检索结果-南通市图书馆

薄皮甜瓜杂种纯度鉴定的SSR分子标记体系的建立与优化

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

薄皮甜瓜杂种纯度鉴定的SSR分子标记体系的建立与优化

作者：张海旺沈阳农业大学

学位级别：硕士

近几年,随着甜瓜生产行业的发展,甜瓜杂交品种已被广泛的应用于生产。然而,在人工种子生产过程中,如果隔离不严或者去雄不及时、不完全等,则易于形成自交种或者有其他假冒伪劣种子的混杂,导致杂种纯度降低,使农业生产遭受严重的损失。... 详细信息

近几年,随着甜瓜生产行业的发展,甜瓜杂交品种已被广泛的应用于生产。然而,在人工种子生产过程中,如果隔离不严或者去雄不及时、不完全等,则易于形成自交种或者有其他假冒伪劣种子的混杂,导致杂种纯度降低,使农业生产遭受严重的损失。为防止这种情况的发生,甜瓜杂种种子在包装销售前必须进行快速的纯度鉴定。因此,研究薄皮甜瓜杂种纯度快速鉴定的方法以及优化和建立标准化流程体系十分重要,使其能更广泛的应用于薄皮甜瓜种子市场监测和品种的快速鉴定,为实际生产提供有效的参考。本研究使用SSR分子标记技术对薄皮甜瓜杂种品种进行种子纯度的鉴定并建立了SSR标记技术标准化体系,试验研究如下:1.本试验以不同杂交种及其亲本共31种薄皮甜瓜品种为试验材料,从数据库和相关文献中选择70对引物,通过对杂交种亲本进行SSR-PCR扩增分析以及产物的检测,筛选出了11对多态性丰富且稳定性较好的核心引物。运用筛选得到的11对SSR多态性引物对甜瓜同母异父、同父异母杂交组合进行SSR分析,结果显示,至少需要两种或两种以上的引物才能鉴别杂交种及其同母异父、同父异母杂交组合。研究表明,SSR引物组合法可用于鉴定薄皮甜瓜杂交种的纯度,该方法能够有效的检测出杂交种中混有的自交系种子,并分辨出同母异父、同父异母杂交种,提高了杂种纯度鉴定的准确度。2.本研究试验材料为两叶一心时的甜瓜真叶叶片,分别采用CTAB法和试剂盒法提取DNA并进行电泳检测。结果显示,两种DNA提取方法都相对较稳定、清晰,杂带较少,均适用于SSR标记分析。但试剂盒法的扩增条带比CTAB法的扩增条带更为清晰,效果更加良好。分析并优化了影响SSR标记稳定性的几个因素,如模板DNA含量、退火时间、循环次数、退火温度、引物浓度等,确定了一套省时省力、经济有效的扩增程序,最终建立了一个具有良好的重复性、高清晰度、高分辨率的薄皮甜瓜标准化SSR-PCR扩增体系。反应体系:总体积为10μL,包括2μL体积模板DNA,浓度为100-200ng/μL,正反向引物各0.5μL-1μL,3μLmix(Taq DNA聚合酶、buffer和DNTP混合物)和3μL-4μL灭菌水。反应程序:预变性95℃,5min;95℃变性30s,退火55℃-58℃,40s,72℃延伸30s,35个循环;72℃终延伸5min;20μL反应体系。3.本研究通过运用商品品种设计不同纯度梯度杂种池进行杂种纯度鉴定,来替代田间形态学纯度鉴定验证分子标记检测纯度的可靠性。结果显示,该方法不仅能缩短纯度鉴定验证的时间和节省成本,而且也较为准确的显示可以用来进行SSR分子标记可靠性的验证。结果表明,不同纯度杂种池法可以用来代替田间形态学鉴定杂种纯度验证SSR分子标记的可靠性,SSR分子标记纯度鉴定技术可用于快速鉴定薄皮甜瓜杂种的纯度和真实性。本试验通过对建立的薄皮甜瓜杂种纯度鉴定的SSR分子标记标准化体系的反复验证。结果显示,该体系扩增产物稳定、重复性好、成本低,适合用于商业化的薄皮甜瓜杂种纯度的鉴定。综上所述,SSR引物组合法可以有效的提高杂种纯度鉴定的准确性。合适的DNA提取方法,合理的模板DNA含量、退火时间、循环次数、退火温度、引物浓度可以提高SSR标记扩增效果,提高清晰度和亮度,缩短时间。不同纯度杂种池法可以代替田间形态学杂种纯度鉴定法验证SSR标记的可靠性,SSR分子标记可以代替传统的田间形态学杂种纯度鉴定方法。本研究优化并建立了一套经济、可靠、实用的SSR分子标记标准化鉴定体系,用于薄皮甜瓜杂交种纯度的快速鉴定。

关键词：薄皮甜瓜 SSR标记杂交种种子纯度鉴定

5种杂交粳稻亲本SCAR标记的建立及其在真伪纯度鉴定中的应用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

5种杂交粳稻亲本SCAR标记的建立及其在真伪纯度鉴定中的应用

作者：潘爱虎厦门大学

学位级别：硕士

受试粳稻(Oryza sativa)亲本品种包括“寒丰A”、“8204A”等2个不育系,“寒丰B”、“8204B”等2个保持系,恢复系“R161”,这些材料为上海地区杂交稻推广应用的骨干亲本。本文选用36个随机引物对“寒丰A”、“寒丰B”、“8204A”、“82... 详细信息

受试粳稻(Oryza sativa)亲本品种包括“寒丰A”、“8204A”等2个不育系,“寒丰B”、“8204B”等2个保持系,恢复系“R161”,这些材料为上海地区杂交稻推广应用的骨干亲本。本文选用36个随机引物对“寒丰A”、“寒丰B”、“8204A”、“8204B”、“R161”等5份杂交粳稻亲本材料进行RAPD扩增,对其中特异RAPD标记片段进行克隆和测序。根据获得的特异DNA序列设计序列特征扩增区(SCAR)特异的引物,将18个RAPD标记转化成6个稳定的SCAR标记。用这些SCAR标记对亲本和杂种F1代单株进行检测,实验室检测种子纯度的结果与海南田间种植的结果基本一致。此外,应用水稻细胞质雄性不育特异的1对PCR引物,分辨出2对不育系/保持系亲本:“寒丰A”与“寒丰B”、“8204A”与“8204B”。这些证明了所得到的SCAR标记可以应用于杂交粳稻亲本种子的真伪纯度的鉴定工作。此外,本文还对真伪纯度的DNA分子鉴定技术体系的建立与可行性及实用性进行了讨论。

关键词：杂交粳稻种子纯度鉴定 SCAR标记

“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的拓展及实践

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

生物学教学 2022年第10期47卷 79-81页

作者：张志祥薛佳尔浙江省宁波市惠贞书院宁波315016 浙江省象山中学宁波315700

创设真实的实验情境“鉴定青梗菜种子纯度”,利用SSR分子标记方法将教材中的“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验具体化和生活化,组织学生亲身实践、主动探索。学生通过科学实践,关注、思考并尝试解决生产生活中的生物学问题,探究能力和创... 详细信息

创设真实的实验情境“鉴定青梗菜种子纯度”,利用SSR分子标记方法将教材中的“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验具体化和生活化,组织学生亲身实践、主动探索。学生通过科学实践,关注、思考并尝试解决生产生活中的生物学问题,探究能力和创新精神得到较大提升。

关键词：拓展实验 PCR扩增种子纯度鉴定

应用SSR标记技术鉴定强盛16号玉米单交种纯度

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山西农业科学 2012年第6期40卷 599-602页

作者：武岩军许晶车星星山西省农业科学院试验研究中心山西太原030006 山西省农业科学院食用菌研究所山西太原030031

试验以强盛16号玉米单交种及相应亲本自交系和20对玉米SSR位点引物为材料,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR位点引物。结果表明,bnlg2331引物的扩增产物呈现双亲互补的特征谱带,易于区分杂交种和亲本自交系。并通过对单籽粒DNA提取等... 详细信息

试验以强盛16号玉米单交种及相应亲本自交系和20对玉米SSR位点引物为材料,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR位点引物。结果表明,bnlg2331引物的扩增产物呈现双亲互补的特征谱带,易于区分杂交种和亲本自交系。并通过对单籽粒DNA提取等技术环节的改进,建立了一套简单、快速、准确、可靠的种子纯度鉴定方法。

关键词：玉米杂交种 DNA提取 SSR标记技术种子纯度鉴定引物筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

SSR技术在玉米纯度检测中的应用

种子世界 2015年第5期 15-16页

作者：胡德军魏国军侯明磊承德裕丰种业有限公司河北省杂交玉米工程技术研究中心

从玉米的表型认知到分子水平的认知,分子生物学技术提供了有效的方法手段,特别是近年SSR分子标记技术的快速发展已经成为被国内外广泛应用的方法,纯度作为商业种子最重要的指标之一,可以应用SSR技术对其进行检测,从而保证了种子的质量,... 详细信息

从玉米的表型认知到分子水平的认知,分子生物学技术提供了有效的方法手段,特别是近年SSR分子标记技术的快速发展已经成为被国内外广泛应用的方法,纯度作为商业种子最重要的指标之一,可以应用SSR技术对其进行检测,从而保证了种子的质量,为我国的种业市场保证农民的合法权益做出了重要贡献。现在国内很多种业公司依然利用形态特征、生理特性、同工酶、种子贮藏蛋白进行品种纯度检验,但是由于我国使用的亲本自交系比较集中,种质基础相对比较狭窄,所以容易受到环境因素的影响而不能做出有效的

关键词：纯度检测分子标记技术玉米种子纯度鉴定 SSR 品种纯度检验品种鉴定杂交种杂交品种

辣椒基因组SSR引物的开发及品种纯度分子鉴定

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

江苏农业科学 2020年第7期48卷 65-68页

作者：卢霞邓志军刘梦华赵玉虎司龙亭李文虎阿门江苏绿港现代农业发展有限公司江苏宿迁223800

辣椒是世界上重要的蔬菜作物之一,基因组简单重复序列(simple sequence repeats,简称SSR)标记的开发对于辣椒分子育种和杂交种子纯度检测具有重要意义。为了检测辣椒品种绿陇3号杂交种子的纯度,基于辣椒全基因组序列开发了75对SSR标记... 详细信息

辣椒是世界上重要的蔬菜作物之一,基因组简单重复序列(simple sequence repeats,简称SSR)标记的开发对于辣椒分子育种和杂交种子纯度检测具有重要意义。为了检测辣椒品种绿陇3号杂交种子的纯度,基于辣椒全基因组序列开发了75对SSR标记。结果表明,只有SSR标记p50对父母本的扩增结果表现为带型清晰、共显性,且具有高多态性,可进一步用于杂交种的纯度检测。为了确保标记p50的准确性和可靠性,对其PCR产物进行了进一步测序。测序结果表明,在父母本中分别扩增出了251、293 bp的序列。用标记p50对绿陇3号辣椒进行纯度检测,结果显示,种子纯度为100%,鉴定结果与田间纯度一致。新SSR分子标记的开发,为辣椒杂交种子纯度的鉴定提供了参考,也为辣椒种质资源遗传多样性分析及分子育种研究奠定了基础。

关键词：辣椒 SSR 分子标记种子纯度鉴定

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳中常见故障及纠正方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农村科技开发 2001年第6期 17-18页

作者：刘素萍杨喆河北省保定市种子监督检验管理站 071051 保定市种子公司 071051

近几年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳法广泛应用于农作物遗传育种及种子纯度鉴定等方面。它是根据种子内所含蛋白质种类的不同,通过分子筛效应和电泳分离的电荷效应,得到不同的电泳谱带来加以鉴别的。在电泳过程中,如操作不当,常会出现一些异... 详细信息

近几年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳法广泛应用于农作物遗传育种及种子纯度鉴定等方面。它是根据种子内所含蛋白质种类的不同,通过分子筛效应和电泳分离的电荷效应,得到不同的电泳谱带来加以鉴别的。在电泳过程中,如操作不当,常会出现一些异常情况。

关键词：蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳故障现象故障排除农作物遗传育种种子纯度鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

对江苏现阶段南鉴工作的思考

种子科技 2001年第3期19卷 138-139页

作者：孙卫永江苏省种子站南京210013

南鉴是指利用海南冬季温度和光照条件进行杂交稻及其亲本种子纯度种植鉴定.江苏从1992年开始由省种子站统一组织开展南鉴工作.通过南鉴工作,有效防止了质量事故的发生,创造了巨大的社会效益和经济效益.截止至2000年,共检测样品47 411份... 详细信息

南鉴是指利用海南冬季温度和光照条件进行杂交稻及其亲本种子纯度种植鉴定.江苏从1992年开始由省种子站统一组织开展南鉴工作.通过南鉴工作,有效防止了质量事故的发生,创造了巨大的社会效益和经济效益.截止至2000年,共检测样品47 411份,查出不合格种子750余万kg.如果这些种子用于生产,将导致550万亩大田因纯度不合格而减产,按每亩减产30 kg计算,累计挽回损失1.65亿kg稻谷.但随着杂交稻组合的更新和海南形势的变化,我省的南鉴工作遇到了一些新的问题.本人根据近几年从事南鉴工作的实践,就现阶段如何开展南鉴工作谈一些看法.

关键词：江苏水稻种子纯度鉴定管理鉴定技术

玉米杂交种丹玉13号酯酶同工酶“标准谱带”初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

杂粮作物 2002年第1期22卷 55-56页

作者：陈岩孙英华余国辉陈梦非辽宁省风沙地改良利用研究所辽宁阜新123000 辽宁省鞍山市千山区景区管委会辽宁鞍山114000

利用同工酶电泳法进行杂交玉米种子的纯度鉴定较常规的田间种植鉴定和化学染色鉴定具有快速、准确、低耗、不受环境影响等诸多优点 ,是目前已经公认的一种较为可靠的方法。但是 ,同工酶电泳法分析技术需要相对高技能的工作人员 ,需要对... 详细信息

利用同工酶电泳法进行杂交玉米种子的纯度鉴定较常规的田间种植鉴定和化学染色鉴定具有快速、准确、低耗、不受环境影响等诸多优点 ,是目前已经公认的一种较为可靠的方法。但是 ,同工酶电泳法分析技术需要相对高技能的工作人员 ,需要对电泳方法和谱带分析方法实行标准化。

关键词：玉米丹玉13号品种酯酶同工酶标准谱带种子检验种子纯度鉴定