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贵州药讯 1990年第1期 45-47页

作者：王用平赵黄瑞

粗茎秦艽与西藏秦艽(龙胆科)种间的形态学、染色体与分子界定

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植物分类学报 2006年第6期44卷 627-640页

作者：张小兰葛学军刘建全袁永明中国科学院华南植物园广州510650 中国科学院西北高原生物研究所青藏高原生物进化与适应实验室西宁810001 北京师范大学生命科学学院北京100875

粗茎秦艽GentianacrassicaulisDuthieexBurk和西藏秦艽***.f.的主要区别是前者花冠小、檐部蓝色,后者花大、檐部紫褐色;但二者在西藏东南部地区的形态界限不清楚,具有较多的中间形态过渡类型。本文以该地区居群作为主要研究对象,并以云... 详细信息

粗茎秦艽GentianacrassicaulisDuthieexBurk和西藏秦艽***.f.的主要区别是前者花冠小、檐部蓝色,后者花大、檐部紫褐色;但二者在西藏东南部地区的形态界限不清楚,具有较多的中间形态过渡类型。本文以该地区居群作为主要研究对象,并以云南和西藏其他地区的典型形态类群为对照,比较研究了两个物种间的形态学、染色体和分子标记界定。共研究了10个居群69个个体的trnS-G和ITS序列、6个居群26株植株的染色体倍性和54份标本的形态变异。结果表明,花冠大小与染色体倍性密切相关。云南等地分布的粗茎秦艽均为二倍体(2n=26),花冠较小;西藏西部的西藏秦艽均为四倍体(2n=52),花冠较大。而西藏东南部的形态过渡类型也为四倍体,花冠较大,且其中的部分植株花颜色变浅,类似西藏秦艽。但母系与双亲遗传背景的分子标记都表明西藏东南部居群与典型形态特征上的粗茎秦艽聚为一支,应属于粗茎秦艽;ITS序列上也未发现杂合位点。这些分子证据都不支持近期杂交渗入造成形态过渡性的假设。综合分析表明多倍化造成了粗茎秦艽种内形态特征的变异,其四倍体个体与四倍体西藏秦艽在形态特征上的趋同,最终导致了二者在西藏东南部地区形态界限的模糊。但是,分子证据可以很好地区分这种多倍化造成的形态趋同。我们的研究结果还表明,综合利用分子、染色体和广义形态证据来解决近缘种之间种范围的界定具有更大的优势。此外,还讨论了粗茎秦艽不同染色体倍性的分布以及该高山物种可能的起源与扩散途径。

关键词：粗茎秦艽西藏秦艽多倍化形态趋同种的界定

粗茎秦艽多糖GCP-1的分离纯化、结构表征及抗炎活性评价

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中草药 2021年第3期52卷 635-642页

作者：于少朋曾锐韩珍曾元莲杨玲瞿燕秦旭华成都中医药大学药学院四川成都611137 西南民族大学药学院四川成都610041

目的从粗茎秦艽Gentianacrassicaulis中分离纯化多糖,初步分析其结构特征并研究其体外抗炎活性。方法采用热水浸提粗茎秦艽粗多糖(Gentianacrassicaulispolysaccharide,GCP),再经CelluloseDE-52纤维素离子交换柱、Sephadex G-100柱进行分离纯化,得到GCP-1。采用高效凝胶色谱法(HPGPC)鉴定纯度并测定其相对分子质量;采用高效液相色谱(HPLC)测定其单糖组成;采用红外光谱(IR)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和核磁共振波谱法对该多糖的结构进行初步分析;采用CCK-8法检测其对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7增殖的影响;利用ELISA试剂盒测定其对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、一氧化碳(NO)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)释放量的影响。结果从粗茎秦艽中分离纯化得到GCP-1多糖,相对分子质量为6.87×10^(4),由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖7种单糖组成,其物质的量比为0.07∶3.07∶0.42∶1.98∶1.33∶5.22∶6.76;IR、GC-MS和核磁共振波谱分析表明,GCP-1是一种典型的果胶多糖,含有HG和RGI区域及AGI和AGII侧链;质量浓度在10~200μg/m L时,GCP-1能明显促进小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7的增殖(P粗茎秦艽中分离得到的天然来源的均一多糖,其结构和活性初步研究为秦艽多糖成分的开发提供了一定参考。

关键词：粗茎秦艽多糖果胶多糖分离纯化结构表征抗炎

粗茎秦艽转录组及其环烯醚萜类生物合成相关基因分析与验证

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药学学报 2021年第7期56卷 2005-2014页

作者：康恒赵志礼倪梁红李尉涛赵淑娟刘铜华上海中医药大学上海201203 西藏藏医药大学西藏拉萨850000 北京中医药大学北京100029

龙胆科龙胆属Gentiana秦艽组(***)粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为中药秦艽及藏药“解吉那保”()基原植物之一,含有龙胆苦苷等环烯醚萜类活性成分,具有重要的药用价值。本文对粗茎秦艽转录组进行测序分析,分别构建其... 详细信息

龙胆科龙胆属Gentiana秦艽组(***)粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为中药秦艽及藏药“解吉那保”()基原植物之一,含有龙胆苦苷等环烯醚萜类活性成分,具有重要的药用价值。本文对粗茎秦艽转录组进行测序分析,分别构建其根、茎、叶、花转录组数据库,并对可能参与编码环烯醚萜苷类合成通路中关键酶的部分unigene进行qRT-PCR验证。结果如下:①共得到159534条unigene,平均长度为679。根据GO功能分类,可将unigene分为3大类67分支;基于KOG功能可将unigene分为25类;②KEGG代谢通路分析发现粗茎秦艽中215条unigene参与到20个次生代谢标准通路中,有305条unigene参与编码环烯醚萜苷类合成通路中的28个关键酶,且在不同部位中的表达存在差异;③qRT-PCR与RNA-Seq结果基本吻合,实验涉及的HMGS、DXS、MCS、GPPS、G10H、7-DLNGT及STR 7个基因皆为地上部位(茎、叶、花)的相对表达量高于地下部位(根)。环烯醚萜类为中药秦艽、龙胆、当药及青叶胆等药材的指标性成分及活性成分之一,本工作可为应用生物技术方法获取环烯醚萜类活性成分或其中间体,探讨药用植物次生产物累积规律、不同生态型品种的质量评价及药材道地性形成机制研究等提供基础科学资料。

关键词：粗茎秦艽转录组环烯醚萜类生物合成代谢通路 qRT-PCR

粗茎秦艽种子萌发过程的转录组及关键因子分析

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中草药 2021年第1期52卷 219-226页

作者：杨晓马子豪马婕吕金盈何娟王长生李爱暖陈晨曾锐西南民族大学药学院四川成都610041 石柱土家族自治县农业农村委员会重庆409100 西南民族大学青藏高原研究院四川成都610041

目的研究粗茎秦艽Gentiana crasicaulis种子萌发的转录组信息及影响因子。方法利用高通量测序技术测定粗茎秦艽种子萌发前、萌发中及萌发后3个阶段的转录组,并通过生物信息学技术进行分析。结果共获得了149463条Unigenes,平均长度为601.... 详细信息

目的研究粗茎秦艽Gentiana crasicaulis种子萌发的转录组信息及影响因子。方法利用高通量测序技术测定粗茎秦艽种子萌发前、萌发中及萌发后3个阶段的转录组,并通过生物信息学技术进行分析。结果共获得了149463条Unigenes,平均长度为601.88bp,其中79412个Unigene获得注释。6943个基因差异表达,大部分表现为萌发后上调表达,其中5188个富集到GO条目中,1815个富集到KEGG通路中,大多参与光反应过程、细胞壁合成、脂质代谢及次生代谢中。单碱基到六碱基核苷酸的SSR重复类型均有检出,SSR发生频率为15.13%,出现频率为18.81%,平均每3199bp就含有1个SSR位点,SSR重复类型丰富,数目较多。结论粗茎秦艽种子萌发过程有大量调控基因参与,光照、激素为重要的调控因子,SSR专用标记的开发切实可靠,且为粗茎秦艽的次生代谢调控研究奠定了基础。

关键词：粗茎秦艽种子转录组代谢通路 SSR标记 RNA-seq

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粗茎秦艽醇提物体内外经皮渗透性研究

中草药 2020年第11期51卷 2914-2921页

作者：李春雪曾锐高元平李源杨晓马子豪严亨秀钱妍重庆医科大学附属第二医院药学部重庆400010 西南民族大学药学院四川成都610041

目的建立粗茎秦艽Gentianacrassicaulis透皮吸收液中多种环烯醚萜类化学成分含量测定方法,并对粗茎秦艽体内外经皮渗透特性进行研究,为粗茎秦艽经皮给药制剂的研发、临床用药和传统剂型改革提供科学依据。方法在课题组前期研究的基础上... 详细信息

目的建立粗茎秦艽Gentianacrassicaulis透皮吸收液中多种环烯醚萜类化学成分含量测定方法,并对粗茎秦艽体内外经皮渗透特性进行研究,为粗茎秦艽经皮给药制剂的研发、临床用药和传统剂型改革提供科学依据。方法在课题组前期研究的基础上,采用醇提法制备粗茎秦艽提取液,选用3种常用的透皮促渗剂氮酮、冰片和丙二醇,利用HPLC定量评价单一促渗剂或二元复合促渗剂对粗茎秦艽中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷5种主要成分的体外经皮渗透特性的影响;以龙胆苦苷、马钱苷酸和獐芽菜苦苷3种成分为评价指标研究粗茎秦艽醇提物在活体小鼠皮肤模型的渗透特性。结果与对照组相比,促渗剂的使用可显著增加粗茎秦艽中5种主要成分的体外吸收,A(5%氮酮)、B(5%冰片)、C(5%丙二醇)、A+B(2.5%氮酮+2.5%冰片)、A+C(2.5%氮酮+2.5%丙二醇)、B+C(2.5%冰片+2.5%丙二醇)5组中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷的透皮吸收速率(J)分别可达12.3060、1.2488、4.1875、153.0300、5.0126μg/(cm^2·h),促渗效果分别是对照组的9.73、2.57、13.94、15.92、8.08倍。其中,A+C组,即2.5%氮酮+2.5%丙二醇组体外促渗效果最为明显。体内经皮渗透实验表明,与空白组对比,2.5%氮酮+2.5%丙二醇组对于活体小鼠皮肤的促渗透效果表现较好。结论氮酮和丙二醇对粗茎秦艽中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷5种主要成分有良好的促渗透效果,为研究粗茎秦艽经皮给药制剂质量控制奠定基础。

关键词：粗茎秦艽马钱苷酸山栀苷甲酯獐牙菜苦苷龙胆苦苷獐牙菜苷氮酮冰片丙二醇促渗剂经皮渗透

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粗茎秦艽药材HPLC指纹图谱研究

中草药 2009年第1期40卷 120-123页

作者：王妍妍赵志礼吴靳荣王峥涛上海中医药大学生药学教研室上海201203 上海中医药大学中药研究所上海201203

目的建立粗茎秦艽药材的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法以龙胆苦苷为内参照物,分析13批粗茎秦艽药材的HPLC色谱行为,并进行相似度计算,色谱条件:UltimateXB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸水梯... 详细信息

目的建立粗茎秦艽药材的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法以龙胆苦苷为内参照物,分析13批粗茎秦艽药材的HPLC色谱行为,并进行相似度计算,色谱条件:UltimateXB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,柱温25℃,检测波长240nm。结果标定了10个共有峰,建立了HPLC指纹图谱,该图谱相关系数均在0.98～1.0。结论该方法准确可靠,重现性好,可为控制粗茎秦艽药材内在质量提供科学依据。

关键词：粗茎秦艽指纹图谱高效液相色谱法

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粗茎秦艽种子生物学研究

中国中药杂志 2011年第5期36卷 552-555页

作者：吴靳荣赵志礼孟千万上海中医药大学生药学教研室上海201203

目的:了解濒危药用植物粗茎秦艽种子的生物学特性。方法:5批不同产地粗茎秦艽种子的形态学观察、发芽试验和生活力的TTC法测定。结果:5批种子外部形态基本相同;贮存8个月后,各样品生活力相近,但野生种子的发芽率最高;同时,该野生种子与2... 详细信息

目的:了解濒危药用植物粗茎秦艽种子的生物学特性。方法:5批不同产地粗茎秦艽种子的形态学观察、发芽试验和生活力的TTC法测定。结果:5批种子外部形态基本相同;贮存8个月后,各样品生活力相近,但野生种子的发芽率最高;同时,该野生种子与2008XR02号样品的发芽势较其他3个样品为高;千粒重与发芽率之间的相关性不明显。结论:初步推断,野生种子与2008XR02号种子的品质较优;本工作可为该物种的就地保护及优良种质的选育提供基础资料。

关键词：粗茎秦艽种子生物学千粒重发芽率生活力

粗茎秦艽根茎品质与栽培土壤化学因子的相关性分析

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植物资源与环境学报 2014年第4期23卷 75-82页

作者：宋九华孟杰曾羽李瑶成涛陈兴福四川农业大学农学院四川温江611130 乐山师范学院化学系四川乐山614004 四川回春堂药业公司四川遂宁629000

对云南丽江鲁店乡18个样点粗茎秦艽（Gentiana crassicaulis *** Burk.）的根茎品质指标以及栽培土壤基本养分和矿质元素含量进行了测定;在此基础上,分析了根茎品质指标与土壤化学指标的相关性,并采用逐步回归分析方法筛选出影响粗茎秦... 详细信息

对云南丽江鲁店乡18个样点粗茎秦艽（Gentiana crassicaulis *** Burk.）的根茎品质指标以及栽培土壤基本养分和矿质元素含量进行了测定;在此基础上,分析了根茎品质指标与土壤化学指标的相关性,并采用逐步回归分析方法筛选出影响粗茎秦艽根茎品质的主要土壤化学因子。测定结果表明：各样点间粗茎秦艽根茎的总灰分、酸不溶性灰分、水分、醇溶性浸出物、马钱苷酸和龙胆苦苷含量的差异较大,平均值分别为2.84%、0.28%、6.21%、28.57%、1.53%和4.70%,均符合相关的药材标准。土壤p H值为p H 4.67~p H 6.83,平均值为p H 5.51;土壤中有机质、速效N、速效P和速效K含量差异明显,平均值分别为7.38%、128.09μg·g-1、86.85μg·g-1和232.33μg·g-1;土壤中交换性Ca、交换性Mg、有效Zn、有效Mn、有效Fe和有效Cu含量也有较大差异,平均值分别为1 391.16、91.87、2.81、56.18、51.07和0.92μg·g-1。相关性分析结果表明：土壤速效P含量与粗茎秦艽根茎中醇溶性浸出物和龙胆苦苷含量分别呈极显著和显著正相关;土壤有效Fe含量与根茎中总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物和龙胆苦苷含量呈极显著或显著正相关;土壤有效Cu含量与根茎中总灰分含量呈极显著正相关。逐步回归分析结果表明：影响粗茎秦艽根茎中总灰分含量的土壤化学因子是有效Zn、有效Fe和有效Cu含量,影响根茎中酸不溶性灰分和龙胆苦苷含量的土壤化学因子是有效Fe含量,影响根茎中醇溶性浸出物含量的土壤化学因子是速效P含量;而根茎中水分和马钱苷酸含量与各土壤化学因子均无明显的回归关系。综合分析结果显示：云南丽江粗茎秦艽种植区域的土壤均呈弱酸性,基本养分充足、矿质元素含量丰富,适宜于粗茎秦艽的生长;土壤有效Fe含量对粗茎秦艽根茎的品质指标影响最大,在实际生产中应适当喷施含Fe的微肥。

关键词：粗茎秦艽根茎品质指标土壤化学因子相关性分析逐步回归分析

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粗茎秦艽种子粗提物与破眠方法研究

植物科学学报 2017年第6期35卷 900-907页

作者：张亥贤陈学林达清璟马文兵西北师范大学生命科学学院兰州730070

为了探究影响粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.)种子休眠的因素,破除休眠,寻找其种子快速萌发的方法,以干燥的粗茎秦艽种子为材料,测定种子吸水率及粗提物的活性,使用不同浓度的赤霉素(GA_3)、高锰酸钾(KMnO_4)、聚乙二... 详细信息

为了探究影响粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.)种子休眠的因素,破除休眠,寻找其种子快速萌发的方法,以干燥的粗茎秦艽种子为材料,测定种子吸水率及粗提物的活性,使用不同浓度的赤霉素(GA_3)、高锰酸钾(KMnO_4)、聚乙二醇(PEG6000)和过氧化氢(H_2O_2)溶液进行浸种处理,比较不同处理条件对粗茎秦艽种子萌发的影响。结果显示,粗茎秦艽种皮对种子吸水没有明显阻碍作用;不同浓度的种子粗提物对白菜、小麦的萌发和生长均表现出抑制作用;不同浓度的粗提物对粗茎秦艽种子自身的萌发也表现出一定的抑制作用,当粗提物浓度达到0.1 g/mL时,抑制作用最显著(P粗茎秦艽种子的萌发率,浓度为1.5%时效果较显著(P粗茎秦艽种子的萌发效果不如前者,此外,用500 mg/L的赤霉素浸种和300 mg/L的聚乙二醇预处理也可显著打破粗茎秦艽种子休眠(P粗茎秦艽种子的内源抑制物是影响其休眠的因素之一;种皮的机械阻碍也在一定程度上影响了种子萌发;粗茎秦艽种子具有综合性休眠特性。高锰酸钾预处理、赤霉素浸种和聚乙二醇引发均可打破种子休眠、缩短种子出芽时间,提高种子的发芽能力。

关键词：粗茎秦艽休眠种子萌发