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去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性研究

中国组织工程研究 2019年第22期23卷 3542-3548页

作者：张自强张以河安琪徐荣荣李欢王恩博非金属矿物与固废资源材料化利用北京市重点实验室中国地质大学(北京)材料科学与工程学院北京市102200 北京湃生生物科技有限公司北京市102200 北京大学口腔医学院口腔颌面外科北京市100081

背景:Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性主要分布在分子链的端肽区域,可在胶原蛋白提取过程中通过水解或是去除而使其失活,制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,降低其免疫原性。目的:评价去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性。方法:采用酶切、盐析、透析工艺制备去... 详细信息

背景:Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性主要分布在分子链的端肽区域,可在胶原蛋白提取过程中通过水解或是去除而使其失活,制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,降低其免疫原性。目的:评价去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性。方法:采用酶切、盐析、透析工艺制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,通过考马斯亮蓝对牛血清白蛋白染色极限的分析,鉴定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度,依据YY/T 0606.25-2014中规定的方法,利用Quant-IT PicoGreendsDNA Reagent and Kits试剂盒测定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的DNA残留量,利用ELISA试剂盒分析去端肽Ⅰ型胶原蛋白的端肽去除效果,依据YY/T 1561-2017标准检测去端肽Ⅰ型胶原蛋白的α-Gal抗原含量。结果与结论:去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度可达99.8%,DNA残留量为4μg/g,C、N末端肽浓度低于试剂盒检测限,α-Gal抗原含量低于检测限。通过酶切、盐析、透析工艺制备的去端肽Ⅰ型胶原蛋白,可显著去除天然胶原蛋白的免疫原性根源,有效控制胶原蛋白临床应用的免疫原性风险。

关键词：去端肽胶原蛋白 Ⅰ型胶原蛋白免疫原性 DNA残留量端肽 α-Gal抗原胶原纯度

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酶法提取对牛胶原蛋白性质及端肽切除的影响

食品科技 2018年第10期43卷 166-173页

作者：梁健华赖俏荣梁杏广州创尔生物技术股份有限公司广州510000

研究探讨了酶法辅助提取牛筋胶原蛋白的方法。以胶原蛋白提取率、羟脯氨酸的质量浓度、胶原蛋白N-端和C-端剩余率、胶原蛋白结构、酶耐受性和成纤维能力等手段来表征不同提取时间对胶原蛋白性质及端肽切除效果的影响。试验结果表明,当... 详细信息

研究探讨了酶法辅助提取牛筋胶原蛋白的方法。以胶原蛋白提取率、羟脯氨酸的质量浓度、胶原蛋白N-端和C-端剩余率、胶原蛋白结构、酶耐受性和成纤维能力等手段来表征不同提取时间对胶原蛋白性质及端肽切除效果的影响。试验结果表明,当搅拌提取时间为48 h时,胶原蛋白的提取率约为25.67%(湿重,mf),羟脯氨酸的质量浓度约为493.50μg/mL,胶原蛋白N-端和C-端的剩余率分别为为15.50%和30.84%。经胃蛋白酶继续作用后,不同提取时间胶原蛋白的羟脯氨酸释放率在40%～57%;而随着提取时间的延长,胶原蛋白的成纤维能力逐渐减弱。此外,圆二色谱表明,胶原蛋白三螺旋结构未发生变化。这说明,酸酶法搅拌提取48 h,可制备得到提取率高、端肽含量低、具有完整结构的胶原蛋白。

关键词：胶原蛋白提取端肽结构

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胶原蛋白海绵的制备及安全性评价

中国组织工程研究 2022年第22期26卷 3460-3466页

作者：刘超远高田芳黄伟杭州协合医疗用品有限公司浙江省杭州市310018

背景:自动物体提取胶原蛋白并经冻干工艺得到胶原蛋白海绵,可赋予材料良好的临床止血性能,同时可实现在机体中的自身降解,但所提取的胶原蛋白也存在携带病毒及体内免疫原性风险。经过酸酶结合工艺处理去除胶原端肽、并灭活病毒,实现材... 详细信息

背景:自动物体提取胶原蛋白并经冻干工艺得到胶原蛋白海绵,可赋予材料良好的临床止血性能,同时可实现在机体中的自身降解,但所提取的胶原蛋白也存在携带病毒及体内免疫原性风险。经过酸酶结合工艺处理去除胶原端肽、并灭活病毒,实现材料良好的生物安全性。目的:规模化生产制备胶原蛋白海绵,并对其进行免疫原性及病毒灭活有效性的整体生物安全性评价。方法:通过酸酶结合法从牛跟腱中提取胶原蛋白,经冷冻干燥工艺得到胶原蛋白止血海绵。将1,4片胶原蛋白海绵分别埋植于Wistar大鼠腹部皮下,埋植1,4,8,12周后对大鼠体征、血常规、T淋巴细胞增殖、免疫球蛋白含量等指标进行检测。取3批次的牛跟腱粉碎后中间体样品,分别浸泡于伪狂犬病毒、水泡性口炎病毒、猪细小病毒和猪脑心肌炎病毒液中,检验酸酶结合法处理的胶原蛋白海绵对病毒灭活的有效性。结果与结论:(1)于无菌车间规模化提取胶原蛋白,经冷冻干燥后得到胶原蛋白海绵,并完成内外包装和辐照灭菌的生产全过程;(2)埋植1,4片胶原蛋白海绵大鼠的生理体征、血常规、NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖状态及免疫球蛋白含量等指标均表现正常;(3)酸酶法工艺灭活的3批次牛跟腱粉碎后中间体样品均无可以检测到的病毒,可使病毒滴度下降4个logs以上;同时,对未能检测到的病毒滴度样品进行了敏感细胞接种盲传3代,结果未显示细胞病变;(4)免疫原性和病毒灭活检测表明,所制备的胶原蛋白止血海绵有着良好的生物安全性。

关键词：胶原蛋白海绵止血材料端肽免疫原性冷冻干燥酸酶结合法病毒灭活

乳腺癌骨转移患者溶骨性骨代谢指标与治疗效果的关系

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中华肿瘤杂志 2009年第12期31卷 911-915页

作者：李淑芬王晓蕊王忱陈瑛任丽崔林佟仲生天津医科大学附属肿瘤医院乳腺肿瘤内科国家教育部乳腺癌防治重点实验室 300060 天津医科大学附属肿瘤医院检验科 300060

目的探讨特异性的溶骨性骨代谢指标血Ⅰ型胶原吡啶交联羧基末端肽（sICTP）、尿Ⅰ型胶原吡啶交联氨基末端肽（uNTx）和尿吡啶酚（uPyd）与乳腺癌骨转移患者治疗反应的关系。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA），测定120例乳腺癌患者的sI... 详细信息

目的探讨特异性的溶骨性骨代谢指标血Ⅰ型胶原吡啶交联羧基末端肽（sICTP）、尿Ⅰ型胶原吡啶交联氨基末端肽（uNTx）和尿吡啶酚（uPyd）与乳腺癌骨转移患者治疗反应的关系。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA），测定120例乳腺癌患者的sICTP、uNTx和uPyd，比较其在骨转移和无骨转移患者中浓度的差别，并对乳腺癌骨转移患者进行随访，比较患者治疗前后sICTP、uNTx和uPyd指标与治疗效果的关系。结果骨转移组患者的sICTP、uNTx和uPyd水平均明显高于无骨转移组（P〈0．01），56例乳腺癌骨转移患者的sICTP、uNTx和uPyd指标间两两相关（均r〉0．5，P〈0．01）。获得随访的45例乳腺癌骨转移患者中，临床受益组25例，sICTP、uNTx和uPyd治疗3个月后明显下降（P=0．025，P〈0．001，P〈0．001）。病情进展组20例，治疗3个月后，sICTP、uNTx和uPyd无明显变化（P〉0．05）；而病情进展后，sICTP、uNTx和uPyd明显升高（P=0．011，P=0．002，P=0．002）。Logistic回归分析结果显示，uPyd和uNTx治疗后降低的患者治疗收益的概率增加（OR=17．0，P=0．019；OR=16．7，P=0．015），而治疗后sICTP指标下降与治疗受益无关（P=0．841）。结论sICTP、uNTx和uPyd可作为乳腺癌骨转移患者评价疗效和转归监测的辅助指标。

关键词：乳腺肿瘤骨转移 Ⅰ型胶原吡啶交联羧基末端肽 Ⅰ型胶原吡啶交联氨基末端肽吡啶酚

唑来膦酸联合经皮球囊椎体成形术治疗骨质疏松椎体压缩性骨折疗效及对血清(TRACP)5 b、CTX水平影响

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中国伤残医学 2023年第5期31卷 43-46页

作者：宁志勇吴川市人民医院广东吴川574500

研究唑来膦酸联合经皮球囊椎体成形术治疗骨质疏松椎体压缩性骨折的临床疗效及该联合疗法对血清抗酒石酸酸性磷酸酶[(TRACP)5b]、I型胶原C端肽(CTX)水平的影响。方法:选择我院2019年2月-2021年2月进行治疗的65例骨质疏松椎体压缩性骨折... 详细信息

研究唑来膦酸联合经皮球囊椎体成形术治疗骨质疏松椎体压缩性骨折的临床疗效及该联合疗法对血清抗酒石酸酸性磷酸酶[(TRACP)5b]、I型胶原C端肽(CTX)水平的影响。方法:选择我院2019年2月-2021年2月进行治疗的65例骨质疏松椎体压缩性骨折患者作为研究对象,依据其入院时间将2019年2月-2020年2月入院的32例患者纳入对照组并给予经皮球囊椎体成形术治疗,将2020年3月-2021年2月入院的33例患者纳入观察组并给予唑来膦酸联合经皮球囊椎体成形术治疗。比较2组术前、术后1个月、术后3个月的伤椎椎体高度、后突Cobb,s角度、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分以及血清(TRACP)5b、CTX水平。结果:随访3个月可见,2组术后各时间段的伤椎椎体高度均高于术前,后突Cobb,s角度均小于术前,ODI评分均低于术前,血清(TRACP)5b、CTX水平均低于术前;观察组术后1个月、3个月的伤椎椎体高度与对照组相比较高,ODI评分低于对照组,后突Cobb,s角度小于对照组,(TRACP)5b及CTX水平较对照组低(P<0.05)。结论:于骨质疏松椎体压缩性骨折患者应用经皮球囊椎体成形术治疗期间配合唑来膦酸可进一步改善患者骨代谢功能,加速脊椎恢复进程,对其日常活动能力的改善起到积极影响。

关键词：唑来膦酸经皮球囊椎体成形术骨质疏松椎体压缩性骨折抗酒石酸酸性磷酸酶 I 型胶原 C 端肽