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胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展

第三军医大学学报 2003年第3期25卷 267-269页

作者：徐海伟吴旋黎海蒂第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038

胚胎干细胞(Embryonic stem cell，ESc)是从附置前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制分化培养的一种全能性细胞系。早在1981年，英国剑桥大学的Evans和Kaufman用延缓着床的胚泡、美国加州大学旧金山分校的Martin用条件培养基分别成... 详细信息

胚胎干细胞(Embryonic stem cell，ESc)是从附置前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制分化培养的一种全能性细胞系。早在1981年，英国剑桥大学的Evans和Kaufman用延缓着床的胚泡、美国加州大学旧金山分校的Martin用条件培养基分别成功地分离、体外培养了小鼠ESc。除小鼠外，还有金黄地鼠、猪、牛和猴等动物的胚胎干细胞系成功建立。1998年Thom-son和Gearhart分别建立了人胚胎干细胞系~[1]。ESc既具有细胞系可扩增、遗传操作和冻存的特点；又类似胚胎细胞，含有正常的二倍体核型，具有发育的全能性。将ESc与受体胚胎嵌合或直接移植到发育中的脑和脊髓，能形成各种类型的神经细胞。采用体外培养ES细胞获得的材料进行神经移植，在动物实验上已取得初步成功。

关键词：胚胎干细胞神经细胞分化研究进展

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人脐带间充质干细胞向神经细胞分化的研究

中华神经外科杂志 2005年第7期21卷 388-392页

作者：范存刚张庆俊韩忠朝北京大学人民医院神经外科 100044 中国医学科学院中国协和医科大学天津血液病研究所

目的研究人脐带分离的间充质干细胞向神经细胞分化的可能性.方法将剔除动静脉的新鲜人脐带组织切成小块培养,得到贴壁细胞;经传代培养、细胞周期分析、流式细胞检测后,再以不同方案诱导向其神经细胞分化,并以免疫荧光和RT-PCR方法进行鉴... 详细信息

目的研究人脐带分离的间充质干细胞向神经细胞分化的可能性.方法将剔除动静脉的新鲜人脐带组织切成小块培养,得到贴壁细胞;经传代培养、细胞周期分析、流式细胞检测后,再以不同方案诱导向其神经细胞分化,并以免疫荧光和RT-PCR方法进行鉴定.结果培养5-7d后,有细胞从组织块中游出.细胞传代培养达23代后无明显的形态和增殖能力改变.细胞周期分析表明80%以上的细胞都处于G0～G1期.流式细胞检测表明这些细胞表达CD13、CD29、CD44、CD90、CD105和CD166等MSCs标志物.经神经分化诱导后,部分细胞呈现出与神经元或神经胶质细胞类似的形态;免疫荧光检测表明,第二神经分化诱导方案优于第一方案,其NSE和MBP阳性细胞分别达80.8%±3.9%、4.2%±1.3%,但未能见到GFAP阳性细胞.RT-PCR进一步证实了这些神经标志物的表达.结论人脐带间充质干细胞具有向神经细胞分化的潜能,可作为神经系统疾病细胞移植治疗的备选来源.

关键词：神经细胞分化间充质干细胞人脐带 RT-PCR方法细胞周期分析流式细胞检测细胞传代培养神经胶质细胞免疫荧光检测细胞移植治疗神经系统疾病分化诱导阳性细胞 CD166 CD105 贴壁细胞增殖能力 CD13 细胞表达 CD29

向神经细胞分化的骨髓间充质干细胞在中枢神经系统疾病治疗中的应用

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吉林大学学报(医学版) 2003年第6期29卷 856-859页

作者：郭丽孟洪琪范洪学吉林大学公共卫生学院毒理学教研室吉林长春130021

近年来发现 ,骨髓间充质干细胞 ( MSCs)不但能分化成骨、软骨、脂肪等中胚层起源的细胞 ,而且能分化成神经元和神经胶质细胞等外胚层起源的细胞。许多学者将 MSCs移植进一些中枢神经系统疾病动物模型中 ,如 :遗传性脱髓鞘性神经病、脑... 详细信息

近年来发现 ,骨髓间充质干细胞 ( MSCs)不但能分化成骨、软骨、脂肪等中胚层起源的细胞 ,而且能分化成神经元和神经胶质细胞等外胚层起源的细胞。许多学者将 MSCs移植进一些中枢神经系统疾病动物模型中 ,如 :遗传性脱髓鞘性神经病、脑卒中、脑外伤等 ,获得一些疗效 ,为中枢神经系统 ( CNS)疾病的治疗探索一条新途径。这些研究表明 MSCs是细胞治疗和基因治疗 CNS疾病的种子细胞之一。

关键词：骨髓细胞神经细胞分化骨髓间充质干细胞中枢神经系统疾病治疗

脑源性神经营养因子基因转导对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响

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中华医学杂志 2004年第24期84卷 2115-2117页

作者：赵连旭张杰孟玲曹丰王冬梅南雪李艳华王韫芳徐小虎裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞生物学研究室北京100850 汕头大学医学院病理与病理生理学系

动物实验表明骨髓间充质干细胞(MSC)移植到脑组织中可长期存活,并可向包括神经元在内的神经细胞分化[1,2].但MSC移植也面临一个问题:移植细胞多分化为胶质细胞,分化为神经元的数量较少.本研究旨在观察外源基因转入MSC后,持续稳定高表达... 详细信息

动物实验表明骨髓间充质干细胞(MSC)移植到脑组织中可长期存活,并可向包括神经元在内的神经细胞分化[1,2].但MSC移植也面临一个问题:移植细胞多分化为胶质细胞,分化为神经元的数量较少.本研究旨在观察外源基因转入MSC后,持续稳定高表达的脑源性神经营养因子(BDNF)对MSC向神经细胞分化的作用。

关键词：神经细胞分化脑源性神经营养因子骨髓间充质干细胞基因转导神经元移植 MSC 外源基因胶质细胞高表达

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人脐血单个核细胞向神经细胞分化

解剖学杂志 2004年第6期27卷 592-595页

作者：鄢文海刘计荣王建枝曹孟德许燕韩雪飞邢莹华中科技大学同济医学院病理生理学教研室武汉430022 郑州大学医学院病理生理学教研室郑州大学医学院干细胞研究中心

目的 :观察培养前后人脐血单个核细胞 (MNCs)的形态学及免疫反应性变化 ,探讨其能否向神经细胞的分化及机制。方法 :密度梯度离心脐血中单个核细胞 ,接种并用EGF和bFGF刺激细胞生长 ,倒置显微镜下观察培养前后细胞形态变化 ,并行免疫细... 详细信息

目的 :观察培养前后人脐血单个核细胞 (MNCs)的形态学及免疫反应性变化 ,探讨其能否向神经细胞的分化及机制。方法 :密度梯度离心脐血中单个核细胞 ,接种并用EGF和bFGF刺激细胞生长 ,倒置显微镜下观察培养前后细胞形态变化 ,并行免疫细胞化学鉴定。结果 :培养前脐血MNCs胞体小呈圆形 ,nestin阳性细胞、MAP2阳性细胞散在分布 (阳性率为 1 .5 %和 3 .4% )无GFAP阳性细胞着色。培养 1 4d后 ,细胞群中相邻细胞突起连成网状 ;MAP2、GFAP染色阳性细胞成片状分布 (阳性率 3 3 .5 %和 2 4.6% ) ,未见nestin阳性细胞。结论 :脐血细胞中可能有多能干细胞。

关键词：单个核细胞人脐血 GFAP 神经细胞分化 nestin阳性细胞阳性率刺激细胞 MNC 密度梯度离心多能干细胞

乙醇对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞分化的影响

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神经解剖学杂志 2016年第3期32卷 345-351页

作者：贾景娜史为博易善勇王冉张国忠马春玲左敏李英敏河北医科大学法医学系河北法医学重点实验室及法医鉴定河北省法医分子鉴定协同创新中心石家庄050017 河北医科大学第一医院精神科石家庄050031

目的:观察神经细胞微管相关蛋白2(microtubeasso ciated protein-2,MAP2)、孤儿核受体1(nuclear receptor-related factor 1,NURR1)、拓扑异构酶Ⅱβ(DNA topoisomereⅡβ,TopoⅡβ)在乙醇毒性作用下的表达变化,探讨MAP2、NURR1、TopoⅡβ与乙醇导致的神经细胞分化异常的相关关系。方法:取新生鼠(出生24 h内),75%酒精消毒,断头取脑,分离皮层神经细胞接种于培养板,给予剂量75 mmol/L的乙醇培养3 d、5 d、7 d后,采用免疫荧光观察MAP2、NURR1、TopoⅡβ的表达变化;Fluoro-Jade B荧光染色观察神经细胞变性坏死情况。结果:随乙醇染毒时间的延长,原代培养的神经细胞分布较正常对照组稀疏,MAP2的表达发生了变化,以7 d组变化最明显,突起变细变短,阳性表达减弱;NURR1及TopoⅡβ的表达也随乙醇染毒时间的延长,阳性细胞数目及阳性信号表达的强度均呈下降趋势,以7 d最为显著。NURR1阳性细胞计数为(9.6±3.5)与正常对照组的(45.2±3.96)有显著差异(P细胞。结论:MAP2、NURR1、TopoⅡβ可能参与了乙醇导致的神经细胞分化异常,改变了细胞骨架稳定,最终导致了部分神经细胞的变性坏死。

关键词：原代培养乙醇神经细胞分化 Fluoro-Jade B荧光标记大鼠

不同血清浓度对bFGF联合EGF诱导BMSCs向神经细胞分化的影响

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神经解剖学杂志 2013年第1期29卷 18-24页

作者：何丁文殷嫦嫦殷明罗元一刘玉亮梁广胜南昌大学第二附属医院骨一科南昌330006 南昌大学研究生院医学部南昌330006 九江学院分析与检测实验室九江332000

目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响。方法:全骨髓贴壁法体外分离培养BMSCs,流式细胞法检测BMSCs表面骨髓基质标志CD90和造血细胞标志CD45,MTT法绘制第3(P3)代BMSCs生长曲线。取P4代细胞分为3组给予不同诱导条件,分别给予含20 ng/ml的bFGF和20 ng/ml EGF的无胎牛血清(A组)、10 ml/L胎牛血清(B组)及100 ml/L胎牛血清(C组)的DMEM/F-12培养液进行诱导,倒置显微镜观察细胞的形态变化,诱导6 d时免疫组织化学法检测细胞内神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,台盼蓝染色检测各组细胞的活力。结果:BM-SCs经3-4次传代培养后形态大致呈单一的长梭形或扁平形,流式细胞鉴定显示CD90阳性,CD45阴性;细胞生长曲线近似呈"S"形;诱导后可见细胞胞体收缩,呈双极、多极并伸出突起;诱导6 d时3组活细胞率分别为:86.57%、95.29%、97.32%;免疫组化各组均见NSE、GFAP表达,3组NSE阳性率高于GFAP,A组NSE阳性率高于B、C组,差异具有统计学意义(P神经细胞分化,在无血清条件下趋向于向神经元分化,在高浓度血清条件下趋向胶质细胞分化。

关键词：碱性成纤维生长因子表皮生长因子胎牛血清 BMSCs 神经细胞分化

Wnt信号转导途径对神经细胞分化和突触形成作用的研究进展

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神经解剖学杂志 2009年第6期25卷 695-698页

作者：王莉伍亚民第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

Wnt基因定位于染色体12q13上,它所调控的信号传导途径称为Wnt信号转导途径.最早的该途径研究与肿瘤的发生、发展相关,近年随着研究的深入,发现它在生物发育,尤其是中枢神经系统的发育中发挥着重要的作用.

关键词：信号转导途径神经细胞分化 Wnt 形成作用突触信号传导途径中枢神经系统生物发育

脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞分化及其在脑缺血疾病治疗中的应用进展

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中国康复医学杂志 2007年第11期22卷 1050-1053页

作者：董静刘斌华北煤炭医学院附属医院神经内科河北省唐山市063000

近年来，细胞移植治疗脑缺血疾病已成为研究热点，多种细胞已被用于基础研究及临床治疗中。目前常用的种子细胞是骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs），它在一定的条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌母细胞... 详细信息

近年来，细胞移植治疗脑缺血疾病已成为研究热点，多种细胞已被用于基础研究及临床治疗中。目前常用的种子细胞是骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs），它在一定的条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌母细胞和神经细胞。但骨髓穿刺具有创伤性，有一定的痛苦，且只能得到少量的细胞（大约1MSC／10s基质干细胞），需经体外大量扩增才能满足临床需要，是一个费时、昂贵、并有细胞污染和丢失风险的过程，因此。广泛、大量使用颇为受限。

关键词：神经细胞分化骨髓基质细胞脑缺血疾病脂肪组织来源疾病治疗细胞移植治疗体外大量扩增临床治疗