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胶体金免疫层析法快速检测食品中的米酵菌酸

中国食品学报 2023年第2期23卷 309-318页

作者：曹雪铭徐振林苏燕瑜王宇雷红涛肖剑华南农业大学广东省食品质量安全重点实验室广州510642 广州市食品检验所广州510410

制备特异性识别米酵菌酸的单克隆抗体,并以胶体金标记用作示踪物,建立胶体金免疫层析快速检测方法。研究胶体金标记体系pH值、抗原、抗体质量浓度、离子强度、表面活性剂以及样品前处理方法等对胶体金层析卡性能的影响。结果表明:在最... 详细信息

制备特异性识别米酵菌酸的单克隆抗体,并以胶体金标记用作示踪物,建立胶体金免疫层析快速检测方法。研究胶体金标记体系pH值、抗原、抗体质量浓度、离子强度、表面活性剂以及样品前处理方法等对胶体金层析卡性能的影响。结果表明:在最适条件下,所建立的胶体金免疫层析方法对米酵菌酸的定量检出限为1.2μg/kg,线性范围1.8~7.2μg/kg,定性检出限16.0μg/kg。该方法特异性良好,与食品中常见的毒素无交叉反应,对银耳、木耳和米粉等样品的添加回收率在80.2%~101.2%之间,相对标准偏差小于6.4%,且结果与LC-MS/MS法一致。该方法具有准确、灵敏、简便、快速和低成本等特点,可以满足食品中米酵菌酸现场大批量筛查的需求。

关键词：米酵菌酸单克隆抗体胶体金免疫层析快速检测

基于硝基修饰的锆基金属有机框架材料的分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定食品中的米酵菌酸

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分析化学 2023年第6期51卷 1024-1032页

作者：方兰云江艳华李继革邱巧丽金米聪张丹丹张玉梅宁波市疾病预防控制中心浙江省微量有毒化学物健康风险评估技术研究重点实验室中国科学院宁波材料技术与工程研究所宁夏医科大学基础医学院

建立了基于硝基修饰的锆基金属有机框架材料(NO2-MOF)的分散固相萃取(DSPE)测定食品中米酵菌酸的方法。采用扫描电镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、热重分析(TGA)、X射线衍射仪(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)和氮气吸附实验等对合成... 详细信息

建立了基于硝基修饰的锆基金属有机框架材料(NO2-MOF)的分散固相萃取(DSPE)测定食品中米酵菌酸的方法。采用扫描电镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、热重分析(TGA)、X射线衍射仪(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)和氮气吸附实验等对合成的MOF材料进行了表征，结果表明制得了一种比表面积大、结构稳定的MOF材料。此材料与米酵菌酸分子之间存在静电作用、π-π堆积效应和氢键等分子间弱相互作用，基于此实现了对目标物米酵菌酸的选择性吸附。考察了此材料作为DSPE吸附剂吸附米酵菌酸的实验条件，包括溶液pH值、吸附剂分散方式、吸附剂用量、萃取时间以及解吸附溶剂类型等，结合高效液相色谱-串联质谱技术，建立了米酵菌酸的检测方法，方法的定量限为1.6μg/kg，检出限为0.5μg/kg。此方法前处理时间短、灵敏度高、对环境友好，木耳和米粉中米酵菌酸的加标回收率为75%～96%，准确度高，为相关食品中痕量米酵菌酸的测定提供了技术参考。

关键词：硝基修饰锆基金属有机框架材料分散固相萃取高效液相色谱-质谱米酵菌酸食品

稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法快速检测血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸

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分析化学 2022年第4期50卷 634-642页

作者：方力邱凤梅舟山市疾病预防控制中心浙江省海产品健康危害因素关键技术研究重点实验室舟山市普陀区疾病预防控制中心

建立了稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法快速检测血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸的方法。样品经乙腈蛋白沉淀净化、反相C18色谱柱分离后，采用电喷雾串联质谱，选择反应监测（SRM）模式下检测，溶剂标准曲线内标法定量。在2.0～40... 详细信息

建立了稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法快速检测血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸的方法。样品经乙腈蛋白沉淀净化、反相C18色谱柱分离后，采用电喷雾串联质谱，选择反应监测（SRM）模式下检测，溶剂标准曲线内标法定量。在2.0～400μg/L浓度范围内，米酵菌酸和异米酵菌酸呈良好的线性关系，相关系数大于0.9984；方法定量限（10倍基线噪声对应的浓度）为2.0μg/L; 2.0、10.0、40.0和200.0μg/L的加标水平下，方法的日内和日间回收率分别为89.7%～109.6%和86.2%～104.2%，日内与日间相对标准偏差均小于9.8%。本方法简单、快速、灵敏、特异性强，可满足人体生物样本中米酵菌酸和异米酵菌酸的公共卫生应急检测或临床诊断检测要求。

关键词：同位素稀释血浆尿液液相色谱-串联质谱法米酵菌酸

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植物乳杆菌对米酵菌酸的吸附特性研究

食品工业科技 2023年第2期44卷 299-306页

作者：刘鹏张雯欧杰李柏林上海海洋大学食品学院上海201306 上海市质量监督检验技术研究院/国家食品质量监督检验中心(上海) 上海200233 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室上海201306

为了探究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)X1对米酵菌酸(Bongkrekic acid,BA)的吸附特性及其影响因素。本文采用高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)的方法测定菌体对米酵菌酸吸附率。实验考察了时间、温度... 详细信息

为了探究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)X1对米酵菌酸(Bongkrekic acid,BA)的吸附特性及其影响因素。本文采用高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)的方法测定菌体对米酵菌酸吸附率。实验考察了时间、温度、pH、菌体浓度、米酵菌酸浓度及在模拟胃肠道环境下对米酵菌酸吸附效果的影响,并对吸附过程进行热力学与动力学拟合。结果表明,菌株吸附米酵菌酸短时高效,1 h后达到饱和;温度、菌体浓度与米酵菌酸浓度升高均促进吸附进行且吸附后不易解吸。温度37℃、菌体浓度6 g·L^(-1)与米酵菌酸浓度10 mg·L^(-1)为最佳吸附条件,其吸附率分别为52.70%、54.12%与48.53%;酸性环境有利于米酵菌酸的吸附,pH为3时,吸附率与单位吸附量最高;在模拟胃液与肠液环境中吸附效果减弱。吸附过程符合Langmuir方程和准二级动力学方程,且为单分子层吸附。综合热力学与动力学分析可得,吸附为自发、放热的过程,并且同时存在物理吸附与化学吸附。因此,植物乳杆菌X1作为米酵菌酸吸附剂有潜在的应用潜力。

关键词：植物乳杆菌米酵菌酸吸附热力学动力学

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米酵菌酸多克隆抗体的制备

卫生研究 1995年第2期24卷 93-95页

作者：刘秀梅余东敏文卫华王玉华中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所

米酵菌酸是椰毒假单胞菌及其酵米菌亚种的毒性代谢产物之一，是引起酵米面和变质银耳等多种食品中毒致死的主要病因。作者成功地制备了米酵菌酸牛血清白蛋白结合物（ＢＡＢＳＡ）、卵清蛋白结合物（ＢＡ－ＥＡ），并在国内首次获得了抗... 详细信息

米酵菌酸是椰毒假单胞菌及其酵米菌亚种的毒性代谢产物之一，是引起酵米面和变质银耳等多种食品中毒致死的主要病因。作者成功地制备了米酵菌酸牛血清白蛋白结合物（ＢＡＢＳＡ）、卵清蛋白结合物（ＢＡ－ＥＡ），并在国内首次获得了抗ＢＡ半抗原的多克隆抗体，血清效价可达１：１２×１０４和１：８×１０４。建立了检测ＢＡ的直接和间接竞争ＥＬＩＳＡ法。为进一步研制抗ＢＡ的单克隆抗体、探寻特异性的免疫治疗手段提供了有价值的科学基础。

关键词：米酵菌酸多克隆抗体 ELISA方法食品卫生检验

米酵菌酸对小鼠肝和心肌细胞毒性作用的超微结构研究

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电子显微学报 2002年第4期21卷 369-372页

作者：吴洪娟王尊哲郭文君李锋杰潍坊医学院形态学实验室山东潍坊261042 潍坊医学院病理学教研室山东潍坊261042

目的 :观察米酵菌酸对小鼠肝、心肌细胞毒性作用的超微结构改变 ,探讨米酵菌酸中毒的机理。方法 :小鼠腹腔注射不同剂量的米酵菌酸 ,2h后取其肝和心肌组织 ,通过电镜观察其细胞超微结构的改变。结果 :电镜下可见肝细胞和心肌细胞的线粒... 详细信息

目的 :观察米酵菌酸对小鼠肝、心肌细胞毒性作用的超微结构改变 ,探讨米酵菌酸中毒的机理。方法 :小鼠腹腔注射不同剂量的米酵菌酸 ,2h后取其肝和心肌组织 ,通过电镜观察其细胞超微结构的改变。结果 :电镜下可见肝细胞和心肌细胞的线粒体肿胀 ,内嵴断裂、模糊或消失 ,基质局部或全部空亮 ,呈囊泡样变 ,偶见其中含髓样小体。上述线粒体内嵴和膜结构的病变随米酵菌酸剂量的增加而加重。结论 :米酵菌酸对小鼠肝、心肌细胞毒性作用以线粒体的损伤较为突出 ,因此我们认为 ,线粒体内膜的破坏造成线粒体的功能障碍 ,影响细胞呼吸。

关键词：毒性作用米酵菌酸肝细胞心肌细胞中毒线粒体超微结构线粒体中毒机理椰毒假单孢菌

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米酵菌酸的生物合成及其机制研究进展

卫生研究 2012年第2期41卷 341-344页

作者：王岗郭云昌裴晓燕中国疾病预防控制中心营养与食品安全所北京100021

米酵菌酸(BA)是一种可引起致死性食物中毒的脂类毒素,由于其高致死性而备受关注。过去大量研究集中于米酵菌酸的毒理作用、检测方法以及产毒菌株产生米酵菌酸的条件等,而其生物合成过程及其机制仍不明确,有待深入研究。从20世纪70年代... 详细信息

米酵菌酸(BA)是一种可引起致死性食物中毒的脂类毒素,由于其高致死性而备受关注。过去大量研究集中于米酵菌酸的毒理作用、检测方法以及产毒菌株产生米酵菌酸的条件等,而其生物合成过程及其机制仍不明确,有待深入研究。从20世纪70年代开始特别是近年来,米酵菌酸又被用作线粒体通透性转换孔的抑制物而广泛应用于细胞凋亡、损伤方面的研究。

关键词：米酵菌酸生物活性生物合成化学合成

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米酵菌酸对培养人膀胱癌细胞超微结构的影响

解剖学杂志 2003年第2期26卷 126-129页

作者：李锋杰王尊哲吴洪娟张艳玲安毅潍坊医学院形态学实验室潍坊261042

目的:探讨米酵菌酸对人膀胱癌细胞毒性、杀伤作用及其超微结构的影响。方法:将不同浓度的米酵菌酸加入培养的人膀胱癌细胞,24h后,用光镜、透射电子显微镜分析其形态学改变。结果:光镜下可见米酵菌酸低浓度组细胞体积变小,核浆比增大,培... 详细信息

目的:探讨米酵菌酸对人膀胱癌细胞毒性、杀伤作用及其超微结构的影响。方法:将不同浓度的米酵菌酸加入培养的人膀胱癌细胞,24h后,用光镜、透射电子显微镜分析其形态学改变。结果:光镜下可见米酵菌酸低浓度组细胞体积变小,核浆比增大,培养液中死亡细胞增多;高浓度组细胞体积进一步变小,核浆比进一步增大,细胞生长受到显著抑制。电镜下多数线粒体嵴断裂、空泡样变和髓样变;核染色质边集,核周隙增宽;粗面内质网脱颗粒。结论:米酵菌酸对人膀胱癌细胞形态及超微结构有显著影响。

关键词：米酵菌酸膀胱癌细胞毒性杀伤作用超微结构

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定六神曲中的米酵菌酸

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色谱 2019年第9期37卷 963-968页

作者：王俊虎乔勇升王建朱渊泰州市食品药品检验所

基于超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立了快速测定六神曲中生物毒素米酵菌酸残留的检测方法。样品首先以甲醇作为提取溶剂进行超声提取,再用氨水调节pH值至8,过滤,滤液用Oasis MAX强阴离子交换固相萃取柱处理。采用Waters HSS... 详细信息

基于超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立了快速测定六神曲中生物毒素米酵菌酸残留的检测方法。样品首先以甲醇作为提取溶剂进行超声提取,再用氨水调节pH值至8,过滤,滤液用Oasis MAX强阴离子交换固相萃取柱处理。采用Waters HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8 μ m)分离,以乙腈-含0.1%(体积分数)甲酸的10 mmoL/L 甲酸铵溶液为流动相,采用电喷雾电离(ESI)源电离,电离模式为负离子模式,质谱检测模式为多反应监测(MRM)模式。在最佳条件下,米酵菌酸在0.5~100 μ g/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数( R 2)>0.99。方法的加标回收率为80.6%~85.3%,日内和日间精密度分别为4.2%~6.8%和8.2%~13.2%。方法的检出限(LOD, S/N =3)和定量限(LOQ, S/N =10)分别为0.4 μ g/kg 和1.2 μ g/kg 。实际样品测定中发现了六神曲中存在米酵菌酸残留的现象,为保健食品和中药材中生物毒素的风险监控提供了重要的科技支撑。该方法简单、快速、灵敏度高,适用于六神曲中生物毒素米酵菌酸残留量的测定。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱生物毒素米酵菌酸六神曲