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基于PI3K/Akt信号通路探讨黄芪多糖对肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤EMT进程的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第23期27卷 51-58页

作者：张颖王淳于丹高原井欢王莹刘春英济宁医学院山东济宁272000 辽宁中医药大学沈阳110032

目的:探讨黄芪多糖(APS)对转化生长因子-β_(-1)(TGF-β_(-1))诱导的肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤上皮间质转化(EMT)进程的影响及其潜在分子机制。方法:BALB/c裸鼠随机分为空载组(TGF-β_(-1)空载A549/DDP细胞),模型组,顺铂组,联合组(TGF-... 详细信息

目的:探讨黄芪多糖(APS)对转化生长因子-β_(-1)(TGF-β_(-1))诱导的肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤上皮间质转化(EMT)进程的影响及其潜在分子机制。方法:BALB/c裸鼠随机分为空载组(TGF-β_(-1)空载A549/DDP细胞),模型组,顺铂组,联合组(TGF-β_(-1)过表达A549/DDP细胞)。联合组灌胃APS(0.3 g·kg^(-1)·d^(-1))+腹腔注射顺铂(0.003 5 g·kg^(-1));顺铂组腹腔注射顺铂(0.003 5 g·kg^(-1))。药物干预后,处死裸鼠,取移植瘤和肺。称量瘤质量,计算抑瘤率;镜下计数肿瘤肺转移数;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤病理和肿瘤组织肺转移情况;免疫组化,蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤中EMT分子标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的蛋白和mRNA的表达。结果:与空载组比较,模型组瘤质量、肺转移结节数增加(P瘤细胞连接稀疏,细胞长梭样,肺部有大面积肿瘤结节,E-cadherin蛋白和mRNA表达降低,Vimentin,α-SMA蛋白和mRNA表达升高,磷酸化(p)-PI3K,p-Akt蛋白表达升高(P瘤质量、肺转移结节数减少(P瘤细胞连接紧密,细胞圆形或椭圆形,无明显肺转移,E-cadherin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),Vimentin,α-SMA蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),p-PI3K,p-Akt蛋白表达降低(P<0.05)。各组间PI3K,Akt蛋白表达差异无统计学意义。结论:APS对肺腺癌A549/DDP细胞EMT有抑制作用,这一作用可能与其抑制活化的PI3K/Akt蛋白表达有关。

关键词：黄芪多糖上皮间质转化(EMT) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt) 肺腺癌移植瘤

大黄素对裸鼠体内K562细胞移植瘤的抑制作用及其与调控Caspase-3和Caspase-9表达的关系

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中草药 2010年第5期41卷 751-756页

作者：王春光刘北忠金丹婷王翀朱丹吴燕钟梁重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016

目的探讨大黄素对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与Caspase-3和Caspase-9表达变化的关系。方法建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,随机分为大黄素低、中、高剂量(25、50、100mg/kg)3个实验组,以及模型组和羟基脲(120mg/kg)阳性对照... 详细信息

目的探讨大黄素对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与Caspase-3和Caspase-9表达变化的关系。方法建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,随机分为大黄素低、中、高剂量(25、50、100mg/kg)3个实验组,以及模型组和羟基脲(120mg/kg)阳性对照组,每组5只,ip连续给药12d,测量各组裸鼠肿瘤体积,称取瘤体质量,计算抑瘤率。采用HE染色光镜和透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡情况,应用RT-PCR检测肿瘤组织中caspase-3和caspase-9mRNA表达水平。Western blotting法检测肿瘤组织中proCaspase-3和proCaspase-9蛋白的表达。结果大黄素低、中、高剂量组肿瘤相对体积(RTV)分别为5.23±0.24、4.38±0.17、3.57±0.31;与模型组(10.45±0.47)相比,大黄素处理组肿瘤体积明显缩小,具有统计学意义(P移植瘤的生长,其机制可能与激活Caspase-3和Caspase-9信号转导通路有关。

关键词：大黄素 K562 移植瘤裸鼠细胞凋亡 Caspase-3 Caspase-9

时钟基因Bmal1对鼻咽癌移植瘤放疗敏感性的影响

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中国肿瘤临床 2020年第1期47卷 12-17页

作者：孟熙李媛媛蒋孑庆陈越黎小梅贺前勇张蓬新赵朝芬唐雅雪甘加应周建奖周定安金风贵州医科大学临床医学院贵阳市550004 贵州医科大学附属医院贵州省肿瘤医院肿瘤科贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州医科大学附属医院临床医学研究中心

目的:探讨双向调控时钟基因Bmal1(brain and muscle arnt-like1)对鼻咽癌CNE1裸鼠移植瘤生长的影响及与放疗敏感性的关系。方法:采用慢病毒感染方法,构建Bmal1基因CNE1OE(过表达组)、CNE1OENC(过表达对照组)、CNE1sh3(低表达组)、CNE1sh... 详细信息

目的:探讨双向调控时钟基因Bmal1(brain and muscle arnt-like1)对鼻咽癌CNE1裸鼠移植瘤生长的影响及与放疗敏感性的关系。方法:采用慢病毒感染方法,构建Bmal1基因CNE1OE(过表达组)、CNE1OENC(过表达对照组)、CNE1sh3(低表达组)、CNE1shNC(低表达对照组)4株细胞,Western blot验证各组细胞Bmal1蛋白表达情况;4株细胞分别皮下注射相应的4组裸鼠,移植瘤生长后测量其体积;给予6-MeV电子线15 Gy照射裸鼠移植瘤,观察放疗后各组移植瘤体积变化情况。剥离移植瘤,RTPCR及Western blot分别检测Bmal1、P53、P21 mRNA及蛋白表达情况。结果:Western blot结果提示,与各自对照组对比,CNE1OE组Bmal1蛋白过表达,CNE1sh3组Bmal1蛋白低表达,表明细胞转染成功。成功构建裸鼠移植瘤模型,CNE1OE组裸鼠移植瘤体积明显小于CNE1OENC组,CNE1sh3组体积明显大于CNE1shNC组(P移植瘤体积均缩小(P移植瘤生长,增强其放疗敏感性,可能与P53、P21蛋白上调相关;敲低则促进移植瘤生长,导致其辐射抗拒,可能与P53、P21蛋白下调相关。

关键词：鼻咽癌 Bmal1基因裸鼠移植瘤放疗敏感性

蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤的抑制作用

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中药材 2004年第11期27卷 842-845页

作者：曾飒刘德育叶燕丽王莲桂王炜中山大学药学院广州510080 中山大学肿瘤防治中心广州510080

目的 :为了进一步研究蛇葡萄素体内抗肿瘤作用 ,我们进行了人肺癌GLC 82裸小鼠移植瘤的抑瘤实验研究。方法 :人肺癌GLC 82细胞接种于裸鼠腋窝建立移植模型。荷瘤BALB/C裸鼠随机分成 6组 ,蛇葡萄素以 3个剂量腹腔给药。观察肿瘤体积、相... 详细信息

目的 :为了进一步研究蛇葡萄素体内抗肿瘤作用 ,我们进行了人肺癌GLC 82裸小鼠移植瘤的抑瘤实验研究。方法 :人肺癌GLC 82细胞接种于裸鼠腋窝建立移植模型。荷瘤BALB/C裸鼠随机分成 6组 ,蛇葡萄素以 3个剂量腹腔给药。观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤生长曲线 ,以此评价蛇葡萄素的抗瘤作用。结果 :2 5 0mg/kg蛇葡萄素对裸鼠移植瘤的抑制率 ,二次实验结果分别为 35 5 % (P 瘤增殖率则分别为 5 5 2 4 % (P 移植瘤具有显著的抑制作用。

关键词：蛇葡萄素肺癌 GLC-82 裸鼠移植瘤中医药疗法

Rb94对人肺腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及SphK表达影响的研究

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中国肿瘤临床 2010年第9期37卷 481-484页

作者：张萍刘芳栾力马道新王建波谭炳煦程玉峰山东大学齐鲁医院放疗科济南市250012 山东医学高等专科学校

目的：Rb94基因转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤，观察Rb94基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及对鞘氨醇激酶（sphingosine kinase，SphK）表达的影响。方法：收集一定数量的对数生长期A549细胞，生理盐水重悬后每只裸鼠右后肢皮下接种5×1... 详细信息

目的：Rb94基因转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤，观察Rb94基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及对鞘氨醇激酶（sphingosine kinase，SphK）表达的影响。方法：收集一定数量的对数生长期A549细胞，生理盐水重悬后每只裸鼠右后肢皮下接种5×10^6／0．1mL A549细胞悬液，待瘤体生长至一定体积后随机分为4组，分别为对照组、空载体组、脂质体组、转染Rb94基因组；每组裸鼠瘤体内分别注射PBS、质粒pIRES、脂质体（lipofectamine）、质粒pIRES～Rb94，观察肿瘤生长情况并检测抑瘤率；裸鼠脱颈处死后，采用Western bolt法检测瘤组织中Rb94基因表达情况，并采用实时RT—PCR和免疫荧光法（immunonuorescence，IF）观察其对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤中SphK表达的影响。结果：对照组及转染组裸鼠在接种部位均有移植瘤生成；与空白对照组、脂质体组、空载体组相比，转染Rb94基因组的裸鼠移植瘤的生长速度明显减慢，肿瘤的体积较小，重量较轻，有显著性差异（P〈0．05），而3个对照组之间，无显著性差异（P〉0．05）；空白对照组、空载体组、脂质体纽抑瘤率分别为0、11．78％、7．86％，而转染Rb94基因组平均抑瘤率高达51．99％，肿瘤生长明显抑制：SohK1在mRNA和蛋白水平表达下调而SohK2表达上调。结论：Rb94基因成功转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤；Rb94基因抑制裸鼠皮下肿瘤生长；Rb94基因抑制SphK1的表达，增强SphK2表达。

关键词：鞘氨醇激酶 A549细胞小鼠移植瘤

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人肺癌组织免疫缺陷鼠移植瘤模型的建立

癌症 2009年第8期28卷 890-893页

作者：胡野荣任泓刘哲亮喻风雷刘文亮周新民中南大学湘雅二医院胸心外科湖南长沙410011 美国Cell Signaling Technology公司马萨诸塞州波士顿01923

背景与目的:目前提倡对肿瘤实行靶向药物个性化治疗,建立不同通路异常肿瘤的动物模型成为必需。本研究探讨人非小细胞肺癌手术标本免疫缺陷鼠皮下移植瘤模型的建立及建模的适宜条件和方法。方法:选取BALB/c裸小鼠、SCID小鼠及NOD/scid... 详细信息

背景与目的:目前提倡对肿瘤实行靶向药物个性化治疗,建立不同通路异常肿瘤的动物模型成为必需。本研究探讨人非小细胞肺癌手术标本免疫缺陷鼠皮下移植瘤模型的建立及建模的适宜条件和方法。方法:选取BALB/c裸小鼠、SCID小鼠及NOD/scid小鼠各16只,采用套管针四点左边两块、右边一块式接种法,16例患者中每例患者的肿瘤组织标本分别接种于每个鼠种的一只。观察不同种免疫缺陷鼠移植瘤成瘤率、成瘤潜伏时间、肿瘤体积倍增时间、自然病亡率及左右两边接种点的成瘤率和头尾部成瘤点处死时大于1cm的比率,并鉴别移植瘤形态结构与来源组织的一致性及鉴定移植瘤是否为上皮来源。结果:总成瘤率为75%,其中4个病例只有SCID小鼠成瘤,2个病例只有BALB/c裸小鼠成瘤,NOD/scid小鼠无一例单独成瘤。不同种免疫缺陷鼠移植瘤成瘤率、成瘤潜伏时间和肿瘤体积倍增时间及左右两边接种点的成瘤率差异无统计学意义。SCID小鼠成瘤率最高,为56.25%;NOD/scid小鼠自然病亡率为25%,BALB/c裸小鼠、SCID小鼠在观察期内无一例病亡;处死时头部成瘤点大于1cm的比率(56.52%)与尾部成瘤点大于1cm的比率(25%)相比差异有统计学意义(P=0.037);所有移植瘤苏木精-伊红染色显示其形态结构均与来源组织一致,所有移植瘤角蛋白免疫组化均为阳性,显示移植瘤均为上皮来源。结论:四点两块套管针接种BALB/c裸小鼠和SCID小鼠各一只的方法能很好地建立非小细胞肺癌手术标本免疫缺陷鼠皮下移植瘤模型,头部移植瘤的生长速度明显快于尾部。

关键词：非小细胞肺癌移植瘤免疫缺陷小鼠套管针四点接种动物模型

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奥曲肽致裸鼠肝癌原位移植瘤坏死的实验研究

癌症 2009年第7期28卷 673-678页

作者：陈爽谢艳王春晖唐承薇四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室人类疾病相关多肽研究室四川成都610041 四川大学华西医院消化内科四川成都610041

背景与目的:生长抑素类似物奥曲肽可抑制肝癌的生长,但能否使其坏死、获得更好的抗肿瘤效果呢?本研究旨在观察奥曲肽在体内、外对肝癌细胞株HepG2的作用,探讨其致肿瘤坏死的机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝法检测体外HepG2细胞的增殖,建... 详细信息

背景与目的:生长抑素类似物奥曲肽可抑制肝癌的生长,但能否使其坏死、获得更好的抗肿瘤效果呢?本研究旨在观察奥曲肽在体内、外对肝癌细胞株HepG2的作用,探讨其致肿瘤坏死的机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝法检测体外HepG2细胞的增殖,建立裸鼠肝癌HepG2细胞原位移植瘤模型,奥曲肽组裸鼠皮下注射奥曲肽100μg/(kg·d);对照组皮下注射相同体积的生理盐水,连续用药8周。组织学评估肿瘤坏死程度,免疫组化检测移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,Westernblot和免疫组化检测生长抑素受体2(SSTR2)的表达。结果:奥曲肽(0.1～1000nmol/L)作用24h,不影响HepG2细胞增殖。奥曲肽组裸鼠肝癌移植瘤重[(7.15±2.96)g]高于对照组[(4.21±3.11)g],移植瘤坏死体积[(81.86%±0.05)%]大于对照组[(43.75±0.06)%],两组相比差异均有统计学意义(P移植瘤中未见VEGF表达。两组移植瘤组织血窦中SSTR2表达无显著性差异(P>0.05)。结论:在肝癌细胞活跃增殖条件下,奥曲肽通过移植瘤血窦中SSTR2介导,仅仅抑制肿瘤血管生成,可致裸鼠肝癌显著坏死的良好效应。

关键词：奥曲肽肝肿瘤 HepG2细胞移植瘤肿瘤坏死血管内皮生长因子

乳腺癌TE方案耐药株裸鼠移植瘤NE方案化疗疗效的相关性研究

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中国肿瘤临床 2011年第24期38卷 1543-1546页

作者：李迅李妍朱莉萍欧江华杨顺娥胡欣新疆医科大学附属肿瘤医院化疗科乌鲁木齐市830011

目的:评测TE方案耐药的人乳腺癌肿瘤细胞移植裸鼠后,NE方案的疗效和survivin、BCRP及Her-2基因表达的关系。方法:培养对TE方案化疗无效的人乳腺癌组织原代细胞,接种于裸鼠腋下,随机分为3组,分别为生理盐水组、NE方案低剂量组及标准剂量... 详细信息

目的:评测TE方案耐药的人乳腺癌肿瘤细胞移植裸鼠后,NE方案的疗效和survivin、BCRP及Her-2基因表达的关系。方法:培养对TE方案化疗无效的人乳腺癌组织原代细胞,接种于裸鼠腋下,随机分为3组,分别为生理盐水组、NE方案低剂量组及标准剂量组,处理前后分别测量裸鼠移植瘤的体积。采用RT-PCR法及Western-blot法分别检测化疗后移植瘤中survivin、BCRP及Her-2基因和蛋白的表达变化情况。结果:标准剂量组鼠移植瘤的生长抑制最为明显,肿瘤生长抑制率为74.5%,与对照组相比,NE组中survivin、BCRP及Her-2的基因和蛋白表达均显著下降(P<0.05)。结论:NE方案化疗对TE方案耐药的乳腺癌细胞均有较好抑制作用,可能与survivin、BCRP及Her-2基因的表达下调有关。

关键词：乳腺癌裸鼠移植瘤长春瑞滨多西紫杉醇 Survivin BCRP Her-2

银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用

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癌症 2008年第9期27卷 910-913页

作者：王明奎丁立生吴凤锷中国科学院成都生物研究所天然产物研究中心四川成都610041

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取... 详细信息

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞,观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率。测定银莲花素A的急性毒性。结果:银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4.64!g/mL和1.40!g/mL。4.5mg/kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60.5%、36.2%和61.8%。200mg/kg灌胃给药时抑瘤率为64.7%。灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1.1g/kg和16.1mg/kg。结论:银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物。

关键词：两头尖银莲花素A 抑瘤活性 S180细胞 H22细胞 U14细胞小鼠移植瘤