合成酶胰岛β细胞增殖凋亡

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一氧化氮合成与尿素循环酶的关系:“瓜氨酸—一氧化氮循环”

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中国体育科技 2005年第5期41卷 130-131,140页

作者：王冰梅浙江林学院旅游与健康学院浙江临安311300

由于NO合成不是一条闭合环路,产物C it对反应存在负反馈调节,因此,只有在增加精氨酸供应的同时清除瓜氨酸,才能促进NO合成。“瓜氨酸—一氧化氮循环”是细胞内保持精氨酸补充与瓜氨酸清除处于动态平衡的途径。在小肠、肾、脾、脑、血管... 详细信息

由于NO合成不是一条闭合环路,产物C it对反应存在负反馈调节,因此,只有在增加精氨酸供应的同时清除瓜氨酸,才能促进NO合成。“瓜氨酸—一氧化氮循环”是细胞内保持精氨酸补充与瓜氨酸清除处于动态平衡的途径。在小肠、肾、脾、脑、血管平滑肌等肝外组织或细胞,虽然不存在完整的尿素循环,但存在尿素循环中的一些酶,如A S、AL,它们能将NO合成的终产物瓜氨酸重新合成精氨酸,供NO S再利用。一般来说,在生理状况下,除肝组织结构性表达丰富的A S、AL外,其他细胞只有微量的A S、AL活性,在受到免疫刺激的病理条件下,A S、AL可与iNO S共同表达,但其出现的时间、部位、程度不一。与肝实质细胞尿素循环的高效性和各酶连接的紧凑性相比,非肝细胞的“C it-NO cycle”是低效的,其低效性原因尚不可知,很可能对于大多数细胞来说,细胞外精氨酸提供了诱导性NO的大部分底物。

关键词：一氧化氮尿素循环酶瓜氨酸一氧化氮循环精氨酸代琥珀酸合成酶精氨酸代琥珀酸裂解酶

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