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温郁金醇提物对人耐长春新碱胃腺癌细胞SGC-7901皮下移植瘤的逆转作用及对P糖蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2014年第11期34卷 1347-1353页

作者：蔡利军宋淑萍吕宾孟立娜浙江中医药大学附属第一医院消化内科杭州310006 浙江大学医学院附属邵逸夫医院重症监护室杭州310016

目的通过建立人耐长春新碱胃腺癌细胞SGC-7901（vincristine-resistant gastric cancer SGC-7901 cells,SGC-7901/VCR）裸鼠皮下移植瘤模型探讨温郁金醇提物逆转人胃癌多药耐药的作用及可能机制。方法运用四甲基偶氮唑蓝法（methyl thia... 详细信息

目的通过建立人耐长春新碱胃腺癌细胞SGC-7901（vincristine-resistant gastric cancer SGC-7901 cells,SGC-7901/VCR）裸鼠皮下移植瘤模型探讨温郁金醇提物逆转人胃癌多药耐药的作用及可能机制。方法运用四甲基偶氮唑蓝法（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法对SGC-7901/VCR耐药性进行鉴定,50只BALB/c裸小鼠,采用组织块法建立人胃癌SGC-7901/VCR皮下移植瘤模型,2-3周后选取瘤体大小相近裸鼠36只,按随机数字表法分为模型组,长春新碱（vincristine,VCR）组,温郁金低、高剂量组及温郁金低、高剂量联合VCR组,共6组,每组6只。模型组给予生理盐水腹腔注射10m L/kg,2天1次;VCR组给予腹腔注射VCR 0.28 mg/kg,2天1次;温郁金低、高剂量组分别给予灌胃相应药物1.4、2.8 g/kg,1天1次,1次0.2 m L;温郁金低、高剂量联合VCR化疗组分别给予低、高剂量温郁金（1.4、2.8 g/kg）联合VCR（0.28 mg/kg,2天1次）;各组均为14天。观察各组瘤体生长情况,计算抑瘤率,同时采用免疫组化及蛋白印迹法（Western blot）检测瘤体P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的定位及表达。结果 SGC-7901/VCR对VCR、阿霉素（ADM）、5-氟尿嘧啶（5-FU）及顺铂（DDP）均有一定耐药性,其中对VCR耐药性最强。SGC-7901/VCR脱药培养后增殖活性明显增强,各组荷瘤裸鼠随着时间的延长,肿瘤体积逐渐增大,以温郁金高剂量联合VCR组体积最小。与模型组、VCR组比较,温郁金高剂量联合VCR组较瘤体明显缩小（P〈0.05）,其抑瘤率（51.56%）明显增高,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。Western blot检测显示：与模型组比较,VCR组灰度值升高（P〈0.05）,温郁金高剂量组、温郁金低、高剂量联合VCR组中P-gp的相对表达量均明显减低（P〈0.05）。与VCR组比较,温郁金低、高剂量组及温郁金低、高剂量联合VCR组P-gp的灰度值均降低（P〈0.05）。免疫组化显示：与模型组比较,温郁金高剂量组、温郁金低、高剂量联合VCR组P-gp的表达积分均降低（P〈0.05）;与VCR组比较,温郁金低、高剂量组及温郁金低、高剂量联合VCR组P-gp的表达积分均明显降低（P〈0.05）。结论温郁金可逆转SGC-7901/VCR皮下移植瘤对VCR的耐药性,其作用机制可能与下调P-gp的表达有关,提示温郁金可能作为一种基于P-gp的多药耐药逆转剂。

关键词：温郁金胃癌多药耐药移植瘤 P-糖蛋白

miR-449a在乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型中的作用

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西安交通大学学报（医学版） 2017年第6期38卷 833-838页

作者：王红磊肖奕武力马大昌兰州大学第一医院乳腺科甘肃兰州73000

目的探究敲低miR-449a对裸鼠皮下乳腺癌细胞移植瘤生长的影响。方法本实验通过采用乳腺癌MCF-7细胞系建立乳腺癌的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将含有shRNA-miR-449a表达的质粒稳定转染MCF-7细胞,将筛选的稳转细胞采取多点注射的方法注入裸... 详细信息

目的探究敲低miR-449a对裸鼠皮下乳腺癌细胞移植瘤生长的影响。方法本实验通过采用乳腺癌MCF-7细胞系建立乳腺癌的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将含有shRNA-miR-449a表达的质粒稳定转染MCF-7细胞,将筛选的稳转细胞采取多点注射的方法注入裸鼠皮下,采用阴性质粒为阴性对照,PBS作为空白对照;处理裸鼠后检测成瘤体积并计算肿瘤生长抑制率;Real-time PCR检测肿瘤组织miR-449a、Notch 1表达情况;Western blot检测移植瘤组织内的Notch 1、β-catenin和E-cadherin蛋白水平;免疫组织化学技术检测肿瘤组织内Notch1、E-cadherin表达水平。结果移植瘤形成过程中裸鼠未出现死亡,肿瘤体积检测后发现miR-449a敲低后能够显著抑制肿瘤的生长(P移植瘤组织内表达降低,同时Notch 1蛋白表达降低,β-catenin表达降低,而E-cadherin蛋白表达升高;免疫组化结果也显示Notch 1蛋白水平降低,E-cadherin蛋白的表达水平升高(P移植瘤的生长。

关键词： miR-449a 乳腺癌裸鼠移植瘤

乳腺癌TE方案耐药株裸鼠移植瘤NE方案化疗疗效的相关性研究

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中国肿瘤临床 2011年第24期38卷 1543-1546页

作者：李迅李妍朱莉萍欧江华杨顺娥胡欣新疆医科大学附属肿瘤医院化疗科乌鲁木齐市830011

目的:评测TE方案耐药的人乳腺癌肿瘤细胞移植裸鼠后,NE方案的疗效和survivin、BCRP及Her-2基因表达的关系。方法:培养对TE方案化疗无效的人乳腺癌组织原代细胞,接种于裸鼠腋下,随机分为3组,分别为生理盐水组、NE方案低剂量组及标准剂量... 详细信息

目的:评测TE方案耐药的人乳腺癌肿瘤细胞移植裸鼠后,NE方案的疗效和survivin、BCRP及Her-2基因表达的关系。方法:培养对TE方案化疗无效的人乳腺癌组织原代细胞,接种于裸鼠腋下,随机分为3组,分别为生理盐水组、NE方案低剂量组及标准剂量组,处理前后分别测量裸鼠移植瘤的体积。采用RT-PCR法及Western-blot法分别检测化疗后移植瘤中survivin、BCRP及Her-2基因和蛋白的表达变化情况。结果:标准剂量组鼠移植瘤的生长抑制最为明显,肿瘤生长抑制率为74.5%,与对照组相比,NE组中survivin、BCRP及Her-2的基因和蛋白表达均显著下降(P<0.05)。结论:NE方案化疗对TE方案耐药的乳腺癌细胞均有较好抑制作用,可能与survivin、BCRP及Her-2基因的表达下调有关。

关键词：乳腺癌裸鼠移植瘤长春瑞滨多西紫杉醇 Survivin BCRP Her-2

银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用

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癌症 2008年第9期27卷 910-913页

作者：王明奎丁立生吴凤锷中国科学院成都生物研究所天然产物研究中心四川成都610041

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取... 详细信息

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞,观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率。测定银莲花素A的急性毒性。结果:银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4.64!g/mL和1.40!g/mL。4.5mg/kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60.5%、36.2%和61.8%。200mg/kg灌胃给药时抑瘤率为64.7%。灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1.1g/kg和16.1mg/kg。结论:银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物。

关键词：两头尖银莲花素A 抑瘤活性 S180细胞 H22细胞 U14细胞小鼠移植瘤

RNA干扰沉默Livin基因对裸鼠移植瘤生长的影响

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中华结核和呼吸杂志 2011年第1期34卷 43-47页

作者：陈愉生李友堂李鸿茹陈小岩林立芳福建医科大学省立临床医学院呼吸科福州350001 福建医科大学省立临床医学院病理科福州350001 福建省心血管病重点实验室

目的利用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术沉默凋亡抑制蛋白基因Livin基因在人肺腺癌细胞株SPC-A-1中的表达,探讨Livin基因表达沉默对SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的影响.方法以慢病毒为载体,将携带针对Livin基因短发夹RNA（short hair... 详细信息

目的利用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术沉默凋亡抑制蛋白基因Livin基因在人肺腺癌细胞株SPC-A-1中的表达,探讨Livin基因表达沉默对SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的影响.方法以慢病毒为载体,将携带针对Livin基因短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）及无关序列片段的shRNA转染SPC-A-1细胞,转染成功后将转染Livin shRNA的SPC-A-1细胞（实验组）、转染无关序列的SPC-A-1细胞（阴性对照组）及未转染任何序列的SPC-A-1细胞（空白对照组）分别接种于BALB/C裸鼠右腋皮下,复制SPC-A-1裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤时间、成瘤率、瘤体体积及重量,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率;RT-PCR、免疫组织化学法分别检测Livin mRNA及蛋白的表达情况,原位末端转移酶标记法（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测移植瘤组织凋亡情况.结果与空白对照组、阴性对照组比较,实验组裸鼠移植瘤成瘤时间晚,瘤体生长缓慢（F=70.509,P＜0.01）,体积抑瘤率达（59.5±3.4）%;瘤体重量明显减轻（F=12.821,P＜0.01）,瘤重抑瘤率达（71.1±5.6）%.实验组Livinα mRNA表达水平为（37.2±1.6）%,Livinβ mRNA表达水平为（29.4±1.1）%,明显低于空白对照组[（63.3±3.8）%,（53.2±3.4）%]及阴性对照组[（66.1±2.6）%,（52.3±3.1）%],差异有统计学意义（Fα=45.309,Fβ=30.076,均P＜0.01）.实验组Livin蛋白表达水平为（15.3±2.8）%,明显低于空白组的（51.3±2.1）%和阴性对照组的（52.5±2.5）%（F=78.92,P＜0.01）.实验组瘤组织细胞凋亡明显增多,凋亡率为（35.4±3.2）%,明显高于空白对照组的（5.4±1.3）%和阴性对照组的（8.6±1.5）%,差异有统计学意义（F=14.509,P＜0.01）.结论沉默SPC-A-1细胞中Livin基因表达可有效抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,Livin基因有望成为肺癌治疗的靶点之一.

关键词：基因 RNA干扰移植瘤 SPC-A-1细胞株

利用^(18)F-FDGPET-CT显像监测裸鼠鼻咽癌移植瘤早期放疗疗效的研究

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癌症 2010年第4期29卷 409-414页

作者：袁建伟冯彦林冼伟均贺小红袁白虹叶秋莲中山大学附属佛山医院核医学科广东佛山528000 中山大学附属佛山医院儿科广东佛山528000

背景与目的:早期监测和判断鼻咽癌放疗疗效,并提供个体化治疗是提高鼻咽癌患者生存率的重要因素之一。本研究拟探讨18F-FDG PET-CT显像在裸鼠鼻咽癌移植瘤早期放疗疗效评价中的价值,为进一步临床研究提供依据。方法:所有10只裸鼠鼻咽癌... 详细信息

背景与目的:早期监测和判断鼻咽癌放疗疗效,并提供个体化治疗是提高鼻咽癌患者生存率的重要因素之一。本研究拟探讨18F-FDG PET-CT显像在裸鼠鼻咽癌移植瘤早期放疗疗效评价中的价值,为进一步临床研究提供依据。方法:所有10只裸鼠鼻咽癌移植瘤动物模型于放疗前均先行18F-FDG PET-CT显像,并于分组前对其中7只裸鼠分别行早期和3h延迟PET-CT显像。而后将10只裸鼠鼻咽癌移植瘤动物模型随机分成对照组和放疗组。对照组的5只动物在显像完毕后即刻处死并取瘤体标本行病理学检查;放疗组的5只动物在接受12Gy放疗后的第2天、第4天、第6天再次行18F-FDG PET-CT显像,显像结束后即刻取瘤体标本行病理学检查。应用ROI技术测定瘤体T/NT比值和放疗前、后的瘤体积。结果:早期显像和延迟显像T/NT比值分别为1.806±0.532、1.777±0.597,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。放疗组在放疗前与放疗后第2天、第4天、第6天的T/NT比值分别为1.735±0.466、1.818±0.396、1.096±0.101和0.604±0.108;瘤体积分别为(1.48±0.27)cm3、(1.57±0.31)cm3、(1.59±0.31)cm3和(1.60±0.29)cm3。放疗后第6天与其他时间点瘤体T/NT比值差异有统计学意义(P瘤体死亡细胞比例为(93.00±7.42)%。结论:18F-FDG PET-CT显像在裸鼠鼻咽癌移植瘤早期放疗疗效评价中具有重要价值,且放疗后第6天可能是合适的时间选择点。放疗前18F-FDG PET-CT延迟显像的T/NT比值测定对鼻咽癌诊断可能没有意义。

关键词：裸鼠鼻咽癌移植瘤体层摄影术发射型计算机放射治疗

亚硝酸钠对H22荷瘤小鼠移植瘤上皮-间质转化的促进作用

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药学学报 2012年第11期47卷 1470-1476页

作者：徐红瑞林波王思谦张挚路晓霞刘悦皇甫超申河南大学医学院环境医学研究所河南开封475004 河南大学护理学院河南开封475004

研究亚硝酸钠诱导活性氧对H22荷瘤小鼠肝癌细胞上皮间质转化和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响,并探讨HIF-1α在这一过程中的作用。制备H22肝癌细胞荷瘤小鼠模型,亚硝酸钠处理组每天分别灌胃给予10、20和30 *** 1亚硝酸钠,对照组给予等... 详细信息

研究亚硝酸钠诱导活性氧对H22荷瘤小鼠肝癌细胞上皮间质转化和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响,并探讨HIF-1α在这一过程中的作用。制备H22肝癌细胞荷瘤小鼠模型,亚硝酸钠处理组每天分别灌胃给予10、20和30 *** 1亚硝酸钠,对照组给予等体积生理盐水,连续给药21天。与对照组相比,亚硝酸钠处理组的移植瘤体积和重量没有明显变化,但是肿瘤组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性下降,亚硝酸盐和丙二醛(MDA)含量升高;癌细胞浸润周围的肌肉和筋膜;免疫组化和Western blotting结果显示,细胞波形蛋白和HIF-1α表达增强,E-钙粘素表达下降;肿瘤细胞呈现出上皮间质转化(EMT)。结果提示,亚硝酸钠在体内能够促进鼠肝癌细胞EMT发生,其机制与亚硝酸盐诱导活性氧(ROS)促进HIF-1α表达增加有关。

关键词：亚硝酸盐 H22细胞移植瘤上皮间质转化缺氧诱导因子1α

靶向IGF1R的siRNA抑制人肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤的实验研究

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癌症 2007年第7期26卷 703-708页

作者：牛坚钱海鑫李向农韩泽广徐州医学院附属第一医院普外科江苏徐州221004 苏州大学附属第一医院普外科江苏苏州215006 国家人类基因组南方研究中心上海201203

背景与目的:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制哺乳动物基因表达已成为研究基因功能的一种有效方法。本研究探讨人胰岛素样生长因子1类受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的短发夹环RNA对人肝癌细胞株SMM... 详细信息

背景与目的:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制哺乳动物基因表达已成为研究基因功能的一种有效方法。本研究探讨人胰岛素样生长因子1类受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的短发夹环RNA对人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:设计并合成特异性靶向IGF1R的siRNA片段,构建SMMC7721-IGF1R-siRNA表达质粒,将其转入SMMC7721细胞。通过G418筛选出稳定株,移植裸鼠成瘤。同时设立对照组。根据体积的均数值绘制肿瘤生长曲线,以HE染色法观察质粒处理后瘤组织的病理改变,Westernblot检测肿瘤组织中IGF1R的表达变化,免疫组化SP法检测检测瘤组织内微血管密度,原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果:SMMC7721-IGF1R-siRNA组肿瘤体积与SMMC7721-IGF1R-mutation组、SMMC7721组相比差异有统计学意义(P瘤生长受到抑制,细胞凋亡指数[(50.2±6.4)%]明显高于SMMC7721-IGF1R-mutation组[(5.4±1.0)%]和SMMC7721组[(6.0±2.1)%](P瘤内IGFIR蛋白表达明显下调。SMMC7721-IGF1R-siRNA组微血管密度(11.3±4.4)与SMMC7721-IGF1R-mutation组(36.7±7.6)、SMMC7721组(28.4±6.5)相比明显下降(P移植瘤的生长。

关键词： RNA干扰人胰岛素样生长因子1类受体微血管密度基因表达 SMMC7721细胞移植瘤裸鼠

内皮抑素基因转移联合电离辐射对肺腺癌移植瘤生长的影响

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中华结核和呼吸杂志 2004年第10期27卷 683-686页

作者：凌春华季成陈延斌傅建新周菊英陈卫昌杨吉成苏燎原 215006 苏州大学附属第一医院呼吸内科 215006 苏州大学附属第一医院血液研究所 215006 苏州大学附属第一医院放疗科 215006 苏州大学附属第一医院消化科苏州大学基础医学院细胞工程室苏州大学放射医学与公共卫生学院放射生物学教研室

目的探讨内皮抑素(endostatin)基因转移联合电离辐射对肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法以逆转录病毒为载体,转导内皮抑素基因至肺腺癌A549细胞,获得含内皮抑素基因的A549/Endo细胞。20只裸鼠平均分为4组(A549、A549/Endo、A549+辐照、... 详细信息

目的探讨内皮抑素(endostatin)基因转移联合电离辐射对肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法以逆转录病毒为载体,转导内皮抑素基因至肺腺癌A549细胞,获得含内皮抑素基因的A549/Endo细胞。20只裸鼠平均分为4组(A549、A549/Endo、A549+辐照、A549/Endo+辐照组),A549、A549+辐照组裸鼠皮下种植A549细胞,A549/Endo、A549/Endo+辐照组裸鼠皮下种植A549/Endo细胞,建立移植瘤模型。A549、A549/Endo组裸鼠用于观察成瘤时间,并计算抑瘤率;另2组裸鼠于种植瘤细胞后第28天,用直线加速器电离辐照移植瘤体,剂量为20Gy,3d后重复照射20Gy;照射后继续饲养荷瘤鼠,定期观察移植瘤体积变化。于瘤细胞移植后第42天(照射后第14天)处死荷瘤鼠,用免疫组化法测定4组裸鼠瘤体的微血管密度(MVD)。结果聚合酶链测定(PCR)法证实,A549/Endo细胞基因组中整合有内皮抑素基因。裸鼠成瘤时间A549组(78±16)d、A549/Endo组(122±17)d,两组比较差异有显著性(P瘤细胞移植后42d,移植瘤体积A549组(9278±2692)mm3、A549/Endo组(2175±815)mm3,两组比较差异有显著性(P瘤率为765%。电离辐照后第14天,移植瘤体积A549+辐照组为(1577±490)mm3,A549/Endo+辐照组为(46±29)mm3,两组比较差异有显著性(P移植瘤组织MVDA549组3578?

关键词：移植瘤瘤体裸鼠肺腺癌内皮抑素基因联合 MVD 平均分显著性结论