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dl-扁桃酸对精子质膜及顶体的完整性和线粒体膜电位的影响

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中国新药杂志 2015年第5期24卷 554-559页

作者：夏敏杰芦洁黄超职瑞娜李卫华丁训城上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032 复旦大学公共卫生学院上海200032

目的：研究dl-扁桃酸（dl-mandelic acid）的抑精作用及其机制。方法：dl-扁桃酸0.5-10.0g·L^-1处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪（computer assistant spermanalysis,CASA）测定精子活率、精子直线运动速率（VSL）、曲线运动... 详细信息

目的：研究dl-扁桃酸（dl-mandelic acid）的抑精作用及其机制。方法：dl-扁桃酸0.5-10.0g·L^-1处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪（computer assistant spermanalysis,CASA）测定精子活率、精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）;流式细胞（SYBR-14/PI）检测精子质膜完整性,采用FITC标记的豌豆凝集素荧光染色观察精子顶体完整性;FITC-PSA/PI/JC-1荧光染色检测精子线粒体膜电位变化。结果：随着dl-扁桃酸浓度的升高,精子活率与精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）显著降低,dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度（EC50）约为1.25 g·L^-1,最低有效浓度（MEC）约为2.5 g·L^-1。流式细胞仪检测表明,dl-扁桃酸对精子质膜完整性无影响。荧光染色检测表明,dl-扁桃酸处理组精子顶体受损,精子线粒体膜电位降低。结论：dl-扁桃酸通过影响精子顶体和降低线粒体膜电位,对精子起到抑制作用。

关键词： dl-扁桃酸精子质膜精子顶体线粒体膜电位

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亚甲蓝对精子运动及质膜完整性的影响

中华泌尿外科杂志 2012年第1期33卷 73-74页

作者：王会莫毅袁瑶蒋傲吴斌吴晓云施惠娟复旦大学上海200032 广西人口和计划生育研究中心上海市计划生育科学研究所

体外研究发现亚甲蓝（methyleneblue，MB）会抑制人精子的活力。为进一步研究MB对精子的毒性作用，我们通过低剂量MB与人精子共孵育2h的体外实验以及高剂量MB连续灌服大鼠14d的在体实验，观察MB对精子生成、精子活力以及精子质膜完整性... 详细信息

体外研究发现亚甲蓝（methyleneblue，MB）会抑制人精子的活力。为进一步研究MB对精子的毒性作用，我们通过低剂量MB与人精子共孵育2h的体外实验以及高剂量MB连续灌服大鼠14d的在体实验，观察MB对精子生成、精子活力以及精子质膜完整性的影响。

关键词：精子运动精子质膜亚甲蓝体外研究毒性作用在体实验体外实验精子生成

过氧化氢对山羊精子质膜功能完整性、顶体酶、获能以及核DNA的影响

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过氧化氢对山羊精子质膜功能完整性、顶体酶、获能以及核DNA的影响

作者：叶飞四川农业大学

学位级别：硕士

目的：过氧化氢能够调节精子获能，并且会影响精子的其他功能以及精子核DNA的完整性。本实验拟通过添加外源性过氧化氢，观察其对山羊精子顶体反应、顶体酶、精子膜完整性以及DNA损坏的影响，为过氧化氢影响精子功能的机制提供一定的理... 详细信息

目的：过氧化氢能够调节精子获能，并且会影响精子的其他功能以及精子核DNA的完整性。本实验拟通过添加外源性过氧化氢，观察其对山羊精子顶体反应、顶体酶、精子膜完整性以及DNA损坏的影响，为过氧化氢影响精子功能的机制提供一定的理论依据。方法：本实验主要通过检测精子顶体反应率、质膜功能完整性、顶体酶阳性率、活率以及核DNA损伤阳性率等5个指标来反映过氧化氢对精子部分功能的影响。实验共分为五部分，第一部分采用过氧化氢与上游法获得的优质精子共同体外孵育，来观察不同浓度的过氧化氢对精子上述前四个指标的影响;第二部分采用20μM浓度的过氧化氢与精子共同体外孵育，来观察添加过氧化氢后，孵育时间对精子上述指标的影响;第三部分利用试剂盒检测精液各成分中过氧化氢的去除剂——过氧化氢酶(CAT)的活性，通过去除精浆与添加CAT的实验从侧面证明过氧化氢对精子功能的影响;第四部分采用20μM浓度的过氧化氢与不同山羊个体的精子共同体外孵育，来判断过氧化氢对不同个体的精子是否有不同的影响;第五部分利用单细胞凝胶电泳实验检测不同过氧化氢浓度下对精子核DNA的影响，以及冰箱低温保存后复温精子核DNA损伤的情况。结果：1、当过氧化氢浓度在10μM和20μM之间，精子的脂膜功能完整性、顶体酶阳性率以及精子活率没有显著的改变(P＞0.05);而当添加20μM浓度的过氧化氢诱导精子获能的效果要极显著地高于其它浓度(P＜0.01)。当过氧化氢添加到50μM时，各个指标均显著下降，差异达到极显著水平(P＜0.01)。把过氧化氢的量最终加到100μM时，各个指标的值继续下降;2、精子在37℃下孵育后，弯尾率1h组与2h组相比，差异不显著(P＞0.05)。发生顶体反应的精子数量在第3h到达最大值，其它指标均在2h时达到最大值，并且弯尾率和活率在3～4h内比在2～3小时内下降的更快;3、山羊精液中含有CAT(过氧化氢酶)，在精浆和精子中分别是216.25±3.9455U／(10个／ml)和12.12±2.3293U／(10个／ml)。当把精液中的精浆去除以后精子各个指标均极显著下降(P＜0.01)。向精子中添加200IU的CAT时，可以极显著地提高各个指标(P＜0.01)。但是当CAT增加到400IU时，各个指标变化不明显;4、20μM的过氧化氢对不同的山羊个体影响差异不显著(P＞0.05);5、随着过氧化氢浓度的增加，精子核DNA损伤阳性率不断增加，当浓度达到50μM时，精子核DNA损伤率达到30％以上。经过冰箱低温保存的精子，其核DNA的损伤率随着保存时间的延长而逐渐增加，但增加幅度不明显(P＞0.05)。结论：低浓度的过氧化氢可以促进精子获能，对精子其它功能的作用不明显。高浓度的过氧化氢会显著地影响精子的功能;在一定范围内，过氧化氢酶能很好地保护精子。精浆作为一种天然的保护剂，对精子起到了很好的保护;低浓度的过氧化氢对身体健康、精液质量正常的公羊的精液影响效果一致;低温保存时间对精子核DNA影响不大，其前提是保存的精液的质量必须正常。

关键词：过氧化氢精子质膜顶体酶顶体反应 DNA损伤

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中药对男性不育症患者精子质膜的影响

中西医结合杂志 1990年第9期10卷 519-521页

作者：刘秀德李广义隋义壮山东省中医药研究所济南250011 山东中医学院附属医院

本文采用显微荧光定量和生物物理等技术方法,应用西德 OPTON 公司制造的 SMP-05型紫外显微分光光度计,对男性不育症患者和正常有生育力成年男性精子膜表面麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin,缩写 WGA)受体和精子膜蛋白质大分子对(I-Anil... 详细信息

本文采用显微荧光定量和生物物理等技术方法,应用西德 OPTON 公司制造的 SMP-05型紫外显微分光光度计,对男性不育症患者和正常有生育力成年男性精子膜表面麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin,缩写 WGA)受体和精子膜蛋白质大分子对(I-Anilinonaph thalene-8-Suphonic acid salt,简称1,8-ANS)的荧光偏振度(P)及荧光强度(Ⅰ)进行了定量研究,结果发现:患者精子膜表面麦胚凝集素受体低下(P精子膜蛋白质大分子疏水区1,8-ANS 荧光强度过强(P精子膜表面 WGA 受体明显增加,1,8-ANS 荧光强度接近正常。提示:中药对精子质膜 WGA受体及质膜蛋白质大分子结构有一定影响。

关键词：中药男性不育症精子质膜

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棉酚甲酸对金鱼精子质膜的影响

生物物理学报 1990年第3期6卷 374-377页

作者：管汀鹭赵南明中国科学院发育生物学研究所清华大学生物科学与技术系

利用冷冻断裂-蚀刻制样技术,在超微结构水平上研究了棉酚甲酸对金鱼精子质膜内蛋白颗粒排列图式(包括晶格区)的影响.结果表明,棉酚甲酸能够使金鱼精子质膜内蛋白颗粒分布不匀:或者颗粒聚集成团,或者质膜内出现无颗粒区域;并且还能使质... 详细信息

利用冷冻断裂-蚀刻制样技术,在超微结构水平上研究了棉酚甲酸对金鱼精子质膜内蛋白颗粒排列图式(包括晶格区)的影响.结果表明,棉酚甲酸能够使金鱼精子质膜内蛋白颗粒分布不匀:或者颗粒聚集成团,或者质膜内出现无颗粒区域;并且还能使质膜内特定部位晶格区的颗粒排列发生混乱.这些变化表明棉酚甲酸能使精子质膜的有序性降低,也即增加了质膜的流动性.

关键词：金鱼精子质膜棉酚甲酸