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人类精子冷冻保存中交叉污染的风险及防范

中华男科学杂志 2010年第1期16卷 55-59页

作者：吴颖姚康寿浙江省计划生育科学技术研究所浙江杭州310012

精子的冷冻已在世界范围内得到广泛应用,但是对于保存的精子是否会受到液氮中病原体的污染报道较少。尽管在精子和胚胎的冷冻保存过程中,发生交叉污染的机会很小,但仍是一个实际存在的风险。对于人类精子库来说,应在工作的所有环节,包... 详细信息

精子的冷冻已在世界范围内得到广泛应用,但是对于保存的精子是否会受到液氮中病原体的污染报道较少。尽管在精子和胚胎的冷冻保存过程中,发生交叉污染的机会很小,但仍是一个实际存在的风险。对于人类精子库来说,应在工作的所有环节,包括精液的收集、冷冻、储存、运输、解冻以及对冻精的临床使用过程都应采取相应的措施来减少污染。

关键词：精子冷冻液氮交叉污染

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两种冷冻保护剂对精子冷冻保护的效果比较

上海第二医科大学学报 2005年第3期25卷 318-319页

作者：向祖琼胡明广曹文雷李铮郑菊芬王益鑫上海第二医科大学仁济医院上海男科学研究所上海200001 大连妇产科医院生殖中心

精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻... 详细信息

精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻保护剂(egg yolk-citrate medium, ECM),另外如含有人血清白蛋白(HSA)及HEPES的冷冻保护剂(human sperm preservation medium, HSPM).此前有学者[1]研究表明,ECM对精子冷冻的保护效果略差于HSPM.由于我们沿用的是自制ECM型的冷冻保护剂,因此,我们拟通过比较本所自制的ECM与商品化的HSPM,来探讨这两种冷冻保护剂的对精子的保护效果.已有研究[2]证实,精子的活动率和活力与精子的生育力明显相关,所以我们采用的比较参数是应用两种冷冻保护液后,其冻融精子活动率、活力及复苏率的变化.

关键词：冷冻保护剂效果比较精子冷冻甘油 ECM 不同类型单纯卵黄精液冷冻复合型

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不同稀释液对香港牡蛎精子冷冻的保存效果

水生态学杂志 2013年第3期34卷 67-74页

作者：丁兆坤朱豪磊杨春玲陈秀荔彭敏蒋伟明李咏梅广西大学水产科学研究所南宁530004 广西遗传育种与健康养殖重点实验室广西水产研究所南宁530021

分别以生理盐水、柠檬酸钠-甘氨酸液、海水、KCl-NaCl溶液、Hank's液、D-Hank's液为稀释液,不同浓度二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)及海藻糖为抗冻剂,研究超低温冷冻保存香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)精子方法及不同浓度含... 详细信息

分别以生理盐水、柠檬酸钠-甘氨酸液、海水、KCl-NaCl溶液、Hank's液、D-Hank's液为稀释液,不同浓度二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)及海藻糖为抗冻剂,研究超低温冷冻保存香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)精子方法及不同浓度含氨海水对复苏精子的激活效果,以筛选出最适宜精子冷冻保存的稀释液和抗冻剂及其浓度。结果显示,柠檬酸钠-甘氨酸液为稀释液复苏后精子成活率最高,为(82.90%±0.19%);其次是生理盐水(77.57%±0.49%)、D-Hank's液(72.22%±0.36%)、Hank's液(70.00%±0.28%)。氨海水终浓度为0.0313%时,复苏后精子活力最强,柠檬酸钠-甘氨酸溶液为稀释液精子活力为(61.25%±3.06%),生理盐水为稀释液精子活力为(68.70%±0.74%)。以生理盐水为稀释液、DMSO浓度为14%冷冻保存时,复苏精子存活率最高,含海藻糖精子存活率为(86.91%±3.14%),不含海藻糖精子存活率为(81.81%±3.68%),以柠檬酸钠-甘氨酸液为稀释液、DMSO浓度为12%时,复苏后精子存活率最高,含海藻糖的为(79.62%±1.95%),不含海藻糖的为(70.58%±2.41%)。

关键词：香港牡蛎稀释液精子冷冻

4种渗透性抗冻剂对暗色唇鱼精子冷冻保存的影响

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水生态学杂志 2012年第5期33卷 88-93页

作者：王晓爱杨君兴陈小勇潘晓赋李再云中国科学院昆明动物研究所遗传资源与进化国家重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

4℃冷冻保存条件下,以冷冻精子活力、寿命和细胞膜完整率为指标,检测二甲亚砜(DMSO)、甘油(Glycerol)、乙二醇(EG)和甲醇(MeOH)4种渗透性抗冻剂对暗色唇鱼(Semilabeo obscurus)鲜精以及对精子冷冻保存效果的影响。结果显示,4种渗透性抗... 详细信息

4℃冷冻保存条件下,以冷冻精子活力、寿命和细胞膜完整率为指标,检测二甲亚砜(DMSO)、甘油(Glycerol)、乙二醇(EG)和甲醇(MeOH)4种渗透性抗冻剂对暗色唇鱼(Semilabeo obscurus)鲜精以及对精子冷冻保存效果的影响。结果显示,4种渗透性抗冻剂对鲜精活力呈负作用,MeOH冷冻保存,5%MeOH和5%EG解冻后暗色唇鱼精子活力最高,分别为(18.33±1.70)%和(17.83±2.67)%,与鲜精活力差异显著(P精子寿命最长,分别为(44.3±3.6)s和(42.8±5.5)s,5%MeOH解冻后精子寿命与鲜精寿命差异不显著(P>0.05);5%MeOH解冻后精子细胞膜完整率最高,为(85.67±1.11)%,与鲜精细胞膜完整率无显著差异(P>0.05)。研究表明,DMSO和Glycerol并不适合作为暗色唇鱼精子冷冻的抗冻剂,MeOH和EG具有相似的保护作用,是暗色唇鱼精子冷冻保存潜在的渗透性抗冻剂。

关键词：渗透性抗冻剂暗色唇鱼精子冷冻

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稀少精子冷冻研究进展

中华男科学杂志 2013年第8期19卷 753-757页

作者：陈春华沙艳伟李萍厦门市妇幼保健院生殖医学中心福建厦门361005

精子冷冻是人类辅助生殖领域中日益成熟的技术,但是常规精子冷冻方案却不适用于稀少精子冷冻,解决稀少精子冷冻技术将在很大程度上改善临床治疗少、弱精子症和无精子症患者的不育问题。寻找合适冷冻载体是目前稀少精子冷冻的研究重点之... 详细信息

精子冷冻是人类辅助生殖领域中日益成熟的技术,但是常规精子冷冻方案却不适用于稀少精子冷冻,解决稀少精子冷冻技术将在很大程度上改善临床治疗少、弱精子症和无精子症患者的不育问题。寻找合适冷冻载体是目前稀少精子冷冻的研究重点之一,本文就近年来稀少精子不同载体冷冻方法:空卵膜载体冷冻法、微滴冷冻法、其他微型载体冷冻法和睾丸组织冷冻以及睾丸精子和附睾精子的冷冻效果作一综述。

关键词：精子冷冻空卵膜玻璃化冷冻睾丸组织

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小鼠精子冷冻及冻融精子体外受精研究

黑龙江畜牧兽医 2018年第3期 223-225,262页

作者：罗林吴梦兰国成梁浩葛良鹏重庆市畜牧科学院养猪科学重庆市市级重点实验室农业部养猪科学重点实验室

为了探索一种高效的小鼠精子冷冻方法,试验利用棉籽糖和脱脂奶粉作为冷冻保护剂进行精子冷冻保存,然后再通过精子复苏、体外受精试验,比较冷冻保存复苏后的精子与新鲜精液中精子在受精卵率、2-细胞率、囊胚率方面的差异。结果表明:本方... 详细信息

为了探索一种高效的小鼠精子冷冻方法,试验利用棉籽糖和脱脂奶粉作为冷冻保护剂进行精子冷冻保存,然后再通过精子复苏、体外受精试验,比较冷冻保存复苏后的精子与新鲜精液中精子在受精卵率、2-细胞率、囊胚率方面的差异。结果表明:本方法冻存的精子受精率为70.3%,2-细胞率为58.3%,囊胚率为41.7%,与新鲜精液相比差异不显著(P>0.05)。说明本方法适用于小鼠精子冻存。

关键词：小鼠精子冷冻体外受精冷冻保护剂精子复苏

不同卵黄成分、大豆卵磷脂及β-环糊精胆固醇对马精子冷冻效果的影响

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中国畜牧兽医 2016年第9期43卷 2435-2440页

作者：毋状元罗永明董红霍飞郑新宝于伟浩徐文慧陈静波新疆畜牧科学院畜牧研究所乌鲁木齐830011 昭苏县畜牧兽医局昭苏835600

本研究旨在比较添加不同浓度的卵黄成分(全卵黄(EY)、卵黄浆蛋白(EYP)、低密度脂蛋白(LDL)及水溶性卵黄蛋白(livetin))、大豆卵磷脂(SL)及β-环糊精胆固醇(CLC)对马精子冷冻效果的影响。选择4匹成年英纯血种公马进行采精,试验1:以INRA82... 详细信息

本研究旨在比较添加不同浓度的卵黄成分(全卵黄(EY)、卵黄浆蛋白(EYP)、低密度脂蛋白(LDL)及水溶性卵黄蛋白(livetin))、大豆卵磷脂(SL)及β-环糊精胆固醇(CLC)对马精子冷冻效果的影响。选择4匹成年英纯血种公马进行采精,试验1:以INRA82+3.5%的混合抗冻剂作为基础冷冻液,添加0、2%、4%和8%浓度的EY、LDL、EYP或水溶性卵黄蛋白;试验2:以4%全卵黄组为对照,添加1%、2%和4%SL;试验3:在INRA82+3.5%的混合抗冻剂+4%EY基础液中添加0、0.75、1.5和3mg/mL浓度的CLC。结果显示,EYP、LDL及水溶性卵黄蛋白3种卵黄组分均对马精子冷冻具有显著保护作用(P0.05);添加低浓度(1%)的SL精子冻融后活力与对照组(4%EY组)相比无显著差异(P>0.05),但添加高浓度SL组(2%和4%)冻融后精子TM、PM及RAP值均显著低于对照组(P精子活力与未添加组无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,卵黄中EYP、LDL和水溶性卵黄蛋白均对精子保护有效,保护效果与EY无显著差异;1%SL可获得与卵黄相似的保护效果;在含有卵黄的基础冷冻液中添加CLC未能提高精子冻后活力。

关键词：卵黄低密度脂蛋白(LDL) 大豆卵磷脂 β-环糊精胆固醇(CLC) 马精子冷冻

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捐精者精子冷冻复苏率影响因素分析

中华男科学杂志 2014年第6期20卷 523-526页

作者：周梁张洲师娟子刘小华施文浩寇卉宋娟陕西省妇幼保健院人类精子库陕西西安710003 陕西省妇幼保健院生殖中心陕西西安710003

目的:探讨季节、血型及精液参数等对捐精者精子冷冻复苏率的影响。方法:回顾性分析陕西省人类精子库捐精者4 088份精液标本,研究季节、血型、禁欲时间、精液量、精子形态、冷冻前精子活力及浓度对精子冷冻复苏率的影响。结果:捐精者精... 详细信息

目的:探讨季节、血型及精液参数等对捐精者精子冷冻复苏率的影响。方法:回顾性分析陕西省人类精子库捐精者4 088份精液标本,研究季节、血型、禁欲时间、精液量、精子形态、冷冻前精子活力及浓度对精子冷冻复苏率的影响。结果:捐精者精子冷冻复苏率随着精子浓度增高而增加,相关性分析提示精子浓度与冷冻复苏率呈正相关(r=0.247,P精子冷冻前活力和精子冷冻复苏率呈负相关(r=-0.262,P精子冷冻复苏率[(70.2±5.4)%]明显高于其他禁欲时间组(P精子正常形态率>20%组的精子冷冻复苏率[(71.4±5.1)%]要高于其他各组(P精子冷冻复苏率明显高于B型血[(69.1±4.8)%vs(69.8±4.7)%,P精子冷冻复苏率之间无明显相关性(P>0.05)。结论:捐精者的精子浓度、活力、形态及禁欲时间对于预测精子冷冻复苏率有一定的价值,而季节、血型、精液量与捐精者精子冷冻复苏率无明显相关性。

关键词：精子精子库精子冷冻精子冷冻苏率

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哺乳动物精子冷冻工艺中防冻剂的研究进展

中国畜牧兽医 2010年第11期37卷 123-127页

作者：平述煌杨世华昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650224

精子冷冻是一种简单、经济、高效的生物遗传资源保存方法,目前已经应用到许多领域,并成为治疗人类不育、牲畜繁殖和生物资源多样性保护的重要手段。在精子冷冻保存过程中的适当阶段加入防冻剂,能够有效的避免或减少精子的冷冻损伤和寒害... 详细信息

精子冷冻是一种简单、经济、高效的生物遗传资源保存方法,目前已经应用到许多领域,并成为治疗人类不育、牲畜繁殖和生物资源多样性保护的重要手段。在精子冷冻保存过程中的适当阶段加入防冻剂,能够有效的避免或减少精子的冷冻损伤和寒害,从而提高冷冻—解冻精子的活力。作者就防冻剂的种类、防冻剂的选择及加入与去除的方式对冷冻—解冻哺乳动物精子活力的影响作一简要综述。

关键词：哺乳动物精子冷冻防冻剂精子活力