检索结果-南通市图书馆

药物分析杂志 2024年第2期44卷 264-271页

作者：吴白杨刘志浩刘美玲王凌姜静滨州医学院烟台264003 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司烟台264006

目的:建立桥式酶联免疫吸附法测定食蟹猴血清中抗药抗体(anti-drug antibody, ADA)和竞争酶联免疫吸附法测定中和抗体(neutralizing antibody, NAb),并进行方法学验证。方法:桥式酶联免疫吸附法在96孔板预包被泰它西普(代号:RC18),与待... 详细信息

目的:建立桥式酶联免疫吸附法测定食蟹猴血清中抗药抗体(anti-drug antibody, ADA)和竞争酶联免疫吸附法测定中和抗体(neutralizing antibody, NAb),并进行方法学验证。方法:桥式酶联免疫吸附法在96孔板预包被泰它西普(代号:RC18),与待测样品中的抗RC18抗体结合形成复合物,依次加入生物素化的RC18(Biotin-RC18)、辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(SA-HRP)和四甲基联苯胺底物(TMB)显色,终止反应后在酶标仪450 nm/630 nm波长处读取吸收度。竞争酶联免疫吸附法在96孔板预包被B细胞激活因子或增殖诱导配体蛋白,加入与Biotin-RC18预混合的样品,形成B细胞激活因子或增殖诱导配体-抗RC18抗体-Biotin-RC18三者的复合物,依次加入SA-HRP和TMB显色,终止反应后在酶标仪上读取吸收度。结果:桥式酶联免疫吸附法线性范围的精密度≤12.32%,灵敏度为50 ng·mL^(-1),筛选临界阈值为0.937,确证临界阈值为23.62%。竞争酶联免疫吸附法方法线性范围的精密度≤20%,灵敏度为312.50 ng·mL^(-1),针对靶标B细胞激活因子和增殖诱导配体的NAb活性,判断阈值分别为0.79和0.69,可耐受血清中RC18的药物浓度分别为2.5和5μg·mL^(-1)。结论:方法学验证结果表明,桥式酶联免疫吸附法及竞争酶联免疫吸附法均符合临床前生物制品免疫原性研究的要求,可用于食蟹猴血清中ADA及ADA阳性样本NAb的检测。

关键词：泰它西普免疫原性抗药抗体中和抗体桥式酶联免疫吸附法竞争酶联免疫吸附法

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检测大鼠尿金属硫蛋白竞争ELISA法的建立和初步应用

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卫生研究 2007年第6期36卷 682-683页

作者：宁勇陈亮金泰廙复旦大学公共卫生学院劳动卫生教研室上海200032

目的建立竞争酶联免疫吸附法（ELISA）用以检测大鼠尿金属硫蛋白（UMT）的含量。方法用标准MT抗原包被酶标板,加入待测样品或标准MT与包被MT竞争鼠抗MT抗体（一抗）。再加入生物素化抗大鼠IgG（二抗）与一抗进行反应,然后在二抗联与亲... 详细信息

目的建立竞争酶联免疫吸附法（ELISA）用以检测大鼠尿金属硫蛋白（UMT）的含量。方法用标准MT抗原包被酶标板,加入待测样品或标准MT与包被MT竞争鼠抗MT抗体（一抗）。再加入生物素化抗大鼠IgG（二抗）与一抗进行反应,然后在二抗联与亲和素化辣根过氧化物酶使底物显色,根据吸光度值计算样品浓度。结果该方法在150～2.34μg/ml间线性关系良好（r=0.9899）;批内精密度为3.38%～6.43%,批间精密度为5.32%～9.38%;加标回收率为90.13%～96.40%;雄性和雌性大鼠UMT含量分别为17.74μg/mgCr和15.97μg/mgCr。结论该方法简便,灵敏,具有较好的精密度和准确度,可用于大鼠UMT的检测。正常大鼠尿中含有MT,但雄性和雌性大鼠之间UMT无明显差异。

关键词：大鼠尿金属硫蛋白竞争酶联免疫吸附法

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尿微量白蛋白ELISA结果在正常人群中的分布及临床意义

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北京医学 2008年第8期30卷 548-550页

作者：袁越赵丹慧袁润英王娜李成文北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所 100035

目的应用建立的ELISA抗原竞争法测定不同年龄段正常人及糖尿病患者尿微量白蛋白水平。方法建立ELISA抗原竞争法,用同类进口试剂盒对本方法进行质量评价;检测682例正常人及60例糖尿病患者随意尿中微量白蛋白含量。结果尿微量白蛋白标准... 详细信息

目的应用建立的ELISA抗原竞争法测定不同年龄段正常人及糖尿病患者尿微量白蛋白水平。方法建立ELISA抗原竞争法,用同类进口试剂盒对本方法进行质量评价;检测682例正常人及60例糖尿病患者随意尿中微量白蛋白含量。结果尿微量白蛋白标准曲线线性良好,本法测得正常人尿微量白蛋白参考值范围为0～27.9mg/L,平均值为9.68mg/L,男女人群间无显著性差异。正常人14～20岁年龄段尿微量白蛋白为35.2mg/L,60岁和70岁以上两个老年组分别为34.4mg/L和36.9mg/L;60岁以上糖尿病患者的尿微量白蛋白含量显著高于同龄对照组。结论正常人尿微量白蛋白参考值范围为0～27.9mg/L。青春期及60岁以上正常人尿微量白蛋白浓度可达34.4～36.9mg/L;60岁以上糖尿病患者的尿微量白蛋白高于同龄正常人群。

关键词：尿微量白蛋白竞争酶联免疫吸附法参考值

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