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四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1等位基因的分布及HLA-DPB1在HSCT中错配模式的初步研究

四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1等位基因的分布及HLA-DPB1在HSCT中错...

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作者：王春艳北京协和医学院

学位级别：硕士

[目的]调查四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1等位基因多态性分布情况,估计四川骨髓库汉族人群非血缘造血干细胞移植中可能存在的HLA-DPB1错配情况及错配模式,同时分析HLA-A,-B,-DRB1全相合的同胞间HLA-DPB1位点存在的错配情况及错配模式。[方... 详细信息

[目的]调查四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1等位基因多态性分布情况,估计四川骨髓库汉族人群非血缘造血干细胞移植中可能存在的HLA-DPB1错配情况及错配模式,同时分析HLA-A,-B,-DRB1全相合的同胞间HLA-DPB1位点存在的错配情况及错配模式。[方法]从四川骨髓库随机抽取1097份四川汉族非血缘造血干细胞移植捐献者DNA样本,从四川省脐带血造血干细胞库和重庆市血液中心临床移植配型供受者家系中筛选同胞间HLA-A,-B,-DRB1全相合的移植家系901个。采用PCR-SBT技术对DNA样本进行HLA-DPB1测序分型。经ABI 3730测序仪测序,用UTYPE6.0软件分析结果。对于因第二外显子区域内的Trans/cis连锁产生的模棱两可结果,设计组特异性测序引物(Group Specific Sequencing Primers, GSSPs)进行单等位基因测序。对于区别在第二外显子外的模棱两可结果,以G为后缀表G组,指定分型结果。用直接计数法统计四川骨髓库汉族人群中HLA-DPB1等位基因的基因频率;用SPSS19.0软件对不同人群HLA-DPB1等位基因分布进行X2检验。采用T细胞表位(T-cell-epitope, TCE) 3/4模型理论推测四川汉族非血缘造血干细胞移植供受者之间及HLA-A,-B,-DRB1全相合的同胞之间可能存在的HLA-DPB1等位基因错配模式。[结果](1)在四川骨髓库汉族人群中共检出35种HLA-DPB1等位基因型别,较常见的等位基因及其频率分别是：HLA-DPB1*05:01:01G(gene frequency, GF=40.9%)、*02:01:02G(GF=16.1%)、*02:02(GF=8.4%)、* 13:01:01G(GF=7.9%)、*04：01：01G(GF=6.8%)等,这5种等位基因共占80.1%。35种等位基因中检出9种美国组织相容性和免疫遗传学协会(American Society for Histocompatibility and Immunogenetics, ASHI)常见及确认等位基因(Common and Well-Documented, CWD)表中尚不包含的等位基因,分别是：DPB1*41：01：01(5例),DPB1*48：01(3例),DPB1*100：01(3例),DPB1*04:01:15、DPB1*25:01、DPB1*71:01、DPB1*91:01、DPB1*93：01和DPB1*331：01各1例。还有2例新等位基因,世界卫生组织命名委员会将其分别命名为DPB1*363：01和DPB1*394：01。四川骨髓库汉族人群与广州汉族人群HLA-DPB1等位基因分布之间的差异不具有统计学意义(X2=21.556,P>0.01),而与山东汉族(X2=51.134,P错配占34.28%,在GvH方向和HvG方向的禁忌错配分别为17.27%,TCE3模型允许而TCE4模型不允许的错配在GJvH方向和HvG方向分别为15.59%。(3)移植家系研究中发现DPB1位点交换率为5.2%。允许错配占交换家系53%;另外47%为禁忌错配。]HLA-DPB1禁忌错配在HLA-A,-B,-DRB1全相合的同胞中占2.44%。[结论]四川骨髓库汉族人群中HLA-DPB1高频等位基因分布集中,多态性较强,并具有自身的分布特点。根据TCE模型分析表明,在四川汉族非血缘造血干细胞移植时可能存在HLA-DPB1的禁忌错配,提示临床需要对此重视。根据TCE模型分析发现,在HLA-A,-B,-DRB1全相合的同胞间可能存在HLA-DPB1的交换,在进行同胞间造血干细胞移植时,也可能存在HLA-DPB1的禁忌错配。

关键词： HLA-DPB1 四川汉族测序高分辨分型禁忌错配

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