检索结果-南通市图书馆

用于DNA分离的毛细管电泳无胶筛分介质研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国法医学杂志 2012年第1期27卷 41-44页

作者：王燕赵兴春姜伯玮孙敬叶健中国人民公安大学北京100038 公安部物证鉴定中心北京100038 中国科学院上海应用物理研究所上海201806

毛细管电泳是一种在生命科学应用最为广泛的生物分子分离技术,目前已广泛应用于DNA测序,SNP检测,DNA片段分析等。筛分介质是毛细管电泳性能的关键因素,筛分介质的种类、结构、分子量及所形成的溶液决定着生物分子的迁移特性、分辨率、... 详细信息

毛细管电泳是一种在生命科学应用最为广泛的生物分子分离技术,目前已广泛应用于DNA测序,SNP检测,DNA片段分析等。筛分介质是毛细管电泳性能的关键因素,筛分介质的种类、结构、分子量及所形成的溶液决定着生物分子的迁移特性、分辨率、读出长度、重现性等参数,对分离结果有重大影响。本文对近年来用于DNA分离的无胶筛分介质的研究和应用情况进行综述,希望能对相关研究和鉴定提供参考和借鉴。

关键词：法医遗传学毛细管电泳筛分介质聚合物

含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析测试学报 2009年第8期28卷 890-895页

作者：刘勇王荣高岚贾正平辛晓婷谢华马骏兰州大学生命科学学院甘肃兰州730000 兰州军区兰州总医院临床药理基地甘肃兰州730050

探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准... 详细信息

探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。

关键词：毛细管电泳金纳米粒子 DNA片段筛分介质

基于国产遗传分析仪的毛细管电泳筛分介质的制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国法医学杂志 2017年第6期32卷 618-622页

作者：俞丽娟聂燕钗姜伯玮赵颖张涛金川公安部第一研究所北京102200

目的制备一种毛细管电泳筛分介质,将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上。方法通过聚合反应、冷冻干燥得到白色固体聚丙烯酰胺(LPA),经溶胶缓冲液溶胀后获得所需的毛细管电泳筛分介质。对其分子量、结构等关键性能指标进行表征;并将其应用... 详细信息

目的制备一种毛细管电泳筛分介质,将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上。方法通过聚合反应、冷冻干燥得到白色固体聚丙烯酰胺(LPA),经溶胶缓冲液溶胀后获得所需的毛细管电泳筛分介质。对其分子量、结构等关键性能指标进行表征;并将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上,根据空间校正、光谱校正及STR检测结果对其筛分性能进行评价。结果制备的筛分介质Mw 1.8×105Da,Mn 1.2×105Da,多分散性1.5;结构正确且纯度高;在GA118-16A型遗传分析仪上能够建立空间校正、光谱校正文件;能够有效分离相差1bp的DNA片段,峰型尖锐、无杂峰、无拖尾、无丢峰现象。结论该方法制备的筛分介质完全可应用于GA118-16A等国产遗传分析仪。

关键词：法医物证学毛细管电泳筛分介质国产遗传分析仪 STR分型

毛细管电泳分析肺癌基因及相关蛋白质的方法学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

毛细管电泳分析肺癌基因及相关蛋白质的方法学研究

作者：刘勇兰州大学

学位级别：硕士

肿瘤是多因素作用下,多阶段演化而成。随着各种检测技术的发展及学科之间的渗透,一些肿瘤生物指标从最初的分子生物学检测发展到化学检测。本论文以分析化学的检测方法毛细管电泳(CE)对肺癌DNA,蛋白质进行分析,并对聚环氧乙烷(PEO)中添... 详细信息

肿瘤是多因素作用下,多阶段演化而成。随着各种检测技术的发展及学科之间的渗透,一些肿瘤生物指标从最初的分子生物学检测发展到化学检测。本论文以分析化学的检测方法毛细管电泳(CE)对肺癌DNA,蛋白质进行分析,并对聚环氧乙烷(PEO)中添加纳米材料金纳米粒子(GNPs)后的新型筛分介质进行研究。第一部分从DNA角度以CE、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)结合经典突变点分析方法：单链构象多态性(SSCP)和限制性片段长度多态性(RFLP)对肺癌及癌旁正常组织p53基因第七外显子突变情况进行检测,从上样量、时间、检测限和检出率四个方面进行比较。检出率由高到低分别为：CE-SSCP>PAGE-SSCP>CE-RFLP>PAGE-RFLP。CE-SSCP可作为大规模肺癌早期诊断DNA指标简便可靠的方法。第二部分首先建立无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光(NGS-CE-LIF)检测蛋白质的方法,改进后对提取肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物(变性／活性)差异进行检测。该法可对6.5～200 kDa范围蛋白质进行分离,具有筛分介质浓度调节简便、分离效果好、时间短等优点,理论塔板数(N)均值为9.12×104／m,检出限为2.8×10-4mg／ml。肺癌组织与正常组织相比有较明显蛋白质种类及表达量差异,且主要集中在20～116 kDa。常用蛋白质分析方法：变性SDS-PAGE及活性蓝绿温和胶电泳(BN-PAGE)结果与NGS-CE-LIF结果大致相同,并且PAGE检测不出的蛋白质CE-LIF也能检测出来。第三部分合成13 nm的GNPs,透射电子显微镜(TEM)对GNPs尺寸进行测量,以PEO-GNPs-TBE(Tris-Boric acid-EDTA)作为CE筛分介质,考察分离参数：筛分介质浓度,分离电压,温度和筛分介质pH值对DNA片段分离的影响。用Ogston模型、偏爬行模型解释相关实验现象,对分离机理进行初步研究。结果表明添加GNPs的这种新型筛分介质分离效果好且时间短,适于分离较宽范围(100～10000 bp)的DNA片段。分离机理较符合偏爬行模型,但又有所不同。DNA分子的电泳迁移率与尺寸成反比,且呈一定的线性关系：用线性关系y=-kx+b能更好解释这种筛分介质分离DNA片段的机理。 CE在DNA,蛋白质分析方面的应用,具有高效、快速、灵敏度高等优点;新型纳米材料的应用也为检测方法的改进及检测效率的提高提供了可能。前期的基础工作可为芯片、质谱等各种技术的联用及肿瘤检测提供科学依据。

关键词：毛细管电泳肺癌 p53基因 DNA 蛋白质筛分介质

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

单链构象多态性毛细管电泳分析研究进展

生命科学研究 2006年第S1期10卷 10-14页

作者：陈巧云王荣贾正平贾海谢华兰州军区兰州总医院全军临床药理基地

基因突变的检测在临床疾病诊断中起十分重要的作用.单链构象多态性(Single Strand Conform ationPolym orphism,SSCP)分析是检测突变最流行的方法之一.SSCP分析与毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)相结合的技术更是具有灵敏度... 详细信息

基因突变的检测在临床疾病诊断中起十分重要的作用.单链构象多态性(Single Strand Conform ationPolym orphism,SSCP)分析是检测突变最流行的方法之一.SSCP分析与毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)相结合的技术更是具有灵敏度高、花费低、简单、快速的优点.目前,这项技术已应用于人类原癌基因、抑癌基因以及其它致病基因的突变检测.主要综述了各种参数对CES-SCP分析的影响以及CES-SCP分析技术将来的发展方向.

关键词：毛细管电泳单链构象多态性荧光标记筛分介质毛细管涂层

毛细管电泳检测基因突变方法学及其在肺癌中的应用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

毛细管电泳检测基因突变方法学及其在肺癌中的应用研究

作者：辛晓婷兰州大学

学位级别：硕士

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,它的发生和基因突变密切相关,所以建立分析基因突变的快速灵敏的检测方法至关重要,目前用于检测基因突变的方法多种多样。限制性片段长度多态性(RFLP)常与PCR技术结合用于基因突变的检测,结果往往需要借助... 详细信息

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,它的发生和基因突变密切相关,所以建立分析基因突变的快速灵敏的检测方法至关重要,目前用于检测基因突变的方法多种多样。限制性片段长度多态性(RFLP)常与PCR技术结合用于基因突变的检测,结果往往需要借助电泳技术显示,毛细管电泳(CE)分析方法操作简单、灵敏度高,在基因突变检测领域得到了广泛应用。本论文分成两部分对CE检测基因突变进行研究。第一部分首先通过系统考察筛分介质聚环氧乙烷(PEO)(M=4 500 000)在未涂层和共价涂层的毛细管中分离不同大小和范围DNA片段的能力,建立一套适用于不同大小的双链DNA分离体系。系统研究PEO浓度、pH、电泳温度和电压等因素对双链DNA分离的影响。结果表明未涂层的毛细管对pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ)DNA Marker的分离效果不佳;在共价涂层条件下,能很好的分离pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ)DNAMarker。建立的这套双链DNA片段分离体系在共价涂层条件下最终可以达到同时分离30bp～600bp的双链DNA,符合RFLP分析基因突变的要求。以pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ)Marker标准DNA片段为研究对象,分子量为4 500000的PEO与之前实验室考察的分子量为300 000的PEO相比,分离效果相对较差。因此以PEO(M=300 000)为筛分介质(浓度为3.0%,pH8.2,分离电压为15kV,电泳温度为15℃)分析临床76例肺癌及癌旁正常组织p53基因248、249位密码子和H-ras、K-ras基因12位密码子的限制性片段长度多态性。肺癌病理分型一般为非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)。结果76个样品中,38个正常组织中未检测到相关的基因突变,而在肺癌组织中检测到p53基因在NSCLC和SCLC中突变率分别为75.86%和77.78%;ras基因在NSCLC和SCLC中突变率分别为51.72%和0。并且在10min内检测到了基因的突变情况。第二部分用已经建立的毛细管电泳分离体系,以甲基纤维素(MC)为筛分介质(浓度2.0%,pH值8.0,电场强度为7.5kV,毛细管温度25℃)分析76例肺癌及癌旁正常组织p53基因第249位密码子的限制性片段长度多态性。运用CE与聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)两种方法对肺癌及癌旁正常组织p53基因第249位密码子点突变进行检测,并对其检测结果进行比较。RFLP-CE和RFLP-PAGE检测NSCLC突变率分别为31.03%和20.69%,即RFLP-CE检测基因突变率明显高于RFLP-PAGE。CE-RFLP检测SCLC和正常肺组织则均无1例点突变,而且在NSCLC中p53基因第249位密码子突变与肺癌分化程度无关。并且在20min内检测到了基因的突变情况。建立的CE方法学适于分离小于600bp的DNA片段。CE在检测肺癌基因突变方面检测时间短,且检出率高,初步建立了快速、高分辨率诊断肺癌的方法。

关键词：毛细管电泳肺癌基因突变筛分介质 p53基因 ras基因

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

叠层筛网透筛率计算

矿山机械 2004年第7期32卷 39-40页

作者：游思坤屈东升广州大学机电工程系广东广州510091 四川石油管理局川东钻探公司

The paper introduces the calculating method of filtering ration of vibration multi-layer screen by calculating injection area with injection mold based on software. Pro/E, which provides powerful support for the desig... 详细信息

关键词：振动筛筛网筛分介质设计

无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段的现状与展望

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通讯 2004年第5期15卷 523-526页

作者：余胜兵周平胡继明武汉大学化学与分子科学学院武汉430072

毛细管电泳已DNA片段分离分析的重要手段。本文简述了毛细管电泳中采用无胶筛分介质分离DNA片段的机理研究,介绍了筛分介质近年的研究发展状况,依据分离介质的化学组成,分单聚物、共聚物和混聚物等3个部分进行了评述,并对其发展前景进... 详细信息

毛细管电泳已DNA片段分离分析的重要手段。本文简述了毛细管电泳中采用无胶筛分介质分离DNA片段的机理研究,介绍了筛分介质近年的研究发展状况,依据分离介质的化学组成,分单聚物、共聚物和混聚物等3个部分进行了评述,并对其发展前景进行了展望。

关键词：毛细管电泳无胶筛分 DNA片段分析分离机理筛分介质