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干扰IGF-1R基因表达对肝癌细胞裸鼠移植瘤生长影响研究

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中华肿瘤防治杂志 2015年第19期22卷 1528-1533页

作者：姚敏严晓娣王理王司晔邱历伟姚登福南通大学附属医院临床医学研究中心江苏南通226001 南通大学医学院免疫学教研室江苏南通226001 南通大学医学院医学信息学教研室江苏南通226001

目的分析人肝癌胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R)表达并观察干预其基因转录对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法以免疫组化法分析肝癌组织IGF-1R表达;构建IGF-1R-shRNA真核表达质粒并筛选最有效序列... 详细信息

目的分析人肝癌胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R)表达并观察干预其基因转录对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法以免疫组化法分析肝癌组织IGF-1R表达;构建IGF-1R-shRNA真核表达质粒并筛选最有效序列;转染至肝癌PLC/PRF/5细胞,CCK-8法分析细胞增殖变化;经G418筛选稳定株,接种裸鼠皮下成瘤;依肿瘤体积绘制生长曲线,并经HE染色证实。以荧光定量PCR技术(FQ-RT-PCR)分析IGF-1R mRNA改变,以蛋白质印迹法分析IGF-1R蛋白水平。结果肝癌组IGF-1R阳性率为82.5%,癌周组为42.5%,非癌组为10%;IGF-1R强度组间差异有统计学意义,K-W法检测Hc=51.51,P移植瘤证实,对照组和阴性对照组IGF-1R过表达,分别为7.2±1.1和6.8±1.1,差异无统计学意义,t=0.577,P>0.05;干预组IGF-1R下调为1.8±0.5,显著低于对照组(t=11.184,P移植瘤生长,提示IGF-1R有望成为肝癌基因治疗的有效靶点。

关键词：肝肿瘤癌,肝细胞 IGF一1R 基因沉默移植瘤免疫组织化学

贝母素乙增强阿霉素对胃癌多药耐药裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制研究

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中草药 2014年第5期45卷 686-690页

作者：王云飞顾政一聂勇战韩亚楠魏彦玲金治安石河子大学药学院新疆石河子832002 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆乌鲁木齐830004 第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的研究贝母素乙逆转胃癌细胞多药耐药性(MDR),增强化疗药物对胃癌多药耐药裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其作用机制。方法制备胃癌耐药SGC7901/VCR细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后,ip给药,每2天给药1次,共给药6次。治疗期间观察裸... 详细信息

目的研究贝母素乙逆转胃癌细胞多药耐药性(MDR),增强化疗药物对胃癌多药耐药裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其作用机制。方法制备胃癌耐药SGC7901/VCR细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后,ip给药,每2天给药1次,共给药6次。治疗期间观察裸鼠体质量,游标卡尺测量移植瘤体积。治疗结束后处死裸鼠,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;Western blotting检测药物治疗后移植瘤耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、Cleaved Caspase-3表达水平。结果治疗期间联合用药组移植瘤体积小于模型组,差异显著(P移植瘤的质量,联合用药组移植瘤质量和抑瘤率显著低于模型组(P移植瘤对阿霉素的敏感性,能够显著抑制胃癌耐药移植瘤的生长,其机制可能与降低肿瘤组织中P-gp表达和升高Cleaved Caspase-3的表达相关。

关键词：贝母素乙胃癌多药耐药移植瘤阿霉素 p-糖蛋fLi CleavedCaspase-3

MAGE-3抗原肽脉冲树突状细胞对小鼠胃癌移植瘤的免疫防护作用

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中华医学杂志 2005年第30期85卷 2120-2123页

作者：吕斌刘炳亚张轶陈雪华朱正纲尹浩然林言箴上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所山东大学齐鲁医院普外科200025

目的观察MAGE3抗原肽脉冲的树突状细胞(DC/MAGE3)作为肿瘤疫苗抑制小鼠胃癌移植瘤生长的作用。方法检测了MAGE3抗原肽诱导出的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对小鼠前胃癌细胞株MFC细胞的杀伤活性。在免疫保护实验中先用DC/MAGE3(1×106个细胞/... 详细信息

目的观察MAGE3抗原肽脉冲的树突状细胞(DC/MAGE3)作为肿瘤疫苗抑制小鼠胃癌移植瘤生长的作用。方法检测了MAGE3抗原肽诱导出的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对小鼠前胃癌细胞株MFC细胞的杀伤活性。在免疫保护实验中先用DC/MAGE3(1×106个细胞/只)于小鼠皮下注射免疫两次,然后接种MFC细胞(5×105个细胞/只);在免疫治疗实验中先接种MFC细胞(5×105个细胞/只),然后在皮下注射DC/MAGE3(1×106个细胞/只)两次,并以感冒病毒核蛋白抗原肽脉冲的DC(DC/Nup)及空白DC作为对照,观察小鼠肿瘤的生长情况及其存活期并进行统计学处理。结果(1)MAGE3抗原肽诱导出的CTL细胞对MFC细胞有较高的杀伤活性;(2)在免疫保护实验和免疫治疗实验中DC/MAGE3可以明显地延缓肿瘤的生长,延长小鼠的生存时间(P瘤特异性CTL而具有明显的抗肿瘤活性。

关键词： MAGE-3抗原肽树突状细胞小鼠胃癌移植瘤免疫防护作用

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2009年第12期29卷 1419-1423页

作者：朱黎明涂水平戴强姚玮艳乔敏敏江石湖上海交通大学医学院第三人民医院消化科上海201900 上海交通大学医学院瑞金医院消化科上海200025

目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体... 详细信息

目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD)。结果与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。

关键词： X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1 肝癌腺病毒移植瘤凋亡血管形成

酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2006年第6期28卷 426-428页

作者：贾静陆融傅正邱爽石琳熙简序刘俊燕李会强车绪春姚智天津医科大学免疫学教研室 300070 深圳康哲药业有限公司

目的观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑瘤作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法通过动物模型观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤肿瘤重量及体积的影响；以电镜观察肿瘤细胞超微结构的改变；以免疫组化法观察瘤组... 详细信息

目的观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑瘤作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法通过动物模型观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤肿瘤重量及体积的影响；以电镜观察肿瘤细胞超微结构的改变；以免疫组化法观察瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达；以利用TUNEL法检测瘤组织细胞的凋亡情况。结果给药剂量为80μg·kg^(-1)·d^(-1)和160μg·kg^(-1)·d^(-1)时,酪丝缬肽可以显著抑制裸小鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率分别为64．02%和66．27%,与生理盐水及相应氨基酸混合物组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。酪丝缬肽可引起肿瘤细胞超微结构改变,导致肿瘤细胞广泛坏死和凋亡。酪丝缬肽给药组与生理盐水组比较,肿瘤组织细胞的PCNA表达明显降低,凋亡细胞明显增多。结论酪丝缬肽可显著抑制人肝癌BEL-7402细胞在裸小鼠体内的生长,抑制肿瘤细胞增殖,促进瘤细胞凋亡。

关键词：酪丝缬肽细胞系,人肝癌BEL-7402 裸小鼠移植瘤

转染TRAIL的内皮祖细胞对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

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癌症 2005年第11期24卷 1312-1316页

作者：周莉闫明霞姚明丰有吉复旦大学附属妇产科医院上海市肿瘤研究所实验病理室上海200032

背景与目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)有广谱的抗瘤作用,且对正常组织细胞无毒性,因此有望应用于肿瘤基因治疗。内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)在体内能定向归巢于肿瘤,参与肿瘤新生血管的建立。本研究以EPC为载体,观察TRAIL转染EPCs对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法:用磁珠分离法从脐血中分离EPCs,并进行体外培养扩增。用脂质体将带有GFP-TRAIL基因的质粒转入EPCs(TRAIL-EPCs)。将转染后的EPC经尾静脉注入3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。流式细胞仪检测各组中绿色荧光蛋白(Green-Fluoroprotein,GFP)表达情况,观察各组移植瘤体积的变化,计算抑瘤率。结果:静脉注射转染TRAIL后的EPC,对卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长具有明显抑制作用,对照组裸鼠的瘤重(0.226±0.209)g,而TRAIL细胞因子治疗组、GFP-TRAIL转染组裸小鼠的瘤重分别为(0.118±0.164)g、(0.075±0.084)g;TRAIL细胞因子组的抑瘤率为48.1%,TRAIL转染组抑瘤率为66.9%。肿瘤组织石蜡切片HE染色检查显示TRAIL细胞因子组,TRAIL转染组转对照组有更多的出血坏死区。TRAIL细胞因子组,TRAIL转染组均无明显毒副作用的表现。结论:TRAIL细胞因子和TRAIL-EPCs对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤均有明显的抑制作用,EPC在裸鼠皮下移植瘤模型体内有一定的导向作用,有希望成为基因治疗的载体。

关键词：卵巢肿瘤,上皮性基因治疗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体内皮祖细胞裸鼠移植瘤

荧光素酶标记小鼠结肠癌细胞建立活体成像移植瘤模型

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中国免疫学杂志 2019年第17期35卷 2106-2111页

作者：罗华灶李雪依含谢君朱乃硕复旦大学生命科学学院微生物感染与分子免疫学实验室上海200438 复旦大学生物医学研究院上海200032

目的:建立稳定表达荧光素酶的小鼠结肠癌细胞株并构建适用于小动物活体成像系统观察的BALB/c鼠皮下移植瘤模型。方法:通过基因重组的方式,将外源基因插入到逆转录病毒载体上,以工具细胞293T包毒后得到病毒,将携带荧光素酶基因的质粒转... 详细信息

目的:建立稳定表达荧光素酶的小鼠结肠癌细胞株并构建适用于小动物活体成像系统观察的BALB/c鼠皮下移植瘤模型。方法:通过基因重组的方式,将外源基因插入到逆转录病毒载体上,以工具细胞293T包毒后得到病毒,将携带荧光素酶基因的质粒转染到小鼠结肠癌细胞株CT26中,Puromycin筛选出稳定表达荧光素酶的单克隆细胞株。扩增后接种于BALB/c鼠,建立BALB/c鼠皮下移植瘤模型,通过活体动物成像系统监测肿瘤的生长过程。结果:获得了高水平稳定表达荧光素酶的结肠癌单克隆细胞株,该单克隆细胞株与母细胞系CT26具有相似的生长特性。将稳定表达荧光素酶的克隆接种于BALB/c鼠皮下可成瘤,小动物活体成像系统能准确监测肿瘤细胞在体内的生长过程。结论:成功建立了稳定表达荧光素酶的结肠癌单克隆细胞株。采用活体动物成像系统构建的BALB/c鼠皮下结肠癌移植瘤模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。

关键词：荧光素酶 CT26细胞移植瘤活体成像 BALB/c鼠

不同剂量维生素C对C_（57）小鼠Lewis肺癌移植瘤的形成及转移的影响

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营养学报 1995年第4期17卷 383-390页

作者：尤淑瑞张纫华暨南大学医学院营养学教研室澳门政府卫生司食物卫生组

用Ｃ＿（５７）小鼠腋下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞，每天分别灌胃，补充不同剂量维生素Ｃ，研究不同剂量维生素Ｃ对Ｌｅｗｉｓ肺癌移植瘤的形成及转移的影响。结果表明：补充高剂量维生素Ｃ（０．２５ｍｇ·ｇｂｗ￣（－１）·ｄ￣（－１... 详细信息

用Ｃ＿（５７）小鼠腋下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞，每天分别灌胃，补充不同剂量维生素Ｃ，研究不同剂量维生素Ｃ对Ｌｅｗｉｓ肺癌移植瘤的形成及转移的影响。结果表明：补充高剂量维生素Ｃ（０．２５ｍｇ·ｇｂｗ￣（－１）·ｄ￣（－１））对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞皮下移植瘤的形成及肺转移有明显的抑制作用，而补充低剂量维生素Ｃ（０．０５ｍｇ·ｇｂｗ￣（－１）·ｄ￣（－１））则未见明显作用。实验早期，高剂量维生素Ｃ组鼠肝脏内维生素Ｃ含量在三组中最高，可能与其抑瘤效果较好有关。低剂量维生素Ｃ组鼠血浆脂质过氧化物含量显著高于高剂量维生素Ｃ组，血红细胞内超氧化物歧化酶活性则有降低趋势，可能与其抑瘤效果不明显有关。补充高剂量维生素Ｃ并不影响实验鼠体重。

关键词：维生素C 肺癌移植瘤丙二醛趋氧化物歧化酶

KLF17对裸鼠移植瘤生长的影响及其在体调控靶基因的筛选和功能分析

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中国病理生理杂志 2018年第5期34卷 785-792页

作者：蔡兴东赖文佳杨莹张苗黄远顺马洪明暨南大学附属第一医院呼吸内科广东广州510630 暨南大学附属第一医院口腔科广东广州510630 暨南大学附属第一医院健康管理中心广东广州510630

目的:研究Krüppel样因子17(Krüppel-like factor 17,KLF17)在裸鼠移植瘤中的作用并分析KLF17在体调控的靶基因及其功能和参与的信号通路。方法:慢病毒转染技术稳定上调人肺腺癌A549细胞及下调人肺腺癌H322细胞中KLF17的表达。11只BLAB... 详细信息

目的:研究Krüppel样因子17(Krüppel-like factor 17,KLF17)在裸鼠移植瘤中的作用并分析KLF17在体调控的靶基因及其功能和参与的信号通路。方法:慢病毒转染技术稳定上调人肺腺癌A549细胞及下调人肺腺癌H322细胞中KLF17的表达。11只BLAB/c nu/nu裸鼠分为上调组5只和下调组6只,分别通过左、右侧躯体皮下注射KLF17上调和下调的相应细胞及其对照细胞,观察KLF17对裸鼠移植瘤生长的影响;Real-time PCR及免疫组织化学染色分析裸鼠移植瘤组织中KLF17 mRNA及蛋白的表达,转录组测序技术分析上调KLF17表达后裸鼠移植瘤中差异表达的基因,通过The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库分析KLF17调控的差异基因的功能,Gene Ontology和KEGG PATHWAY富集分析差异基因的功能和可能参与的信号通路。结果 :上调A549细胞中KLF17的表达后,其裸鼠移植瘤生长速率显著低于空载体对照组(P移植瘤生长速率及移植瘤重量均显著高于空载体对照组(P移植瘤组织中,过表达组KLF17 mRNA及蛋白显著高于对照空载体组。转录组测序结果显示KLF17可能调控的基因有ras基因同源家族成员V(ras homolog family member V,RHOV)和冠蛋白1C(coronin 1C,CORO1C)等。TCGA数据库中肺腺癌患者10年累计生存时间在RHOV和CORO1C mRNA不同表达组明显不同,高表达RHOV及CORO1C的肺腺癌患者生存时间显著低于其低表达组。Gene Ontology和KEGG PATHWAY富集分析提示KLF17调控的靶基因(差异基因)可能与肿瘤细胞的刺激应答、生长及黏附有关,并且参与了细胞趋化性、黏附及细胞外基质受体相关的信号通路。结论:KLF17抑制裸鼠移植瘤的生长,并下调RHOV和CORO1C等癌基因,参与调控肿瘤黏附及生长相关信号通路。

关键词： Krüppel样因子17 肺腺癌裸鼠移植瘤基因调控