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小鼠结肠粘液屏障随增龄功能减退机制研究

小鼠结肠粘液屏障随增龄功能减退机制研究

作者：桑雪芹甘肃农业大学

学位级别：硕士

衰老相关的肠道疾病的发病率逐年增加,而肠道粘液屏障的保护功能缺陷与结肠炎症发病密切相关,粘液屏障有望成为膳食干预延缓肠道衰老的新靶点,但衰老过程中粘液屏障功能的变化机制尚不明确。利用自然衰老小鼠模型探究了结肠粘液屏障功... 详细信息

衰老相关的肠道疾病的发病率逐年增加,而肠道粘液屏障的保护功能缺陷与结肠炎症发病密切相关,粘液屏障有望成为膳食干预延缓肠道衰老的新靶点,但衰老过程中粘液屏障功能的变化机制尚不明确。利用自然衰老小鼠模型探究了结肠粘液屏障功能随增龄的变化机制,为通过饮食干预调控结肠粘液屏障功能从而延缓肠道衰老提供了一定的理论依据。本研究的主要结果如下:1.利用2、12、18和24月龄雄性C57BL/6J自然衰老小鼠,用异硫氰酸荧光素葡聚糖通透性实验发现常规饲料喂养的小鼠结肠组织通透性随增龄增加,说明小鼠结肠屏障功能在增龄过程中受损;利用原位杂交荧光染色实验探究结肠粘液屏障随增龄的变化,结果发现结肠粘液层抵御微生物侵袭能力下降,微生物与肠道上皮细胞之间的距离缩短,表明结肠粘液屏障完整性破坏;通过16S r RNA基因测序技术验证粘液微生物侵袭,结果显示24月龄时小鼠结肠粘液层微生物群落多样性发生改变,其中有益菌乳酸杆菌属丰度显著减少,嗜粘蛋白阿克曼菌属丰度显著增加,表明结肠粘液层屏障保护功能在自然衰老过程中受损。2.确定了衰老过程中结肠粘液层屏障功能受损的原因。通过单位长度粘液重量、粘液含水量和粘液干物质含量等分析,发现小鼠随着年龄的增加其结肠粘液单位长度重量增加、粘液含水量减少、粘液干物质含量增加,说明衰老过程中结肠粘液成分发生改变;通过免疫染色和冷冻扫描电镜对粘液主要成分粘蛋白Mucin2含量和微观结构进行观察,结果显示24月龄小鼠Mucin2粘蛋白含量下降,衰老过程中粘蛋白微观网络结构孔隙减小。以上结果说明衰老过程中粘蛋白含量和结构的变化是引起小鼠结肠粘液层屏障功能受损的主要原因。3.阐明了自然衰老小鼠结肠粘液屏障功能的变化机制。通过免疫染色和实时荧光定量PCR技术对粘蛋白含量和结构进行探究,结果显示负责分泌粘蛋白的肠上皮杯状细胞数量在衰老过程中未发生改变,而杯状细胞占隐窝细胞总数的比例显著下降,说明杯状细胞分泌粘蛋白的能力下降;同时,杯状细胞中参与粘蛋白核心结构形成和糖链修饰的糖基化转移酶的表达随着年龄的增加而降低,导致粘蛋白葡聚糖链缩短,粘液微观结构发生改变,进而导致结肠粘液屏障功能受损。综上所述,本研究明确了自然衰老过程中结肠粘液层屏障功能受损,阐释了糖基化转移酶、杯状细胞和粘蛋白在维持结肠粘液的理化性质和肠道内环境稳定中的重要性,揭示了衰老过程中结肠粘液屏障功能的受损机制,为通过膳食干预调控粘液屏障功能从而延缓肠道衰老提供潜在的作用靶点。

关键词：衰老粘液糖基化酶杯状细胞

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滑菇洗脱粘液促伤口愈合研究

滑菇洗脱粘液促伤口愈合研究

作者：邹天舒吉林农业大学

学位级别：硕士

滑菇(Pholiota nameko),一种食用和药用真菌,鳞伞属,又名滑子蘑、光帽黄伞、珍珠菇。目前在中国和日本广泛种植食品和传统药物。滑菇得到广泛的栽培,成为常见的食用菌类,其菌盖具有粘滑性质,是一种较为典型的木腐菌,具有多种生物活性,... 详细信息

滑菇(Pholiota nameko),一种食用和药用真菌,鳞伞属,又名滑子蘑、光帽黄伞、珍珠菇。目前在中国和日本广泛种植食品和传统药物。滑菇得到广泛的栽培,成为常见的食用菌类,其菌盖具有粘滑性质,是一种较为典型的木腐菌,具有多种生物活性,如抗炎、抗高血脂和抗肿瘤活性。随着滑菇产业规模的扩大,产生的副产物(滑菇洗脱粘液)也不断增多,而这些副产物往往得不到最大效能应用,且对环境具有一定污染作用。针对这一问题,本论文合理利用滑菇洗脱粘液中的多糖、蛋白、核酸等成分,变废为宝,减少污染的同时合理利用洗脱粘液,将其制备成伤口敷料,探究其对伤口愈合的影响。主要研究结果如下:1、滑菇洗脱粘液敷料的制备和成分表征:以滑菇为原料,通过洗脱洗去滑菇表面的粘液,对粘液进行冻干和烘干处理,得到滑菇洗脱粘液伤口敷料。冻干和烘干敷料的总糖含量分别为43.2%和28.9%。对其单糖组成、氨基酸的种类和含量检测结果表明,除精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸,烘干粉末的其它氨基酸含量均高于冻干粉末;烘干敷料中额外检测出鼠李糖,冻干敷料额外检测出半乳糖醛酸。2、滑菇洗脱粘液敷料的抗氧化活性评估:分别以DPPH、过氧化氢,超氧阴离子和羟基自由基为指标,对滑菇洗脱粘液的抗氧化活性进行评估,结果表明:在5 mg/m L时,冻干和烘干敷料对DPPH的清除率分别为46.50%和43.75%,对超氧阴离子自由基的清除率分别为71.68%和68.42%,对羟基自由基的清除效率分别为54.63%和51.22%,而在1 mg/m L时,对HO的清除效率达到最高,分别是92.75%和91.75%。3、滑菇洗脱粘液敷料促细胞增殖和迁移能力评估:通过细胞存活率和Ed U增殖实验评估冻干和烘干敷料对小鼠成纤维细胞(NIH/3T3)的增殖能力,结果表明二者均可促进细胞增殖,增殖率分别为156.65%和146.18%。细胞划痕实验评估经冻干和烘干敷料处理后NIH/3T3细胞迁移率分别为和156.2%和144.73%。4、滑菇洗脱粘液敷料促伤口愈合能力评估:利用小鼠皮肤伤口模型评估滑菇洗脱粘液的促伤口愈合能力。实验结果表明,3天时小鼠创伤部位炎症因子TNF-α和IL-6的表达水平降低。治疗结束后,HE染色、MASSON染色和CD31荧光图像分析表明滑菇洗脱粘液可通过促进皮肤创面下毛囊附属物、毛细血管再生,肉芽组织、胶原组织的重构促进皮肤伤口愈合。综上,滑菇洗脱粘液可通过促进细胞增殖和迁移、降低炎症反应加速伤口愈合。

关键词：滑菇粘液抗氧化活性伤口愈合废弃物

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粘液繁殖体及其生态功能

生态学杂志 2006年第11期25卷 1400-1404页

作者：马君玲刘志民中国科学院沈阳应用生态研究所

对粘液繁殖体的概念、粘液性质、粘液繁殖体的研究现状及粘液繁殖体研究中存在的问题进行了论述。分布在干旱区的十字花科、爵床科、菊科等植物具有粘液繁殖体。有关粘液繁殖体的研究集中在具有粘液繁殖体植物的识别、粘液形态结构及成... 详细信息

对粘液繁殖体的概念、粘液性质、粘液繁殖体的研究现状及粘液繁殖体研究中存在的问题进行了论述。分布在干旱区的十字花科、爵床科、菊科等植物具有粘液繁殖体。有关粘液繁殖体的研究集中在具有粘液繁殖体植物的识别、粘液形态结构及成分、粘液溶出机制及过程、粘液繁殖体的生态功能等几个方面。尽管已有研究表明,粘液繁殖体具有促进种子远距离传播、促进繁殖体的萌发及苗的发育、使种子免受摩擦损害和动物捕食等生态功能,但目前人们对粘液繁殖体的生态意义尚不十分清楚,从多物种比较研究中阐明粘液繁殖体生态意义的研究尚很少见。继续识别具有粘液繁殖体的植物,改善现有的研究手段,加强粘液繁殖体对植被恢复价值的研究是目前粘液繁殖体研究面临的挑战。

关键词：粘液繁殖体干旱区生态功能

子宫颈腺癌间质侵袭与小肠粘液抗原阳性淋巴结转移的关系

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中华病理学杂志 1995年第3期24卷 168-169页

作者：马中民王美清王维屏山东医科大学病理学教研室山东省立医院病理科

运用小肠粘液革抗（ＳＩＭＡ）免疫组化染色，观察４４例官颈腺癌中粘液间质侵袭与肿瘤淋巴结转移的关系及原发灶与转移灶内肿瘤细胞ＳＩＭＡ着色强度的对比。结果显示：宫颈腺癌中ＳＩＭＡ间质侵袭程度愈重则肿瘤淋巴结内转移的可能性... 详细信息

运用小肠粘液革抗（ＳＩＭＡ）免疫组化染色，观察４４例官颈腺癌中粘液间质侵袭与肿瘤淋巴结转移的关系及原发灶与转移灶内肿瘤细胞ＳＩＭＡ着色强度的对比。结果显示：宫颈腺癌中ＳＩＭＡ间质侵袭程度愈重则肿瘤淋巴结内转移的可能性愈大；肿瘤原发灶与转移灶内肿瘤细胞ＳＩＭＡ着色强度无明显差异。推测粘液间质侵袭是造成宫颈腺癌淋巴结内转移的重要原因；产生粘液的瘤细胞与非粘液产生的瘤细胞克隆，在淋巴结转移这一生物学特性上差别不大。

关键词：子宫颈肿瘤粘液转移

柱前衍生化气相色谱法分析豌豆根尖粘液中的多糖

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分析化学 2009年第3期37卷 429-432页

作者：吴韶辉蔡妙珍李似姣朱美红王江锋浙江师范大学化学与生命科学学院

采用三氟乙酸水解豌豆根尖粘液中的多糖,衍生化后用气相色谱分离测定6种单糖。实验表明,根尖粘液用三氟乙酸水解并乙酰化,采用OV-17石英毛细管色谱柱(35m×0.32mm,0.33μm),利用气相色谱法对6种单糖进行分离测定,6种糖全部达到基线分离... 详细信息

采用三氟乙酸水解豌豆根尖粘液中的多糖,衍生化后用气相色谱分离测定6种单糖。实验表明,根尖粘液用三氟乙酸水解并乙酰化,采用OV-17石英毛细管色谱柱(35m×0.32mm,0.33μm),利用气相色谱法对6种单糖进行分离测定,6种糖全部达到基线分离,总分析时间为42min。用保留时间定性,外标法定量。方法线性范围为0.0025～2.5g/L,各标准曲线相关系数r>0.9991;检出限0.0216～0.1578mg/L,加样回收率为96.7%～107.4%。实验结果表明,本方法可有效测定逆境胁迫下植物根尖粘液中的糖类物质。

关键词：粘液多糖柱前衍生气相色谱

入侵植物北美车前种子粘液的吸水特性及其对干旱胁迫的萌发响应

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生态学杂志 2015年第8期34卷 2155-2160页

作者：罗辉闫小红周兵王宁杨佳琴井冈山大学医学院井冈山大学生命科学学院

北美车前（Plantago virginica）是中国南方广泛分布的一种入侵植物。为探讨北美车前种子的休眠萌发特性及种子粘液对其种子在干旱环境中萌发的作用,在室内控制条件下研究了其种子在收获后不同月份的萌发状况、粘液的吸水失水特性、有... 详细信息

北美车前（Plantago virginica）是中国南方广泛分布的一种入侵植物。为探讨北美车前种子的休眠萌发特性及种子粘液对其种子在干旱环境中萌发的作用,在室内控制条件下研究了其种子在收获后不同月份的萌发状况、粘液的吸水失水特性、有粘液种子和无粘液种子在不同渗透胁迫条件下的萌发状况。结果表明：北美车前种子有近1个月的休眠期,成熟后第2~9个月保持较高的种子萌发率（48.75%~88.75%）;北美车前有粘液种子对水分的吸收能力明显强于无粘液种子,粘液可吸收其干质量近59倍的水量;在-1.21~0 MPa渗透势胁迫下,与对照相比,有粘液种子萌发率只下降了18.58%,无粘液种子萌发率下降了62.71%;可见,北美车前种子休眠期短,萌发率高,种子粘液有较强的吸水能力,有利于种子对干旱环境的适应,从而间接增强了其入侵性。

关键词：北美车前萌发粘液吸水干旱胁迫

油酸对消炎痛引起的胃粘膜损伤大鼠胃粘液分泌的影响

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生理学报 1985年第6期37卷 532-538页

作者：杨素娟郭燕世军事医学科学院北京医科大学基础医学研究所进修人员消化生殖生理研究室

本工作研究油酸对消炎痛引起胃粘膜损伤大鼠胃粘液分泌的影响。胃粘液测定采用阿尔新蓝(Alcian blue)与胃液中糖蛋白结合的方法。将1.0ml 油酸注入到结扎幽门的大鼠空肠内,就可引起胃壁粘液及游离粘液分泌量的明显增加。以0.25、0.5和1.... 详细信息

本工作研究油酸对消炎痛引起胃粘膜损伤大鼠胃粘液分泌的影响。胃粘液测定采用阿尔新蓝(Alcian blue)与胃液中糖蛋白结合的方法。将1.0ml 油酸注入到结扎幽门的大鼠空肠内,就可引起胃壁粘液及游离粘液分泌量的明显增加。以0.25、0.5和1.0ml 油酸注入到不结扎幽门的大鼠空肠内,也能显著增加胃壁粘液分泌,保护胃粘膜。这两种作用表现着剂量依赖关系。不论以油酸灌胃或注入空肠、回肠,都能明显增加胃壁粘液量,而灌胃的作用比注入肠内更明显。以1.0ml 30%甘油、0.1%乙酸及1/15N HCl 分别注入空肠,都不能刺激胃壁粘液的分泌。上述结果表明,油酸具有刺激胃粘液分泌的作用。因此,加强胃粘液分泌可能对粘膜起到屏障作用,这是油酸保护胃粘膜损伤的机制之一。

关键词：油酸粘液阿尔新蓝消炎痛细胞保护作用

河流弧菌(Vibrio fluvialis)对牙鲆(Paralichthys olivaceus)粘液的趋化和粘附作用

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海洋与湖沼 2008年第4期39卷 362-367页

作者：鄢庆枇邹文政纪荣兴义家波集美大学水产学院福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室厦门361021

采用生长曲线法测定了河流弧菌在牙鲆表皮、鳃和肠粘液中的生长情况,结果表明,河流弧菌在3种粘液中都能生长,生长前期符合Logistic模型,然后进入Gompertz模型,在鳃粘液中的生长量高于肠粘液和表皮粘液。采用毛细管法研究了河流弧菌对牙... 详细信息

采用生长曲线法测定了河流弧菌在牙鲆表皮、鳃和肠粘液中的生长情况,结果表明,河流弧菌在3种粘液中都能生长,生长前期符合Logistic模型,然后进入Gompertz模型,在鳃粘液中的生长量高于肠粘液和表皮粘液。采用毛细管法研究了河流弧菌对牙鲆3种粘液的趋化作用,结果表明,河流弧菌对牙鲆3种粘液具有较强的趋化应答,在粘液总蛋白含量相同的情况下,河流弧菌对牙鲆鳃粘液的趋化应答显著强于对表皮粘液的趋化应答(P粘液的趋化应答极显著低于对鳃粘液和表皮粘液的趋化应答(P粘液的粘附作用研究,结果表明,河流弧菌对牙鲆表皮粘液和鳃粘液的粘附率较高,而对肠粘液的粘附率较低,特别是孵育30、60和90min时河流弧菌对牙鲆表皮粘液和鳃粘液的粘附率显著高于对肠粘液的粘附率(P粘液,尤其是鳃粘液中生长和定植,有利于其进一步感染、致病。

关键词：河流弧菌牙鲆粘液趋化作用粘附作用

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粘液—重碳酸盐屏障

生理科学进展 1991年第1期22卷 47-50页

作者：徐光尧安徽医科大学