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抗寄生虫中药活性成分体外抗细粒棘球蚴作用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 191-198页

作者：李昆雷夏俊邱美龄胡美荷吉古孝安候梦丹翟少华新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心) 乌鲁木齐830013

目的评价抗寄生虫中药水提物和有机溶剂粗提物体外对细粒棘球蚴的作用效果。方法从感染绵羊肝脏细粒棘球蚴包囊中分离原头节,体外培养24 h后,取活性大于95%的原头节(100μl,约100个)加入96孔板,分别加入终浓度为0.8 mg/ml(低浓度组)、1.... 详细信息

目的评价抗寄生虫中药水提物和有机溶剂粗提物体外对细粒棘球蚴的作用效果。方法从感染绵羊肝脏细粒棘球蚴包囊中分离原头节,体外培养24 h后,取活性大于95%的原头节(100μl,约100个)加入96孔板,分别加入终浓度为0.8 mg/ml(低浓度组)、1.6 mg/ml(中浓度组)、3.2 mg/ml(高浓度组)的鸦胆子、苦楝皮、辣蓼、石榴皮、使君子、槟榔、贯众、鱼藤、马蔺子、五倍子和仙鹤草等11种抗寄生虫中药的水提物,体外作用72 h后,伊红染色法检测原头节活性,倒置显微镜观察下观察原头节的形态,计算死亡率;同时设相同浓度的阿苯达唑组和空白对照组。从具有体外抗原头节作用的中药中提取黄酮、多糖、皂苷和生物碱等粗提物,分别以终浓度1.00 mg/ml体外作用于原头节72 h后,观察原头节形态,计算死亡率;同时设空白对照组。对体外抗原头节效果明显的粗提物进行液相色谱与串联质谱联用分析。组间比较采用单因素ANOVA分析,两两比较采用LSD-t检验。结果中药水提物作用72 h后,鸦胆子、苦楝皮、辣蓼水提物高浓度组原头节边缘模糊,结构松散,基质溶解;其余8种中药水提物高浓度组原头节形态正常,各部分结构清晰;阿苯达唑组原头节生发层有轻微损伤;空白对照组原头节形态正常。体外培养72 h后,鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物高浓度组原头节的死亡率分别为(99.63±0.57)%、(90.89±1.10)%和(51.93±0.60)%,中浓度组分别为(85.97±1.50)%、(81.14±1.19)%、(42.46±0.56)%,低浓度组分别为(78.34±1.35)%、(77.27±0.92)%、(36.66±0.60)%,与空白对照组[(0.62±0.51)%]相比差异均有统计学意义(F=180678.22、41488.99、44346.38,19543.86、27887.32、34590.79,20059.467、41953.68、17993.77,均P0.05)。鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷、辣蓼皂苷和辣蓼生物碱组原头节皱缩、结构松散、基质溶解,原头节死亡率分别为(98.33±2.89)%、(96.67±5.77)%、100%、(99.33±1.15)%和(56.67±2.11)%,与空白对照组[(10.33±2.51)%]比较差异均有统计学意义(F=1584.00、563.71、3808.47、3099.52、14.65,均P粗提物组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。液相色谱与串联质谱联用分析结果显示,正、负离子模式下分别鉴定出741、398种代谢产物,其中正离子模式下从鸦胆子黄酮粗提物中鉴定出差异显著的黄酮类化合物4种,分别为漆黄素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮、儿茶素和甜橙黄酮;负离子模式下鉴定出8种,分别为原花青素B2、槲皮素-3β-D-葡萄糖苷、枸桔苷、橙皮素、槲皮素、木犀草素、芹菜素和黄豆黄素。结论鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物,鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷和辣蓼皂苷有明显体外抗细粒棘球蚴的作用,且效果优于阿苯达唑。

关键词：细粒棘球蚴抗寄生虫中药水提物粗提物液相色谱与串联质谱联用分析

4种植物叶提取液对青枯雷尔氏菌抑菌活性研究

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福建农业科技 2024年第1期55卷 18-22页

作者：蔡鸿娇林茂李忠琴邹文政冯少贻钱瑞芳陈爱花集美大学水产学院福建厦门361012 惠安县鑫海水产科技有限公司福建泉州362131

青枯雷尔氏菌Ralstonia solanacearum是一种毁灭性土传病害病原菌,防治困难,通过抑菌圈、抑菌率、最小抑菌浓度测定,探讨羊蹄甲、三裂蟛蜞菊、马缨丹、芒果叶提取液对青枯菌的抑制效果。结果表明:三裂蟛蜞菊叶提取液的抑菌效果最好,抑... 详细信息

青枯雷尔氏菌Ralstonia solanacearum是一种毁灭性土传病害病原菌,防治困难,通过抑菌圈、抑菌率、最小抑菌浓度测定,探讨羊蹄甲、三裂蟛蜞菊、马缨丹、芒果叶提取液对青枯菌的抑制效果。结果表明:三裂蟛蜞菊叶提取液的抑菌效果最好,抑菌圈范围为15.00~18.13 mm,为高度敏感,在0.40 g·mL-1浓度处理下,其抑菌率达到79.63%,显著高于其他处理组;羊蹄甲和马缨丹叶提取液的抑菌圈范围为10.67~15.57 mm,为中度敏感,抑菌率分别为58.33%和60.37%;芒果叶提取液的抑菌效果最差。

关键词：植物源杀菌剂青枯雷尔氏菌粗提物抑菌活性抑菌圈

内生真菌SDYS180粗提物抑菌活性与机制

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福建农林大学学报(自然科学版) 2023年

作者：姜海燕白娜娜晁开瑞孟达赵胜国党海龙于凤强鄂尔多斯市林业和草原事业发展中心内蒙古自治区林业和草原有害生物防治检疫总站呼和浩特市林业和草原局赛罕分局内蒙古农业大学林学院

以前期筛选的植物内生真菌SDYS180(聚多曲霉菌Aspergillus sydowii)为试验材料，通过体外试验测定其对13株常见林木病原真菌的抑菌活性，并建立SDYS180粗提物对各病原真菌的毒力回归方程，同时测定了SDYS180粗提物对杨树叶斑病菌生理指... 详细信息

以前期筛选的植物内生真菌SDYS180(聚多曲霉菌Aspergillus sydowii)为试验材料，通过体外试验测定其对13株常见林木病原真菌的抑菌活性，并建立SDYS180粗提物对各病原真菌的毒力回归方程，同时测定了SDYS180粗提物对杨树叶斑病菌生理指标[电导率、可溶性蛋白(SP)质量分数、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性]的影响。结果表明，SDYS180菌体、发酵液和挥发性代谢产物对13株林木病原真菌的抑菌效果表现为菌体＞发酵液＞挥发性代谢产物，其中对杨树叶斑病菌的抑制活性最佳，粗提物对该菌的毒力回归方程为y=0.3010x+0.1437，R2=0.986 4，EC50=1.183 7 mg·mL-1。SDYS180粗提物对杨树叶斑病菌的生理指标存在明显影响，主要表现为：试验期间处理组的电导率和MDA浓度大于对照组，8 h时电导率最大，达到27.73 ms·cm-1，4 h时MDA浓度最大，达到0.183 μmol·g-1；8 h后处理组的SP质量分数小于对照组；处理组的POD、SOD、CAT活性与对照组相比都呈现先增强后减弱的趋势，且均在4 h时达到最大值，分别为1 200 U·g-1·min-1、33 U·g-1、5.46 U·g-1·min-1。可见，SDYS180是一株具有开发潜力的生防菌。

关键词：聚多曲霉菌粗提物抑菌活性细胞膜保护酶

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黑姜粗提物对2型糖尿病大鼠降血糖作用探析

黑姜粗提物对2型糖尿病大鼠降血糖作用探析

作者：李跃华内蒙古科技大学

学位级别：硕士

目前,我国已成为世界上糖尿病患病人数最多的国家,为缓解这一公共卫生问题,本研究对2型糖尿病进行了探索,实验采用绿色发酵技术将整颗生姜发酵为黑姜,并采用超临界萃取法对黑姜中的姜辣素进行了提取,使用该粗提物对四氧嘧啶构建的2型糖... 详细信息

目前,我国已成为世界上糖尿病患病人数最多的国家,为缓解这一公共卫生问题,本研究对2型糖尿病进行了探索,实验采用绿色发酵技术将整颗生姜发酵为黑姜,并采用超临界萃取法对黑姜中的姜辣素进行了提取,使用该粗提物对四氧嘧啶构建的2型糖尿病大鼠进行灌胃,探讨粗提物对2型糖尿病(2-type diabetes mellitus2,T2DM)大鼠降血糖的效果,其主要结果如下:(1)黑姜粗提物成分分析。将市售生姜,置于恒温恒湿箱中,在温度68℃,湿度95%的条件下,发酵四周后,使其发生美拉德反应,利用超临界二氧化碳技术萃取粗提物,萃取后得到的姜辣素含量为2.52%,再利用气相色谱-质谱联用仪(Gas ChromatographyMass,GC-MS)检测到粗提物中含姜黄素、角鲨烯、6-姜醇、姜油酮等一百多种物质,含有多种降血糖相关成分,主要降糖成分6-姜酚和姜酮所占总含量8.44%和4.55%。(2)黑姜粗提物对糖尿病大鼠体重及血糖值的影响。利用四氧嘧啶构建2型糖尿病大鼠模型,按照血糖值分为对照组、模型组、中高血糖组、高血糖组,对中高血糖组和高血糖组大鼠连续灌胃粗提物四周,每周对大鼠的体重及血糖进行测定。结果显示:比较模型组大鼠和对照组大鼠的体重,体重明显下降(P粗提物对T2DM大鼠有恢复体重,降低血糖作用。(3)黑姜粗提物对糖尿病大鼠生化值及肝脏、胰腺、肾脏组织的影响。经四周灌胃后的大鼠,对其进行心脏采血,分析相关生化指标:谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮、高密度脂蛋白胆固醇以及低密度脂蛋白胆固醇;并摘取大鼠各器官制作病理切片,进行显微镜观察。结果显示:模型组大鼠与对照组大鼠相比,相关生化指标未恢复到正常范围,中高糖组大鼠恢复到正常范围,高血糖组大鼠基本无明显变化;对大鼠各组织的影响:中高糖组中胰腺、肾脏、肝脏与对照组大鼠相比,细胞均恢复到正常形态,排列整齐,细胞核饱满,分布均匀,高糖组大鼠细胞形态肿大,核大小不一,边界较模糊,说明黑姜粗提物对T2DM大鼠的生化指标有恢复作用,对中高血糖组大鼠的脏器有明显改善效果。(4)黑姜粗提物对各组大鼠胰腺、肝脏、肾脏中的bax、bcl-2基因表达的影响。提取对照组、模型组、中高血糖组、高血糖组每组大鼠组织的RNA,进行半定量PCR,分析促细胞凋亡基因bax和抑制细胞凋亡基因bcl-2的表达。结果显示:模型组大鼠与对照组大鼠的bcl-2、bax基因相比,模型组大鼠bcl-2基因表达降低,bax基因表达上升;中高血糖组及高糖组大鼠与模型组大鼠bcl-2、bax基因相比,中高糖组及高糖组中bcl-2基因表达均有升高,bax基因表达均有下降,而糖尿病患者的创面组织与bax/bcl-2比值有关,比值增加,则机体内凋亡细胞数目增大,病情随之加重,各组T2DM大鼠比值均有下降,所以黑姜粗提物对改善2型糖尿病症状存在潜在功效。综上所述,黑姜粗提物明显降低了中高血糖组大鼠的血糖,且高血糖组大鼠血糖也有所下降,此方法是运用天然产物中有效成分的自然特性,达到相对良好降血糖效果,这为日后治疗2型糖尿病提供思路和实验依据。

关键词：黑姜粗提物姜辣素降血糖

光果甘草粗提物缓解非酒精性脂肪肝病中脂质积累的作用研究

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光果甘草粗提物缓解非酒精性脂肪肝病中脂质积累的作用研究

作者：韦云飞吉林大学

学位级别：硕士

非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种非由过量酒精摄入引起的脂肪肝堆积的疾病,已成为全世界最常见的慢性肝病原因。在动物中,NAFLD会导致宠物或畜禽食欲不振、精神萎靡等情况,肝损伤加重后会导致肝衰竭,... 详细信息

非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种非由过量酒精摄入引起的脂肪肝堆积的疾病,已成为全世界最常见的慢性肝病原因。在动物中,NAFLD会导致宠物或畜禽食欲不振、精神萎靡等情况,肝损伤加重后会导致肝衰竭,最终导致动物死亡。NAFLD是由多因素导致的,广为接受的“二次打击”理论认为第一次打击是较为温和且危害较小的肝脏脂肪变性,第二次打击为带来炎症和损伤的氧化应激。光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)是一种常见的传统草药,主要生物活性成分为三萜皂苷和黄酮类化合物。光果甘草具有镇咳祛痰、清热解毒、补脾和胃等功效,能抗炎、抗病毒、保肝以及提高机体抗肿瘤的能力。相较于其余种类甘草,光果甘草独有成分为光甘草定,具有较强的抗氧化、抗动脉粥样硬化和一定的调血脂、降血压等作用。本实验通过游离脂肪酸(Oleic acid+palmitic acid,OA+PA)建立Hep G2细胞脂质积累模型和高脂饲喂(High fat diet,HFD)小鼠建立体内NAFLD模型,系统的探究光果甘草粗提物(The Glycyrrhiza glabra L.extract,TGGE)对NAFLD中脂质积累的作用研究。在本研究中,将光果甘草磨碎过筛,粉末溶于甲醇使超声提取,蒸干滤液后得到光果甘草粗提物。本研究通过使用高效液相色谱(HPLC)测定光果甘草粗提物中的主要有效活性成分甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素、甘草次酸和光甘草定的含量。为预测光果甘草粗提物可能潜在的作用靶点,将光果甘草粗提物中最主要的有效成分光甘草定、甘草苷和异甘草苷分别与KEAP1和ATG5蛋白进行结合。本研究预测光果甘草粗提物能与KEAP1结合影响Nrf2信号通路,从而对抗NAFLD中的氧化应激。为了明确光果甘草粗提物在NAFLD中的作用及其机制,本研究在游离脂肪酸诱导的Hep G2细胞脂质积累模型和高脂饲喂诱导的小鼠NAFLD模型中检测了光果甘草粗提物对抗氧化信号通路和自噬信号通路的影响。体外细胞油红与BODIPY染色实验和体内小鼠肝脏H&E染色和油红实验表明光果甘草粗提物能缓解NAFLD中的脂质积累情况。体外细胞活性氧(ROS)流式检测和体内生化指标丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、ROS和超氧化物歧化酶(SOD)的水平检测说明光果甘草粗提物能增强机体的抗氧化应激能力。为了更进一步研究其潜在的作用机制,本研究使用Western Blot检测抗氧化相关蛋白Nrf2、Lamin B1、KEAP1、NQO1、GCLC和GCLM和自噬相关蛋白PI3K、Akt、m TOR、Beclin1、ATG5、ATG7、LC3Ⅰ/Ⅱ和P62的表达情况。与此同时,本研究利用细胞免疫荧光染色和动物免疫组织化学染色检测了Nrf2、LC3和P62的表达情况。最后又使用荧光定量测定了细胞以及小鼠肝脏中的Nrf2、LC3和P62基因的表达情况。根据实验结果,本研究明确了光果甘草粗提物能通过激活抗氧化信号通路和促进自噬信号通路来缓解NAFLD中的脂质积累情况。综上所述,本研究通过提取光果甘草有效成分获得光果甘草粗提物,并确定了其最主要的活性成分为光甘草定、甘草苷和异甘草苷。本研究得到的光果甘草粗提物能通过激活抗氧化和促进自噬来缓解NAFLD中的脂质积累。因此,光果甘草粗提物有潜力成为NAFLD治疗的有效药物。

关键词：光果甘草粗提物非酒精性脂肪肝病抗氧化自噬

潜在抗病毒药物葛根粗提物及其主要成分葛根素改善乙醇导致海马细胞毒性作用的机理

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第3期19卷 244-247页

作者：韩萍李娟李文杰余增丽王旗吴德生四川大学华西公共卫生学院成都610041 郑州大学公共卫生学院

目的研究葛根粗提物(CP)和葛根素标准品(SP)对乙醇(EtOH)引起的胎鼠海马细胞氧化损伤是否具有相同的保护作用。方法海马细胞的培养取材于妊娠18天的ICR胎鼠。用MTT法检测细胞活力,并采用RTPCR方法观察SODmRNA表达的变化。结果MTT实验结... 详细信息

目的研究葛根粗提物(CP)和葛根素标准品(SP)对乙醇(EtOH)引起的胎鼠海马细胞氧化损伤是否具有相同的保护作用。方法海马细胞的培养取材于妊娠18天的ICR胎鼠。用MTT法检测细胞活力,并采用RTPCR方法观察SODmRNA表达的变化。结果MTT实验结果显示,15mg/LCP和10mg/LSP均可部分拮抗50～350mol/LEtOH对胎鼠海马细胞所产生的毒性作用。检测SODmRNA表达的变化,数据表明,CP和SP均可部分降低EtOH所引起的海马细胞SODmRNA表达量的升高。结论CP和SP均可降低EtOH所致SODmRNA表达量的升高,显著降低EtOH所诱发的海马细胞毒作用,提高海马细胞的增殖活力,进一步从分子机制方面证实和阐述了CP和SP具有相同的抗氧化作用。

关键词：乙醇海马氧化性应激细胞毒性作用海马细胞葛根素粗提物抗病毒药物主要成分 mRNA表达量

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岩陀粗提物体外抑菌作用及活性成分研究

中兽医医药杂志 2022年第3期41卷 43-48页

作者：解水梅王余磊宋春莲黄鑫张智慧张雅伦潘琼舒相华云南农业大学动物医学院云南昆明650201

为研究岩陀不同提取物体外抑菌作用及活性成分,分别采用乙醇、甲醇和丙酮进行粗提,再分别用乙酸乙酯、正丁醇进行分步萃取,用粗提物和萃取相分别对粪肠球菌、屎肠球菌、痢疾志贺菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌进行抑菌试... 详细信息

为研究岩陀不同提取物体外抑菌作用及活性成分,分别采用乙醇、甲醇和丙酮进行粗提,再分别用乙酸乙酯、正丁醇进行分步萃取,用粗提物和萃取相分别对粪肠球菌、屎肠球菌、痢疾志贺菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌进行抑菌试验,采用LC-MS对最佳抑菌活性部位进行成分分析。结果表明,岩陀提取物及萃取相对6种细菌均有不同程度的抑制作用,乙醇提取物乙酸乙酯萃取相对粪肠球菌和无乳链球菌的MIC值最小,均为0.390 mg/mL;乙醇提取物乙酸乙酯萃取相对粪肠球菌及甲醇提取物正丁醇萃取相对屎肠球菌和无乳链球菌的MBC值最小,均为0.780 mg/mL;质量浓度为100.000 mg/mL时,金黄色葡萄球菌对乙醇提取物正丁醇萃取相为高敏,抑菌圈直径最大为(21.00±0)mm。其余细菌对提取物及萃取相高敏的有24个,中敏的有57个。以抑菌活性强弱比较,3种提取物为乙醇提取物>甲醇提取物>丙酮提取物,萃取相依次为乙酸乙酯相>正丁醇相>剩余相。LC-MS分析显示,3种提取物的乙酸乙酯萃取相有7种共有成分,分别为咖啡酸、儿茶素、儿茶素没食子酸酯、γ-亚麻酸、岩白菜素、黄芩素、白杨素。可见,岩陀提取物及萃取相有较好的抑菌效果。

关键词：岩陀粗提物萃取相抑菌试验 LC-MS分析活性成分

东革阿里不定根粗提物对枯草芽孢杆菌呼吸抑制及生物膜清除的影响研究

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延边大学农学学报 2022年第2期44卷 1-6,12页

作者：刘亮亮安晓丽王淼叶玮琦于硕朴炫春延边大学农学院吉林延吉133002

为探究东革阿里不定根对枯草芽孢杆菌呼吸代谢及对生物膜的清除作用,试验以东革阿里不定根粗提物为材料,测定其对枯草芽孢杆菌呼吸抑制率及呼吸代谢相关酶活性的影响,并进一步测定其对菌生物膜的清除率。结果表明:东革阿里粗提物对枯草... 详细信息

为探究东革阿里不定根对枯草芽孢杆菌呼吸代谢及对生物膜的清除作用,试验以东革阿里不定根粗提物为材料,测定其对枯草芽孢杆菌呼吸抑制率及呼吸代谢相关酶活性的影响,并进一步测定其对菌生物膜的清除率。结果表明:东革阿里粗提物对枯草芽孢杆菌的呼吸有显著的抑制作用,且主要影响三羧酸循环和糖酵解途径。东革阿里粗提物浓度为4 mg/mL时,对枯草芽孢杆菌生物膜的清除率最高(67%),并在该浓度下,细菌生物膜内蛋白质及多糖含量也明显降低。

关键词：东革阿里不定根粗提物枯草芽孢杆菌呼吸代谢生物膜

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三叶木通果皮粗提物的抗腹泻效用研究

现代畜牧科技 2023年第11期 57-59页

作者：田明湖南省湘西民族职业技术学院湖南吉首416000

目的:研究三叶木通果皮采用不同粗提方法得到的粗提物对腹泻的效用研究。方法:三叶木通成熟果实去果肉后将果皮切碎,在80℃条件下烘干至质量达初始质量的10%。将烘干物进行粉碎处理,将粉碎粒度大小控制在40目以下。步骤1:粉料与蒸馏水按... 详细信息

目的:研究三叶木通果皮采用不同粗提方法得到的粗提物对腹泻的效用研究。方法:三叶木通成熟果实去果肉后将果皮切碎,在80℃条件下烘干至质量达初始质量的10%。将烘干物进行粉碎处理,将粉碎粒度大小控制在40目以下。步骤1:粉料与蒸馏水按1∶10(m/v)100℃提取2 h后过滤,重复3次。将部分滤液60℃脱水处理得到样品1;处理步骤2:将步骤1中滤液进行适度脱水后,加入无水乙醇,直至乙醇终浓度为80%,60℃回流搅拌提取4 h,过滤除渣,将上清液回收,并真空干燥至含水量10%以下,得到样品2;处理步骤3:取步骤1所述的水提溶液1∶1加入正丁醇进行萃取12 h处理,连续萃取3次,将萃取得到的正丁醇溶液真空干燥除去溶剂,得到样品3。将得到的样品1、样品2、样品3进行以动物模型为基础的药学检测。结果:与腹泻模型组相比,阳性对照组、Y1组、Y2组、Y3组湿便数量都显著低于腹泻模型组(P<0.05),同时腹泻时间都显著延后(P<0.05)。结论:该试验条件下,通过给小鼠灌胃三叶木通果皮提取物,能够显著的缓解小鼠的腹泻情况,减少排泄湿便的数量,并且推迟其腹泻发生的时间。由此看,Y1、Y2、Y3均有明显的止泻效果。

关键词：三叶木通果皮粗提物抗腹泻效用