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菊芋乙醇提取物对粉尘螨致小鼠特应性皮炎模型的作用

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临床皮肤科杂志 2020年第8期49卷 453-455页

作者：肖勤汪亚利武汉市皮肤病防治院皮肤科湖北武汉430030

目的:探究菊芋乙醇提取物(ethanol extract of Jerusalem artichoke, JAE)对粉尘螨致小鼠特应性皮炎模型作用。方法:选取30只健康的小鼠随机分成对照组、模型组和JAE组。对照组用生理盐水处理;模型组予粉尘螨变应原浸液处理制作特应性... 详细信息

目的:探究菊芋乙醇提取物(ethanol extract of Jerusalem artichoke, JAE)对粉尘螨致小鼠特应性皮炎模型作用。方法:选取30只健康的小鼠随机分成对照组、模型组和JAE组。对照组用生理盐水处理;模型组予粉尘螨变应原浸液处理制作特应性皮炎模型;JAE组予JAE干预特应性皮炎皮损。给小鼠外用粉尘螨变应原浸液致过敏性皮炎4周,通过测量小鼠背部和耳郭皮肤反应对小鼠特应性皮炎严重程度进行评估;通过测定血浆免疫球蛋白E(IgE)和组胺水平研究JAE的保护作用;通过反转录(RT)-PCR和蛋白质印迹测定角蛋白(CK)1、CK10 mRNA的表达和蛋白的水平。结果:特应性皮炎小鼠经JAE处理后,其皮炎的严重程度包括红斑和(或)出血、水肿、结痂,血浆IgE及组胺水平均降低。与对照组相比,模型组中CK1和CK10的mRNA表达上调(P<0.05),与模型组相比,经过JAE干预后CK1和CK10 mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),表明JAE可下调CK1和CK10蛋白表达。结论:JAE可降低特应性皮炎小鼠皮肤中CK1和CK10蛋白表达。

关键词：菊芋乙醇提取物粉尘螨特应性皮炎血浆免疫球蛋白E 组胺

标准化粉尘螨滴剂舌下免疫治疗变应性鼻炎患儿的疗效及TGF-β和IL-13 mRNA表达水平的变化

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第4期32卷 256-259页

作者：武勇进王鹏刘智献邱书奇深圳市耳鼻咽喉科研究所深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院深圳518172

目的:评估标准化粉尘螨滴剂舌下特异性免疫治疗对儿童变应性鼻炎(AR)的疗效,检测经12个月免疫治疗后TGF-β和IL-13mRNA表达水平的改变。方法:收集AR患儿92例,随机分为SLIT组(62例)和对照组(30例),前者以标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治... 详细信息

目的:评估标准化粉尘螨滴剂舌下特异性免疫治疗对儿童变应性鼻炎(AR)的疗效,检测经12个月免疫治疗后TGF-β和IL-13mRNA表达水平的改变。方法:收集AR患儿92例,随机分为SLIT组(62例)和对照组(30例),前者以标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗,辅以药物对症治疗,后者单纯使用药物对症治疗,分别在治疗前、治疗6个月和12个月后,评估患儿的鼻部症状评分和总用药评分变化。此外,通过qRT-PCR检测AR患儿经过免疫治疗后外周血单核细胞中TGF-β和IL-13mRNA表达水平的变化。结果:经过12个月的治疗后,SLIT组的症状评分和用药评分显著低于对照组(P粉尘螨滴剂舌下免疫治疗AR能明显改善过敏症状,减少对症药物的使用,且安全性高。TGF-β和IL-13mRNA表达水平的变化可能作为评价舌下免疫治疗疗效的指标。

关键词：鼻炎,变应性粉尘螨儿童舌下免疫疗法 TGF-β 白细胞介素13

粉尘螨变应原第2组分基因的原核表达及生物信息学分析

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中国免疫学杂志 2011年第6期27卷 533-539页

作者：胡友莹周鹰杨李王运刚崔玉宝安徽理工大学医学院淮南232001 盐城卫生职业技术学院检难医学教研室盐城224006

目的:克隆并原核表达粉尘螨变应原第2组分重组蛋白,鉴定其变应原性,分析其分子特征,为制备用于临床诊治的变应原奠定基础。方法:提取粉尘螨Total RNA,根据国际基因库(AB195580)设计并合成引物,经RT-PCR合成Derf 2全长基因,与pMD19-T载... 详细信息

目的:克隆并原核表达粉尘螨变应原第2组分重组蛋白,鉴定其变应原性,分析其分子特征,为制备用于临床诊治的变应原奠定基础。方法:提取粉尘螨Total RNA,根据国际基因库(AB195580)设计并合成引物,经RT-PCR合成Derf 2全长基因,与pMD19-T载体连接后,热转化至E.coliJM109;将测序正确的Der f 2基因与pET28a(+)Vector连接,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达;经镍琼脂糖凝胶FF亲和柱层析,收集各阶段洗脱峰用梯度透析法进行复性,Western blot鉴定重组蛋白的变应原性。用生物信息学软件预测其理化性质、空间结构,并构建分子进化树。结果:RT-PCR成功扩增获得目的基因Der f2,全长441 bp,与参考序列同源性99.3%。将构建的pET28a(+)-Der f 2质粒转化宿主菌E.coliBL21诱导表达,SDS-PAGE电泳显示全细胞和沉淀物中均有蛋白表达。亲和柱层析后获得约3.86 mg重组蛋白纯品,Western blot分析表明其可与哮喘患儿血清IgE发生特异性结合。去除信号肽序列(1～17氨基酸)后,重组蛋白由129个氨基酸组成,相对分子质量为14.076,二级结构由延伸主链(30.82%),无规则卷曲(49.32%),α螺旋(19.86%)组成。该变应原可能位于线粒体,属ML域家族。序列比对显示,粉尘螨和屋尘螨、微角尘螨、梅氏嗜霉螨的相似度依次为88%、96%、83%,此四种螨在上述蜱螨变应原第2组分构建的分子进化树中聚成一簇,支持率达100%。结论:粉尘螨变应原第2组分原核表达获得成功,纯化后获得具有变应原性的重组蛋白,为进一步规模生产该变应原并用于临床诊治奠定基础;生物信息学分析初步获得了该变应原的分子特征,为进一步实验室验证指明方向。

关键词：粉尘螨变应原原核表达生物信息学

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粉尘螨生殖系统超微结构的透射电镜观察

昆虫学报 2013年第8期56卷 960-963,I0001页

作者：王月明刘晓宇黄礼年孙新刘志刚深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所广东深圳518060 蚌埠医学院第一附属医院呼吸科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院寄生虫学教研室安徽蚌埠233000

本研究主要采用透射电镜观察粉尘螨Dermatophagoides farinae(Hughes)生殖系统超微结构。粉尘螨雄性生殖系统是由精巢、输精管、附腺、射精管、交配器官及附属交配器官组成。精巢内可同时有精子发育各阶段的细胞。精子无核膜、核染色质... 详细信息

本研究主要采用透射电镜观察粉尘螨Dermatophagoides farinae(Hughes)生殖系统超微结构。粉尘螨雄性生殖系统是由精巢、输精管、附腺、射精管、交配器官及附属交配器官组成。精巢内可同时有精子发育各阶段的细胞。精子无核膜、核染色质聚集成束、线粒体缺乏典型的嵴、胞质内有平行排列的电子致密薄片等为其特征性结构。雌性生殖系统由交合囊、交合囊管、储精囊、囊导管、卵巢、输卵管、子宫及产卵管构成。卵巢内可见含多个细胞核的中央细胞,其周为卵母细胞等生殖细胞。该研究丰富了对粉尘螨生殖系统结构的认识。

关键词：粉尘螨生殖系统精巢卵巢超微结构透射电镜

粉尘螨滴剂舌下免疫治疗对儿童咳嗽变异性哮喘的临床疗效

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儿科药学杂志 2021年第5期27卷 5-8页

作者：韩锋杨姗姗陆小霞杜青华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院湖北武汉430016

目的:探讨粉尘螨滴剂舌下免疫治疗(SLIT)对尘螨过敏儿童咳嗽变异性哮喘(CVA)的临床疗效。方法:选取2017年1月至2019年1月我院328例确诊为粉尘螨过敏诱发CVA患儿,排除随访脱落及不配合治疗患儿,最终纳入275例,随机分为对照组(n=132)和观... 详细信息

目的:探讨粉尘螨滴剂舌下免疫治疗(SLIT)对尘螨过敏儿童咳嗽变异性哮喘(CVA)的临床疗效。方法:选取2017年1月至2019年1月我院328例确诊为粉尘螨过敏诱发CVA患儿,排除随访脱落及不配合治疗患儿,最终纳入275例,随机分为对照组(n=132)和观察组(n=143)。对照组给予丙酸氟替卡松气雾剂吸入及孟鲁司特钠咀嚼片口服治疗,观察组在对照组治疗基础上给予粉尘螨滴剂治疗,每6个月随访一次,随访治疗12个月,比较两组患儿日/夜间咳嗽症状评分、肺功能、辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg细胞)比例、血清白介素10(IL-10)和IL-17水平变化情况。结果:治疗前,两组患儿日/夜间咳嗽症状评分、肺功能、Th17和Treg细胞比例、血清IL-10和IL-17水平比较差异无统计学意义(P均>0.05);治疗后,两组患儿日/夜间咳嗽症状评分、肺功能、Th17和Treg细胞比例、血清IL-10和IL-17水平比较差异有统计学意义(P均粉尘螨滴剂舌下免疫治疗可有效改善尘螨过敏CVA患儿临床症状,其主要机制可能是通过改变Th17/Treg细胞水平进而调节机体免疫平衡。

关键词：咳嗽变异型哮喘粉尘螨免疫治疗肺功能辅助性T细胞17 T淋巴细胞

粉尘螨抗原对支气管哮喘患者外周血单个核细胞T-bet和GATA3及FOXP3 mRNA表达水平的影响

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中华结核和呼吸杂志 2007年第2期30卷 112-115页

作者：郭胤仕许以平徐艳华上海交通大学医学院附属仁济医院呼吸科 200127

目的对支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMC)经粉尘螨刺激前、后T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、FOXP3 mRNA 的表达水平及相互关系进行研究。方法选择25例哮喘患者和15名健康人为研究对象,每例受试者又分为变应原刺激组和未经变... 详细信息

目的对支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMC)经粉尘螨刺激前、后T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、FOXP3 mRNA 的表达水平及相互关系进行研究。方法选择25例哮喘患者和15名健康人为研究对象,每例受试者又分为变应原刺激组和未经变应原刺激的自体对照组,采用半定量-逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组受试者 PBMC 培养后 T-bet mRNA、GATA-3mRNA、FOXP3 mRNA 的表达水平。结果哮喘患者 PBMC 中 FOXP3、T-bet 的表达水平分别为0.3±0.4、0.42±0.24,与健康人(0.4±0.3、0.39±0.37)比较差异无统计学意义(t 值分别为0.78、0.38,P均>0.05),哮喘患者 GATA-3(1.0±0.3)的表达与健康人(0.8±0.3)比较差异有统计学意义(t=2.27,P0.05);哮喘患者 PBMC 经变应原刺激后 T-bet、GATA-3的表达分别为0.49±0.42、2.1±1.7,与未经变应原刺激的自体对照组(0.16±0.06、0.6±0.3)比较差异有统计学意义(t 值分别为3.72、5.15,P 均0.05);经变应原刺激后哮喘患者 PBMC 中 AT-bet、AGATA-3、AFOXP3的表达分别为0.33±0.39、1.58±1.44、0.11±0.32,与健康人(0.03±0.40、0.11±0.53、0.43±0.66)比较差异有统计学意义(t 值分别为2.30、3.79、2.08,P 分别<0.05、<0.01、<0.05);哮喘患者ΔFOXP3与ΔGATA-3、ΔT-bet 表达水平呈负相关(r 值分别为-0.62、-0.46,P 分别<0.01、<0.05)。结论哮喘患者经变应原刺激后,既存在 Th2特定转录因子 GATA-3的优势表达,也存在 Th1特定转录因子 T-bet 的优势表达,同时还存在调节性 T 淋巴细胞(Treg)特定转录因子 FOXP3的表达低下。

关键词：哮喘粉尘螨

粉尘螨滴剂治疗儿童变应性鼻炎的疗效及安全性

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中国临床药理学杂志 2014年第11期30卷 991-993页

作者：李勇阮桂英储洪娟江波陶宝鸿浙江台州学院附属市立医院耳鼻咽喉科浙江台州318000 浙江台州学院附属市立医院儿内科浙江台州318000

目的评价舌下含服标准化粉尘螨滴剂治疗儿童变应性鼻炎2年疗效及其安全性。方法螨过敏变应性鼻炎儿童240例随机分为观察组和对照组,各120例,对照组氯雷他定或/和康酸莫米松药物治疗,观察组加用舌下含服粉尘螨滴剂,疗程2年,评价治疗前后... 详细信息

目的评价舌下含服标准化粉尘螨滴剂治疗儿童变应性鼻炎2年疗效及其安全性。方法螨过敏变应性鼻炎儿童240例随机分为观察组和对照组,各120例,对照组氯雷他定或/和康酸莫米松药物治疗,观察组加用舌下含服粉尘螨滴剂,疗程2年,评价治疗前后症状评分和药物评分及安全性。结果 2年后,观察组患儿症状评分和药物评分为(3.46±0.85),(0.28±0.43)分,较治疗前的(10.76±1.08),(1.28±0.68)分均明显减少(P均螨滴剂治疗尘螨引起的儿童变应性鼻炎有效,并有较好的安全性。

关键词：鼻炎变应性免疫治疗粉尘螨疗效评价

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粉尘螨抗原免疫治疗小鼠结肠癌的初步研究

粉尘螨抗原免疫治疗小鼠结肠癌的初步研究

作者：姚添淇南昌大学

学位级别：硕士

结肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居高不下，全球每年有120万例新增结肠癌患者，目前对结肠癌的治疗仍然以手术、放疗和化疗为主。我们研究发现结肠癌患者中Treg细胞比例较正常人高，而在过敏性疾病患者中Treg细胞比例... 详细信息

结肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居高不下，全球每年有120万例新增结肠癌患者，目前对结肠癌的治疗仍然以手术、放疗和化疗为主。我们研究发现结肠癌患者中Treg细胞比例较正常人高，而在过敏性疾病患者中Treg细胞比例较正常人低。本研究使用粉尘螨粗蛋白和Der f2重组蛋白用于治疗小鼠结肠癌模型以及对治疗效果进行一系列检测。方法：首先制备和鉴定粉尘螨粗蛋白和表达纯化Der f2重组蛋白，摸索建立合适的小鼠结肠癌模型;制定免疫治疗方案后进行建模及治疗，监测小鼠肿瘤生长状况;处死小鼠后，对小鼠肿瘤进行称重。用流式细胞的方法检测CD8+T细胞比例及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例;用荧光定量PCR的方法检测Foxp3转录水平;分别用Western-blot印迹杂交和免疫组化检测小鼠肿瘤组织内Foxp3蛋白水平。结果：摸索和建立了合适的小鼠结肠癌模型;成功制备和鉴定了粉尘螨粗蛋白以及表达纯化的Der f2重组蛋白，并用于小鼠结肠癌模型的治疗;经过治疗后，治疗组小鼠肿瘤生长速度均减缓，其肿瘤重量均低于未治疗组;经流式细胞检测，治疗组小鼠体内CD8+T细胞比例上升，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例下降，与未治疗组相比，治疗组小鼠体内Foxp3转录水平均明显减低;Western-blot和免疫组化检测结果显示治疗组小鼠肿瘤中Foxp3蛋白水平均降低。结论：本实验结果表明粉尘螨粗蛋白和Der f2重组蛋白均能有效治疗小鼠结肠癌模型，但其分子机理有待进一步实验证明。用粉尘螨抗原治疗结肠癌有望成为癌症的免疫治疗新方法。

关键词：结肠癌粉尘螨 Treg细胞 Foxp3

屋尘螨与粉尘螨变应原交叉反应的分子基础分析

同方学位论文库评论

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中国生物制品学杂志 2015年第9期28卷 902-905页

作者：李喆张影徐颖华辛晓芳中国食品药品检定研究院北京100050

目的从基因及蛋白水平上分析屋尘螨与粉尘螨变应原交叉反应的分子基础。方法从Allergen Database中下载屋尘螨与粉尘螨已知共有的同组别变应原基因的核苷酸及蛋白质的氨基酸序列,采用生物信息学工具进行序列的清理、比对及遗传距离的计... 详细信息

目的从基因及蛋白水平上分析屋尘螨与粉尘螨变应原交叉反应的分子基础。方法从Allergen Database中下载屋尘螨与粉尘螨已知共有的同组别变应原基因的核苷酸及蛋白质的氨基酸序列,采用生物信息学工具进行序列的清理、比对及遗传距离的计算与分析。结果屋尘螨与粉尘螨共有13组共有的变应原组别,分别为组1、2、3、6、7、8、10、11、14、15、18、20和21。以遗传距离0.20作为阈值,组1、2、7、10、11、14、15、18及20在阈值以下,其他组别高于阈值。结论总体上描述了屋尘螨与粉尘螨共有组别变应原的变应原性,分析了各个组别潜在的交叉反应的分子基础,除组6、8及21外,其他组别的过敏原均具有较高的组内同源性,对今后不同组别变应原的研究具有借鉴意义。

关键词：屋尘螨粉尘螨交叉反应变应原遗传距离